Resultado da pesquisa (59)
Termo utilizado na pesquisa frangos
#1 - Vertebral osteomyelitis caused by Enterococcus faecalis in broiler chickens from southern Brazil
Abstract in English:
Enterococcal spondylitis affects poultry and causes progressive lameness. This study reports what seems to be the first case of vertebral osteomyelitis caused by Enterococcus in broiler chickens in southern Brazil. We also conducted an experimental infection to evaluate microorganismal characteristics and pathogenicity in broiler chickens. We performed bacterial isolation, identification, and histopathology. The isolates were tested for their growth and survival capacity at different temperatures, pH values, and antimicrobial resistance profiles. The experiment infection was conducted with broiler breeders (n=9). Group 1 = negative control, Group 2 = challenged orally, Group 3 = challenged via air sac. The autopsy was performed on the 50th day of life (DOL). The report showed spondylitis and fusion of thoracic vertebra, accompanied by spinal cord compression, and femoral head necrosis. We used the isolates (n=17) to test their growth at 10°C and 45°C, survival capacity for up to 60° for 30 min, and growth under pH levels from four to 12. Higher resistance was observed against macrolides and quinolones. On experimental infections, all animals expressed signs of lameness and “sitting on the hocks”. Enterococcus faecalis is the causal agent of enterococcal spondylitis in broilers in southern Brazil, which is an underreported and emerging pathological condition that requires attention.
Abstract in Portuguese:
A espondilite enterocócica afeta aves e causa claudicação progressiva. Este estudo relata o primeiro caso de osteomielite vertebral causada por Enterococcus em frangos de corte no sul do Brasil. Também conduzimos uma infecção experimental para avaliar as características microbianas e a patogenicidade em frangos de corte. Realizamos isolamento bacteriano, identificação e histopatologia. Os isolados foram testados quanto ao seu crescimento e capacidade de sobrevivência em diferentes temperaturas, valores de pH e perfil de resistência antimicrobiana. O experimento de infecção foi conduzido com matrizes de corte (n=9). Grupo 1 = controle negativo, Grupo 2 = provocado oralmente, Grupo 3 = provocado via saco aéreo. A autópsia foi realizada no 50º dia de vida (DOL). O laudo mostrou espondilite e fusão de vértebra torácica, acompanhada de compressão da medula espinhal e necrose da cabeça do fêmur. Usamos os isolados (n=17) para testar seu crescimento a 10°C e 45°C, capacidade de sobrevivência até 60° por 30 min e crescimento em níveis de pH de quatro a 12. A maior resistência foi observada contra macrolídeos e quinolonas. Na infecção experimental, todos os animais manifestaram sinais de claudicação e postura sentada sobre os jarretes. Enterococcus faecalis é o agente causal da espondilite enterocócica em frangos de corte no sul do Brasil, que é uma condição patológica emergente e subnotificada que requer atenção.
#2 - Characterization of coccidiosis and evaluation of suggestive cases of subclinical necrotic enteritis in broilers
Abstract in English:
This study performed the characterization of coccidiosis in broilers and evaluated the occurrence of suggestive cases of necrotic enteritis (NE), seeking if there is an association between the diseases in Brazilian flocks. Two hundred and fifty-six birds from 32 flocks were evaluated. Macroscopic and histopathological lesions were graduated for coccidiosis and NE. Intestinal content was investigated by polymerase chain reaction (PCR) for seven species of Eimeria and by selective anaerobic culture for Clostridium perfringens and identification of the NetB gene. Flocks positive for coccidiosis represented 93.8%. Macroscopic lesions of coccidiosis were Grade 1 for E. acervulina (27%); E. tenella (9.7%) and E. maxima (8.9%). Histopathological evaluation showed Grade 1 in duodenum (38.2%); jejunum (21.4%); cecum (9.3%) and ileum (5%). PCR demonstrated positivity for E. tenella (21.9%), E. maxima (18.8%), and E. acervulina (3.1%). Suggestive macroscopic lesions of necrotic enteritis ranged from Grade 1 (16%), 2 (23%) and 3 (10,9%). Histopathology indicated the absence of necrosis, showing only hemorrhage in the mucosa and submucosa, with the presence of Eimeria spp. Clostridium perfringens type A netB+ was not isolated, demonstrating that macroscopic lesions found mostly in the jejunum did not characterize NE, based on histopathology and negativity of the NetB gene. The study suggests that, due to the high occurrence of coccidiosis, many macroscopic findings suggestive of NE are, in fact, attributed to atypical lesions caused by the reproduction of Eimeria spp.
