Abstract in English:
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) can cause acute and persistent infections in cattle, resulting in significant economic losses to the livestock industry each year. Targeted antiviral therapy is an effective strategy. This study was based on network pharmacology, molecular docking techniques and in vitro studies to investigate quercetin’s mechanism in treating bovine viral diarrhea/mucosal disease (BVD-MD). The network topology analysis was carried out using Cytoscape 3.9.0 software to construct the network of “Chinese medicine ingredients-target-diseases”. Protein interactions were explored and analyzed using the String system (PPI). GO and KEGG pathway analysis of the intersected targets was performed using Bioconductor software. The molecular docking and molecular dynamics simulation methods were used to reveal the degree of binding of quercetin to key target genes. Western blot and indirect immunofluorescence were used to characterize the antiviral effects of quercetin. This study utilized network pharmacological analysis, identifying 22 targets associated with BVD-MD. The results of the KEGG pathway showed that quercetin was closely related to Ras and MAPK signaling pathways of BVD-MD. Molecular docking results showed that SRC, NS5B, NOX4 and XDH were the key targets of quercetin in the treatment of BVD-MD. Through network pharmacology, molecular docking and in vitro experiments, quercetin was demonstrated to combat bovine viral diarrhea mucosal disease through key targets of SRC, MAPK1, GSK3B, NS5B and E2. Molecular dynamics analysis showed that quercetin exhibited complex stability with NS5B. This study provides a theoretical and experimental basis for quercetin treatment of BVD-MD and later drug development.
Abstract in Portuguese:
Bovine viral diarrhea virus (BVDV) can cause acute and persistent infections in cattle, resulting in significant economic losses to the livestock industry each year. Targeted antiviral therapy is an effective strategy. This study was based on network pharmacology, molecular docking techniques and in vitro studies to investigate quercetin’s mechanism in treating bovine viral diarrhea/mucosal disease (BVD-MD). The network topology analysis was carried out using Cytoscape 3.9.0 software to construct the network of “Chinese medicine ingredients-target-diseases”. Protein interactions were explored and analyzed using the String system (PPI). GO and KEGG pathway analysis of the intersected targets was performed using Bioconductor software. The molecular docking and molecular dynamics simulation methods were used to reveal the degree of binding of quercetin to key target genes. Western blot and indirect immunofluorescence were used to characterize the antiviral effects of quercetin. This study utilized network pharmacological analysis, identifying 22 targets associated with BVD-MD. The results of the KEGG pathway showed that quercetin was closely related to Ras and MAPK signaling pathways of BVD-MD. Molecular docking results showed that SRC, NS5B, NOX4 and XDH were the key targets of quercetin in the treatment of BVD-MD. Through network pharmacology, molecular docking and in vitro experiments, quercetin was demonstrated to combat bovine viral diarrhea mucosal disease through key targets of SRC, MAPK1, GSK3B, NS5B and E2. Molecular dynamics analysis showed that quercetin exhibited complex stability with NS5B. This study provides a theoretical and experimental basis for quercetin treatment of BVD-MD and later drug development.
Abstract in English:
Vernonia rubricaulis is a plant responsible for poisoning cattle living in areas subject to flooding in the Pantanal biome of Brazil. Because V. rubricaulis causes acute hepatic necrosis and clinical signs and lesions similar to other hepatotoxic plants, its action pathways are probably similar. However, the potentially toxic components of V. rubricaulis remain unknown. Our study aims to determine the chemical profiles of aqueous and ethanolic extracts of the leaves of V. rubricaulis in the budding stage, which is known to be toxic, and in the mature stage. Experimental trials using mice and sheep investigated the presence of toxic substances in the extracts. Three groups of mice received different doses of V. rubricaulis extract. Another four groups were carried out with sheep that received: (1) aqueous extract of immature leaves, (2) aqueous extract of mature leaves, (3) ethanolic extract of mature leaves, and (4) ethanolic extract of immature leaves. Intoxication was reproduced in sheep only with the aqueous extract of V. rubricaulis buds; ethanol was not a suitable solvent for extracting toxic compounds. This finding suggests that toxic components are not present in considerable amounts in the mature plant. Swiss mice proved not to be suitable experimental models for reproducing intoxication because none of the extracts was toxic to the animals, including the one that was toxic in sheep. The chemical profile of the extracts revealed the presence of sugars, flavonoids, sphingolipids, and chlorogenic acids. Chemical profiles determined by HPLC-DAD-MS of the aqueous and ethanolic extracts of the buds and mature leaves of V. rubricaulis did not reveal compounds with known toxic potential. We demonstrated that the aqueous extraction method of V. rubricaulis was efficient at extracting toxic components from the plant’s leaves in the budding stage.