Abstract in Portuguese:
Este estudo realizou a caracterização de coccidiose em frangos de corte e avaliou a ocorrência de casos sugestivos de enterite necrótica (EN), buscando se há alguma associação entre estas duas enfermidades em lotes de frango de corte no Brasil. Foram avaliadas 256 aves de 32 lotes. Lesões macroscópicas e histopatológicas foram graduadas para coccidiose e EN. O conteúdo intestinal foi investigado por reação em cadeia da polimerase (PCR) para sete espécies de Eimeria e por cultura anaeróbia seletiva para Clostridium perfringens e identificação do gene NetB. Os lotes positivos para coccidiose representaram 93,8%. Lesões macroscópicas de coccidiose foram de Grau 1 para E. acervulina (27%); E. tenella (9,7%) e E. maxima (8,9%). A avaliação histopatológica mostrou Grau 1 no duodeno (38,2%); jejuno (21,4%); ceco (9,3%) e íleo (5%). A PCR demonstrou positividade para E. tenella (21,9%), E. maxima (18,8%) e E. acervulina (3,1%). Lesões macroscópicas sugestivas de enterite necrótica variaram de grau 1 (16%), 2 (23%) e 3 (10,9%). A histopatologia indicou ausência de necrose, apresentando apenas hemorragia em mucosa e submucosa, com presença de Eimeria spp. Clostridium perfringens tipo A netB + não foi isolado, demonstrando que lesões macroscópicas encontradas principalmente no jejuno não caracterizaram NE, com base na histopatologia e negatividade do gene NetB. O estudo sugere que, em virtude da alta ocorrência de coccidiose nos lotes, muitos achados macroscópicos sugestivos de EN são, na verdade, atribuídos a lesões atípicas provocadas pela reprodução de Eimeria spp.
#3 - Comparison of macroscopy, histopathology and PCR for diagnosing Eimeria spp. in broiler chickens
Abstract in English:
Coccidiosis is a disease of great importance in industrial poultry. The correct diagnosis directs the poultry industry to its best treatment and control. Thus, a survey of Eimeria spp. was carried out in intestines of 64 broiler flocks, with an average age of 29 days. Eight broilers from each flock were randomly removed from the slaughter line, in a total of 512 samples. Macroscopic and histopathological lesions in the intestine were classified into Scores 0 to 4. Polymerase chain reaction (PCR) was used to research the oocysts from the seven species of Eimeria spp. in the intestinal content. The macroscopic evaluations showed that 59.4% (38/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 32.8% (21/64) for E. maxima, 29.7% (19/64) for E. tenella, and 34.4% (22/64) for E. brunetti. The histopathological evaluation showed that 87.5% (56/64) of the flocks had at least one broiler with parasitic structures compatible with Eimeria spp. in the duodenum, 70.3% (45/64) in the jejunum, 18.8% (12/64) in the ileum, 46.9% (30/64) in the cecum, and 4.7% (3/64) in the colon. In PCR, 21.9% (14/64) of the flocks were positive for E. acervulina, 12.5% (8/64) for E. maxima, 3.1% (2/64) for E. mitis, and 32.8% (21/64) for E. tenella. The Kappa Cohen test between macroscopy, histopathology, and PCR demonstrated concordance ranging from weak to moderate with the exception of histopathology and PCR of the cecum, which was strong. In the comparison between macroscopy and histopathology, there were significative differences between Scores 0 and 1 (apart from the cecum). For Score 3, there were significative differences in duodenum, jejunum and cecum (p<0.05). In conclusion, the macroscopic diagnosis and PCR can generate false-negative results, and the histopathological exam proved to be effective, making it essential to associate different techniques for the correct diagnosis of Eimeria spp. in broiler chickens.
Abstract in Portuguese:
A coccidiose é uma doença de grande importância na avicultura industrial. O diagnóstico correto direciona a indústria avícola ao seu melhor tratamento e controle. Desta forma, realizou-se a pesquisa de Eimeria spp. em intestinos de 64 lotes de frangos de corte, com idade média de 29 dias. Em cada lote foram retirados aleatoriamente oito frangos da linha de abate, totalizando 512. Os intestinos foram classificados na macroscopia e na histopatologia em Grau de 0 a 4. No conteúdo intestinal pesquisou-se por reação em cadeia da polimerase (PCR) oocistos das sete espécies de Eimeria. As avaliações macroscópicas demonstraram que 59,4% (38/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 32,8% (21/64) para E. maxima, 29,7% (19/64) para E. tenella e 34,4% (22/64) para E. brunetti. Na avaliação histopatológica, 87,5% (56/64) dos lotes apresentaram pelo menos um frango com estruturas parasitárias compatíveis com Eimeria spp. no duodeno, 70,3% (45/64) no jejuno, 18,8% (12/64) no íleo, 46,9% (30/64) no ceco e 4,7% (3/64) no cólon. Na PCR 21,9% (14/64) dos lotes foram positivos para E. acervulina, 12,5% (8/64) para E. maxima, 3,1% (2/64) para E. mitis e 32,8% (21/64) para E. tenella. O teste de concordância de Kappa Cohen entre macroscopia, histopatologia e PCR demonstrou concordância variando de fraca a moderada com exceção da histopatologia e PCR do ceco que foi forte. Na comparação dos graus de macroscopia e histopatologia, foram encontradas diferenças significativas entre o Grau 0 e 1 (exceto no ceco) e no Grau 3 houve diferença para duodeno, jejuno e cecos (p<0,05). Conclui-se que o diagnóstico macroscópico e a PCR podem gerar resultados falsos negativos e que o exame histopatológico se demostrou eficaz, tornando fundamental a associação de diferentes técnicas para o correto diagnóstico de Eimeria spp. em frangos de corte.
#4 - Ammonia gas for bacterial control in poultry litter
Abstract in English:
The current techniques used in the disinfection of reused poultry litter, such as lime addition, windrowing and plastic cover on the surface, do not guarantee the elimination of pathogenic microorganisms, causing damage to the environment and animal health. Gram negative bacteria, i.e., Salmonella and Escherichia coli, can be transmitted from one batch to another through reused litter, causing health damage to broilers and humans that consume food contaminated by these agents. Our study assessed the effectiveness of the methods plastic cover on the surface (PCS) and plastic cover on the surface with ammonia gas injection (PCSAI) in the control of Gram negative bacteria. The results obtained, both in laboratory conditions (Experiment 1) and in the field (Experiment 2), demonstrate that the method PCSAI with 0.22% ammonia gas had a significant reduction (P<0.05) of Gram negative bacteria in the period of 48 hours This new methodology for disinfecting poultry litter will allow its reuse in a practical and safe way, improving the preservation of the environment, of the health of broilers and consumers of poultry products.
Abstract in Portuguese:
O reaproveitamento de camas aviárias na criação de frangos de corte é uma prática muito utilizada no Brasil. Essa prática reduz custos de produção e contribui na conservação do meio ambiente. As técnicas atuais utilizadas na desinfecção de camas aviárias reaproveitadas, como adição de cal, enleiramento e lona na superfície, não garantem a eliminação de microrganismos patogênicos porque não geram quantidade suficiente de amônia. O gás amônia, em concentrações elevadas, tem efeito biocida. Bactérias Gram negativas, como as Salmonelas e Escherichia coli, podem ser transmitidas de um lote para outro através do reaproveitamento da cama, ocasionando prejuízos para a saúde das aves e dos humanos que consomem alimentos contaminados por estes agentes. Este trabalho avaliou a eficácia do método lona na superfície com injeção de gás amônia no controle de microrganismos Gram negativos. Os resultados obtidos demostraram que esse método controlou os microrganismos Gram negativos num período de 48 horas em camas de frangos de corte reaproveitadas. Assim, essa nova metodologia de desinfecção de camas de aviário permitirá sua reutilização de forma prática e segura, melhorando a saúde das aves e dos consumidores dos produtos avícolas.