Abstract in Portuguese:
Vernonia rubricaulis é uma planta responsável por causar surtos de intoxicação em bovinos que vivem em áreas sujeitas a alagamento no bioma Pantanal do Brasil. Por causar necrose hepática aguda e quadro anatomopatológico semelhante a outras plantas hepatotóxicas, como Xanthium spp., era suposto que seu princípio ativo fosse semelhante ao desta planta. No entanto, os potenciais componentes tóxicos permanecem desconhecidos. Este estudo buscou determinar o perfil químico dos extratos aquoso e etanólico das folhas de V. rubricaulis, na fase de brotação, sabidamente tóxica, e na fase adulta. Para investigar a presença das substâncias tóxicas nos extratos, estudos experimentais utilizando camundongos e ovinos foram realizados. Ensaios experimentais utilizando ratos e ovinos investigaram a presença de substâncias tóxicas nos extratos. Três grupos de camundongos receberam diferentes doses do extrato de V. rubricaulis. Outros quatro grupos foram formados com ovinos que receberam: (1) extrato aquoso de folhas imaturas, (2) extrato aquoso de folhas maduras, (3) extrato etanólico de folhas maduras, e (4) extrato etanólico de folhas imaturas. A intoxicação foi reproduzida em ovinos apenas com o extrato aquoso dos brotos de V. rubricaulis, revelando que o etanol não é um bom solvente extrator dos compostos tóxicos e corroborando com achados prévios que sugerem que estes componentes não estão presentes em quantidades tóxicas na planta adulta. Camundongos Swiss não foram classificados como modelos experimentais adequados para a reprodução da intoxicação, uma vez que nenhum dos extratos foi tóxico, nem mesmo aquele que foi tóxico para ovinos. O perfil químico dos extratos revelou a presença de compostos das classes dos açúcares, flavonoides, esfingolipídeos e ácidos clorogênicos. Assim, os perfis químicos determinados por HPLC-DAD-MS dos extratos aquoso e etanólico das folhas em fase de brotação e das folhas adultas, não revelaram compostos com potencial tóxico conhecido, indicando que outras estratégias de determinação do perfil químico ou outras técnicas de caracterização estrutural devem ser empregadas para tal finalidade. Entretanto, o estudo demonstrou que o método de extração aquosa de V. rubricaulis foi eficiente na extração dos componentes tóxicos das folhas em fase de brotação.
Abstract in English:
Standardizing trimming the brain for histological diagnosis of neurological diseases is challenging for veterinary pathologists. The striatum is a set of subcortical nuclei of the forebrain, formed by bundles of nerve fibers and gray matter, which consist of the internal and external capsules, caudate, lentiform, and claustrum nuclei. The striatum is related to motricity, which refers to the neural circuits of the extrapyramidal pathways. In domestic animals, the extrapyramidal pathways are of great importance in gait. From the ventral surface of the brain, they are located deep in a strip of the telencephalon corresponding to the olfactory trigone. Bovine and equine brains were routinely formalin-fixed, weighed and measured. Herein, we report a guide for bovine and equine brains’ neuroanatomic trimming and striatum histomorphology. Trimming was performed, and the sections were routinely processed for histology. We used the cross-section rostral to the optic chiasm as the site of choice for histologic sampling to identify the striatum structures. The forebrains were sectioned, and the standard histologic cassette was positioned horizontally or vertically to frame a greater diversity of structures. The histologic slides were labeled with structures of the striatum (caudate nucleus, internal capsule, lentiform nucleus, external capsule and claustrum). Regarding the brain size, handing the cassette orientation over to the forebrain allows the verification to shift the position or collect a second striatum sample for histology.