#5 - Pathological, microbiological and immunohistochemical characterization of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique
Abstract in English:
Avian colibacillosis is an acute and globally occurring infectious disease of domestic and wild birds caused by Escherichia coli, and it is associated with considerable economic losses mainly due to the morbidity and mortality associated. The present study aimed to describe the pathological, bacteriological and immunohistochemical aspects of avian colibacillosis in broiler chickens of Mozambique. Forty-nine broiler chicken presented anorexia, decreased weight gain, ataxia, diarrhea, dyspnea, and death in a clinical course of 3-5 days. The birds were raised in five farms (small, medium and large farms) with manual and automatic breeding system, with flocks ranging from 100 to 20,000 birds. At the necropsy, all birds had poor body condition, and the pericardium and the Glisson’s capsule of all avian exhibited different degrees of adherence often associated with severe fibrin deposition. The thoracic and abdominal air sacs were thickened and adhered to the costal wall. Mild, moderate or marked hepatomegaly associated with white pinpoint multifocal areas (100%, 49/49) and mild to moderate splenomegaly in 75.5% (37/49) with a mottled surface were observed. The lungs and kidney were enlarged and reddish. Histologically, a multiorgan fibrinoheterophilic polyserositis was observed in 75.5% of the cases (37/49), which were characterized by inflammatory infiltrates composed mainly of degenerative heterophils, macrophages and plasma cells, associated with fibrin deposits and intermixed by coccobacillary bacterial basophilic aggregates. These affected mainly the pericardium (28.6%, 14/49), the pleura (18.4%, 9/49), the Glisson’s capsule (10.2%, 5/49), the ventriculus (10.2, 5/33), and the proventriculus (8.2%, 4/49) serosa. Multifocal to coalescing areas of coagulative necrosis associated with similar inflammatory cells were observed mainly in the spleen (28.6%, 14/49), liver (24.5%, 12/49), and intestines (22.4%, 11/49). A similar infiltrate was also observed affecting the the lungs (16.3%, 8/49), the kidney (16.3%, 8/49) and the myocardium (14.3%, 7/49). Isolation and identification of E. coli was obtained in 12 cases through bacterial culture. Some organs (2 cases of each farms) were selected and submitted to immunohistochemistry anti-E. coli, and a positive stain was observed in all tested cases in liver (3/3), heart (4/4), spleen (1/1), lungs (4/4), intestines (4/4), bursa of Fabricius (1/1), ventriculus (1/1), and proventriculus (1/1) tissue sections. These results demonstrate that E. coli was the cause of mortality in these birds. Therefore, biosecurity and management measures should be employed to prevent and control the disease occurrence in Mozambique’s poultry farming.
Abstract in Portuguese:
A colibacilose aviária é uma doença aguda de ocorrência mundial que acomete aves domésticas e silvestres, causada por Escherichia coli e resulta em perdas econômicas consideráveis devido à elevada morbidade e mortalidade das aves. O presente estudo teve o objetivo de descrever os aspectos patológicos, bacteriológicos e imuno-histoquímicos de colibacilose aviária em frangos de corte de Moçambique. Um total de 49 frangos de corte apresentaram anorexia, baixo ganho de peso, ataxia, diarreia, dispneia e morte em um curso clínico de 3 a 5 dias. As aves eram provenientes de 5 granjas (pequenas, média e grandes), com sistema de criação manual e automático, com rebanhos que variavam de 100 a 20.000 aves. À necropsia, todas as aves exibiam condição corporal ruim a caquética, além de pericárdio e cápsula de Glisson de todas aves (100%; n=49) com diferentes graus de aderência e deposição de fibrina de forma difusa acentuada. Os sacos aéreos torácicos e abdominais estavam espessados e aderidos à parede costal. Foi observado ainda hepatomegalia discreta, moderada a severa frequentemente associada com áreas multifocais puntiformes brancacentas (100%; 49/49), e esplenomegalia discreta a moderada, associado a áreas multifocais moteadas (75,5%; 37/49). Os pulmões e rins estavam aumentados e com coloração avermelhada. Histologicamente, observou-se majoritariamente serosite fibrinoheterofílica em 75,5% dos casos (37/49), caracterizadas por infiltrado inflamatório composto por heterófilos degenerados, macrófagos, linfócitos e plasmócitos, com deposição de fibrina entremeada por uma miríade de estruturas bacterianas cocobacilares. Esta lesão foi observada principalmente em pericárdio (28,6%; 14/49), pleura (18,4%; 9/49), cápsula de Glisson (10,2%; 5/49), ventrículo (10,2; 5/33) e em proventrículo (8,2%; 4/49). Áreas multifocais a coalescentes de necrose de coagulação associada a infiltrado inflamatório semelhante ao descrito foi observado principalmente no baço (28,6%; 14/49), fígado (24.5%; 12/49), e intestinos (8,2%; 4/49). Um infiltrado inflamatório semelhante também foi visualizado em pulmões (16,3%; 8/49), rins (16,3%; 8/49) e miocárdio (14,3%; 7/49), Colônias puras de E. coli foram identificadas e isoladas em 12 casos. Alguns órgãos (2 de cada granja) foram submetidos ao exame imuno-histoquímico anti-E. coli e marcação positiva foi visualizada em todos casos testados, como em fígado (3/3), coração (4/4), baço (1/1), pulmão (4/4), intestinos (4/4), bursa de Fabricius (1/1), rim (1/1), ventrículo (1/1) e proventrículo (1/1). Estes resultados demonstram que E. coli foi a causa de morte destas aves. Sendo assim, a adoção de boas medidas de biosseguridade e de manejo são indispensáveis para a prevenção e controle da ocorrência da doença nas granjas de frango de corte de Moçambique.
#6 - Effect of cypermethrin on the control of lesser mealworm (Alphitobius diaperinus) and broiler performance
Abstract in English:
This study analysed the effectiveness of using different levels of a product based on 6% cypermethrin and 2% citronella on broiler production and control the lesser mealworm (Alphitobius diaperinus). A total of 648 one-day-old chicks (Cobb®) which were allocated to one of three treatments (no application of the commercial product - control, and two concentrations of the product 2.00 and 3.33g/m2) in eight replicates with 27 birds each. The commercial product, which was based on cypermethrin was applied in the chambers with an atomizer. The lesser mealworm population was sampled weekly (1, 7, 14, 21, 28, 35 and 42 days of the experiment) using traps, at three points (front, middle and back) inside the pen. The performance, carcass and cut yields were evaluated. At 21, 28, 35 and 42 days of the experiment, the number of lesser mealworm adults and larvae was lower in the treatment groups involving 2.00 and 3.33g/m2 of the product than in the control group. On the first and 14th days of the study, the number of lesser mealworms adults was lower in the group treated with 3.33g/m2 of the product compared to the control group, although the results did not differ statistically from those obtained with 2.00g/m2 of the product. In conclusion, the application of the commercial product at both concentrations (2.00 and 3.33g/m2) was effective in combating Alphitobius diaperinus adults and larvae, and the performance was not influenced by treatments.
Abstract in Portuguese:
Este estudo analisou a eficácia do uso de diferentes níveis de um produto à base de cipermetrina a 6% e citronela a 2%, na produção de frangos de corte e no controle do cascudinho (Alphitobius diaperinus). Um total de 648 pintos de um dia de idade (Cobb®) foram distribuídos em três câmaras com os tratamentos (sem aplicação do produto comercial - controle, e duas concentrações do produto comercial - 2,00 e 3,33g/m2) em oito repetições com 27 aves cada. O produto comercial a base de cipermetrina foi aplicado nas câmaras com um atomizador. A população de cascudinho foi amostrada semanalmente (1, 7, 14, 21, 28, 35 e 42 dias do experimento) usando armadilhas, em três pontos (frente, meio e fundo) de cada parcela. Foram avaliados o desempenho, rendimentos de carcaça e cortes. Aos 21, 28, 35 e 42 dias do experimento, o número de adultos e larvas de cascudinho foi menor nos grupos de tratamento envolvendo 2,00 e 3,33g/m2 do produto quando comparado ao grupo controle. No primeiro e no 14º dia do estudo, o número de cascudinhos adultos foi menor no grupo tratado com 3,33g/m2 do produto em comparação ao grupo controle, embora os resultados não tenham diferido estatisticamente daqueles obtidos com 2,00g/m2 do produto. A conversão alimentar de 1 a 21 dias de idade foi significativa, com os melhores resultados para essa variável quando aplicado 3,33g do produto por metro quadrado e no tratamento controle. Em conclusão, a aplicação do produto comercial em ambas as concentrações (2,00 e 3,33g/m2) foi eficaz no combate a adultos e larvas de Alphitobius diaperinus e, não influenciou o desempenho.
#7 - Phenotypic and molecular characterization of erythromycin resistance in Campylobacter jejuni and Campylobacter coli strains isolated from swine and broiler chickens
Abstract in English:
Campylobacter spp. is a bacterial agent that causes gastroenteritis in humans and may trigger Guillain-Barré Syndrome (GBS) and is also considered one of the main foodborne diseases in developed countries. Poultry and pigs are considered reservoirs of these microorganisms, as well as raw or undercooked by-products are often incriminated as a source of human infection. Treatment in human cases is with macrolide, such erythromycin, that inhibits the protein synthesis of the microorganism. This study aimed to isolate Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from intestinal content samples of broiler chickens (n=20) and swine (n=30) to characterize the erythromycin resistance profile of the strains and to detect molecular mechanisms involved in this resistance. The minimum inhibitory concentration was determined by agar dilution. The Mismatch Amplification Mutation Assay-Polymerase Chain Reaction (MAMA-PCR) was performed to detect mutations at positions 2074 and 2075 of 23S rRNA region, in addition to PCR test to detect the erm(B) gene. From the intestinal content of broiler chickens, 18 strains of C. jejuni and two strains of C. coli were isolated, whereas, from swine samples, no C. jejuni strain and 14 strains of C. coli were isolated. All C. coli strains were resistant, and three C. jejuni strains from broilers chickens were characterized with intermediate resistance to erythromycin. The MIC of the strains ranged from ≤0.5mg/µL to ≥128mg/µL. All resistant strains had the A2075G mutation, and one strain with intermediate resistance had the A2075G mutation. However, the A2074C mutation and the erm(B) gene were not detected. High resistance levels were detected in C. coli strains isolated from swine. The MAMA-PCR is a practical tool for detecting the erythromycin resistance in Campylobacter strains.
Abstract in Portuguese:
Campylobacter spp. é um agente bacteriano causador de gastroenterite em humanos e associado à síndrome de Guillain–Barré, sendo a campilobacteriose considerada uma das principais enfermidades de origem alimentar. Aves e suínos são importantes reservatórios desses microrganismos e seus produtos derivados crus ou mal cozidos são muitas vezes incriminados como fonte de infecção humana. A primeira escolha para o tratamento em casos humanos são os antimicrobianos da classe dos macrolídeos como à eritromicina. Dentro desse contexto, o objetivo deste estudo foi isolar Campylobacter jejuni e C. coli a partir de 20 amostras de conteúdo intestinal de frangos de corte e de 30 de suínos ao abate e investigar a resistência à eritromicina das estirpes obtidas e os possíveis mecanismos moleculares envolvidos nesta resistência. A concentração inibitória mínima foi determinada pela diluição em ágar e a técnica MAMA-PCR foi utilizada para detecção de mutações nas posições 2074 e 2075 da região 23s rRNA, foi pesquisado também a presença do gene erm(B) pela PCR. A partir do conteúdo intestinal de frangos de corte foram isoladas 18 estirpes de C. jejuni e duas de C. coli, enquanto de suínos foram obtidas 14 estirpes de C. coli e nenhuma estirpe de C. jejuni. Todas as estirpes de C. coli de suínos foram identificadas como resistentes e três estirpes de C. jejuni de frangos foram caracterizadas com resistência intermediária. A CIM das estirpes variou de ≤0,5mg/µL a ≥128mg/µL. Todas as estirpes resistentes tinham a mutação A2075G e uma cepa com resistência intermediária também apresentou a mutação A2075G. Não foi detectada a mutação A2074C ou a presença do gene erm(B) em nenhuma das estirpes obtidas. Os resultados revelam um alto nível de resistência em estirpes de C. coli isoladas de suínos frente a eritromicina. A técnica MAMA PCR utilizada se constitui em uma ferramenta prática para detecção da resistência à eritromicina em estirpes de C. jejuni e C. coli.
#8 - Quinolones resistance in Salmonella spp. isolated from broilers and chickens’ carcasses under federal inspection
Abstract in English:
We analyzed 77 Salmonella spp. strains, from which 20 were isolated from broilers (cloacal swabs) and 57 from chickens from slaughterhouses under federal inspection. The following serotypes were identified: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) and Salmonella enterica (O: 9.12) (1). Fifteen strains (19.5%) were resistant to enrofloxacin, six (7.8%) to ciprofloxacin, and 26 (33.8%) to nalidixic acid in the Disk Diffusion Test. The fifteen enrofloxacin resistant strains were selected for the PCR to detect the genes gyrA, gyrB, parC, and parE, and genetic sequencing to identify mutations in these genes. Five strains (33.3%) had point mutations in the gyrA gene, and one (6.7%) presented a point mutation in the parC gene. None of the 15 strains had mutations in the gyrB and parE genes, and none had more than one mutation in the gyrA gene or the other genes. The presence of point mutations in the strains studied corroborates with the phenotypic resistance observed to nalidixic acid. However, it did not explain the resistance to fluoroquinolones found in the 15 strains. Other mechanisms may be related to the fluoroquinolones resistance, highlighting the need for additional mutation screening.
Abstract in Portuguese:
Foram analisadas neste estudo 77 estirpes de Salmonella spp., 20 isoladas de frangos vivos (suabes de cloaca) e 57 isoladas de carcaças, provenientes de abatedouros frigoríficos sob Inspeção Federal. Foram identificados os seguintes sorotipos: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), SalmonellaC erro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) e Salmonella enterica (O: 9,12) (1). Do total de estirpes estudadas, 15 (19,5%) se mostraram resistentes à enrofloxacina, seis (7,8%) à ciprofloxacina e 26 (33,8%) ao ácido nalidíxico no Teste de Difusão em Disco. Foram selecionadas as 15 estirpes resistentes à enrofloxacina para a realização da PCR para detecção dos genes gyrA, gyrB, parC e parEe para sequenciamento genético do produto da PCR para identificação de mutações nesses genes. Cinco estirpes (33,3%) apresentaram mutações pontuais no gene gyrA e uma (6,7%) apresentou mutação pontual no gene parC. Nenhuma das 15 estirpes apresentou mutações nos genes gyrB e parE e nenhuma apresentou mais de uma mutação no gene gyrA ou nos outros genes. A existência apenas de mutações pontuais em alguns genes das estirpes analisadas está de acordo com a resistência fenotípica observada ao ácido nalidíxico, mas não explica a resistência às fluoroquinolonas encontrada nas 15 estirpes. Outros mecanismos de resistência podem estar relacionados à resistência encontrada às fluoroquinolonas e estudos adicionais são necessários para investigar sua presença.
#9 - Detection of the mcr-1 gene in Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shigatoxigenic E. coli (STEC) strains isolated from broilers
Abstract in English:
Enteropathogenic Escherichia coli (EPEC) and Shigatoxigenic E. coli (STEC) strains are among the major pathotypes found in poultry and their products, which are capable of causing human enteric infections. Colistin has been claimed the drug of choice against diseases caused by multidrug-resistant Gram-negative bacteria (MDRGN) in humans. The mcr-1 gene was the first plasmidial gene that has been described to be responsible for colistin resistance and has also been detected in birds and poultry products. Our study aimed to detect the mcr-1 gene in enteropathogenic strains of E. coli in order to evaluate the resistance to colistin in broilers. The material was obtained from 240 cloacal samples and 60 broiler carcasses. The strains were isolated by the conventional bacteriological method and by the virulence genes, which characterize the enteropathogenic strains and resistance, and the samples were detected by polymerase chain reaction (PCR). Of the 213 isolated strains of E. coli, 57 (26.76%) were characterized as atypical EPEC and 35 (16.43%) as STEC. The mcr-1 gene was found in 3.5% (2/57) of the EPEC strains and 5.7% (2/35) of the STEC strains. In this study, it was possible to confirm that the mcr-1 resistance gene is already circulating in the broiler flocks studied and may be associated with the pathogenic strains.
Abstract in Portuguese:
Escherichia coli Enteropatogênica (EPEC) e Shigatoxigênica (STEC) estão entres os principais patotipos encontrados em aves e produtos avícolas que são capazes de causar doença entérica no homem. A colistina tem sido preconizada como droga de escolha para o tratamento de doenças causadas por bactérias Gram-negativas multirresistentes em humanos. O gene mcr-1 foi o primeiro gene plasmidial a ser descrito como responsável pela resistência a colistina e tem sido descrito em aves e produtos avícolas. Este estudo tem como objetivo a detecção do gene mcr-1 em estirpes de E. coli enteropatogênicas a fim de avaliar a resistência a colistina em frangos de corte. O material foi obtido a partir de 240 amostras cloacais e 60 carcaças de frango de corte. As estirpes foram isoladas pelo método bacteriológico convencional e os genes de virulência, que caracterizam as estirpes enteropatogênicas, e resistência foram detectados pela reação em cadeia pela polimerase (PCR). Das 213 estirpes de E. coli isoladas, 57 (26,76%) foram caracterizadas como EPEC atípica e 35 (16,43%) como STEC. O gene mcr-1 foi encontrado em 3,5% (2/57) das estirpes EPEC e 5,7% (2/35) das estirpes STEC. Neste estudo foi possível confirmar que o gene de resistência mcr-1 já está em circulação nos lotes de frango de corte estudados e pode estar associado às estirpes patogênicas
#10 - Characteristics of virulence, resistance and genetic diversity of strains of Salmonella Infantis isolated from broiler chicken in Brazil
Abstract in English:
Salmonella Infantis is frequently associated with human infections worldwide and is transmitted by consumption of contaminated foods, particularly those of animal origin, especially the chicken meat. We aimed to evaluate virulence characteristics, antimicrobial resistance and the genetic similarity of 51 strains of S. Infantis isolated from samples of poultry origin. The strains were isolated from 2009 to 2010 in a company with full cycle of broiler’s production in the state of São Paulo, Brazil. The antimicrobial susceptibility test was performed and, by PCR, we evaluated the presence of the genes lpfA (hem-adhesion), agfA (hem-biofilm) and sefA (hem-adhesion) and resistance genes to beta-lactams (blaTEM, blaSHV, blaCTX-M and blaAmpC). The phylogenetic relationship was determined by RAPD-PCR method. Among the drugs tested, the highest percentages of resistance were to amoxicillin (35.3%) and to sulfonamide (15.7%). Eleven antimicrobial resistance patterns were identified (A1 to A11), none of them presented a multiresistance profile (> 3 antimicrobials classes). There was 100% of positivity for the agfA gene, 92.2% for the lpfA gene, and no strain presented the sefA gene. Most of the isolates showed similarities in virulence potential, since they were simultaneously positive for two studied genes, agfA and lpfA (92.2%, 47/51). Of the 18 (35.3%) strains resistant to antimicrobials of the β-lactam class, 10 (55.5%) were positive to blaAmpC gene, five (27.8%) for blaCTX-M, two (11.1%) to blaSHV and no strain presented the blaTEM gene. The phylogenetic evaluation has shown the presence of five clusters (A, B, C, D and E) with similarity greater than 80%, and three distinct strains which were not grouped in any cluster. Cluster B grouped 33 strains, all positive for lpfA and agfA genes, from both, the broiler farming facility and the slaughterhouse, persistent throughout all the study period. This cluster also grouped 18 strains clones with genetic similarity greater than 99%, all isolated in the slaughterhouse. The presence of virulence genes associated with persistent strains clones for a long period, warns to the possibility of S. Infantis to form biofilm, and should be constantly monitored in broilers’ production chain, in order to know the profile of the strains that may contaminate the final product and evaluate the hazards that represents to public health.
Abstract in Portuguese:
Salmonella Infantis é frequentemente associada a infecções humanas no mundo todo sendo transmitida pelo consumo de alimentos contaminados, principalmente aqueles de origem animal, com destaque para a carne de frango. Objetivou-se avaliar características de virulência, resistência antimicrobiana e a similaridade genética de 51 estirpes de S. Infantis isoladas em amostras de origem avícola. As estirpes foram isoladas no período de 2009 a 2010 em uma empresa com ciclo completo de produção de frango de corte, localizada no estado de São Paulo, Brasil. Foi realizado o teste de susceptibilidade antimicrobiana e pela técnica de PCR, foi avaliada a presença dos genes lpfA (fímbria‑adesão), agfA (fímbria-biofilme) e sefA (fímbria‑adesão) e os genes de resistência aos beta-lactâmicos (blaTEM, blaSHV, blaCTX-M e blaAmpC). A relação filogenética foi determinada pelo método de RAPD-PCR. Dentre as drogas testadas, os maiores percentuais de resistência foram para amoxacilina com 35,3% e sulfonamida com 15,7%. Onze perfis de resistência aos antimicrobianos foram identificados (A1 a A11), sendo que nenhum deles apresentou perfil de multirresistência (>3 classes de antimicrobianos). Houve 100% de positividade para o gene agfA, 92,2% para o gene lpfA e nenhuma estirpe apresentou o gene sefA. A maioria dos isolados apresentaram semelhanças no potencial de virulência, pois foram positivos simultaneamente para dois genes estudados, agfA e lpfA (92,2% - 47/51). Das 18 (35,3%) estirpes resistentes aos antimicrobianos da classe dos β-lactâmicos, 10 (55,5%) foram positivas para o gene blaAmpC, cinco (27,8%) para blaCTX-M, duas (11,1%) para blaSHV e nenhuma estirpe apresentou o gene blaTEM. A avaliação filogenética demonstrou a presença de cinco clusters (A, B, C, D e E) com similaridade superior a 80%, e três estirpes distintas que não foram agrupadas em nenhum dos clusters. O cluster B agrupou 33 estirpes, todas positivas para os genes lpfA e agfA, provenientes tanto do aviário quanto do matadouro frigorífico, persistentes durante todo o período do estudo. Este cluster ainda agrupou 18 estirpes clones com similaridade genética superior a 99%, todas isoladas no matadouro frigorífico. A presença dos genes de virulência, associada à persistência das estirpes clones durante um longo período do estudo, alertam para a possibilidade de S. Infantis em formar biofilme, devendo ser constantemente monitorada na cadeia de produção avícola, especialmente no ambiente de abate, de forma a conhecer o perfil das estirpes que podem contaminar o produto final e assim avaliar os perigos que representam para a saúde pública.