Abstract in Portuguese:
Padronizar a clivagem do encéfalo para diagnóstico histológico de doenças neurológicas é um desafio para os patologistas veterinários. O corpo estriado é um conjunto de núcleos subcorticais do prosencéfalo, formado por feixes de fibras nervosas e substância cinzenta, que consistem nas cápsulas interna e externa, núcleos caudado, lentiforme e claustro. O corpo estriado está relacionado à motricidade, que se refere aos circuitos neurais das vias extrapiramidais. Nos animais domésticos, as vias extrapiramidais são de grande importância na marcha. Da superfície ventral do cérebro, eles estão localizados profundamente em uma faixa do telencéfalo correspondente ao trígono olfatório. Encéfalos de bovinos e equinos foram rotineiramente fixados em formalina, pesados e medidos. Neste trabalho, relatamos um guia para a clivagem neuroanatômica e histomorfológica do corpo estriado dos cérebros de bovinos e equinos. A clivagem foi realizada e as seções foram processadas rotineiramente para histologia. Utilizamos o corte rostral e tangente ao quiasma óptico como local de escolha para amostragem histológica para identificar as estruturas do corpo estriado. Os prosencéfalos foram seccionados e o cassete histológico padrão foi posicionado horizontal ou verticalmente para enquadrar uma maior diversidade de estruturas. As estruturas do corpo estriado foram identificadas nas lâminas histológicas (núcleo caudado, cápsula interna, núcleo lentiforme, cápsula externa e claustro). Conforme o tamanho do encéfalo, o manuseio do cassete sobre o prosencéfalo permite orientar a necessidade de alterar a posição ou a coleta de uma segunda amostra do corpo estriado para histologia.
Abstract in English:
The epidemiology, toxic potential, and clinical and pathological presentation of acute spontaneous and experimental poisoning by Solanum pseudoquina are described. In the spontaneous form, the plant was ingested by cattle on two properties, one in the municipality of Canoinhas and the other in Painel, Santa Catarina. The outbreak in Canoinhas occurred after some trees were felled, five cattle ingested leaves of the plant and showed staring eyes and muscle tremors; four died, and one recovered. On the Painel property, the outbreak occurred after the pruning of two trees, and two adult cattle ingested the plant and died. The information was provided by the owners, and only one bovine was subjected to autopsy in each outbreak. No lesions were evident at autopsy, and no material was collected for histological evaluation. In the experimental form, green leaves of S. pseudoquina were collected in the municipalities of Canoinhas, Painel and Urubici, in Santa Catarina. The leaves were administered orally to four cattle. Two cattle received a single dose of 40g/kg, one received two doses of 35g/kg, and another received six doses of 20g/kg. One of the animals that received the 40g/kg dose died without showing any clinical signs. The other animals showed apathy, muscle tremors, ataxia, motor incoordination, and difficulty getting up. At necropsy, cardiac alterations were observed in the cattle that received repeated doses of 20g/kg, namely hydropericardium and ventricular dilation, and liver congestion was observed in all the cattle. Microscopic examination showed mononuclear infiltrates in the heart samples of the four cattle (stained with hematoxylin and eosin – HE), which were mild, perivascular and between fiber bundles. Cardiomyocytes had multifocal cytoplasmic hypereosinophilia and pyknotic nuclei. The livers of all four cattle showed moderate congestion between the sinusoids. The anti-troponin immunohistochemistry (IHC) technique was performed on three heart samples and showed cardiomyocytes with decreased troponin C expression in the areas that corresponded to cardiomyocyte hypereosinophilia of varying intensity. S. pseudoquina has been shown to be potentially toxic to cattle when doses of more than 20g/kg are ingested.
Abstract in Portuguese:
Descrevem-se a epidemiologia, potencial tóxico, quadro clínico e patológico da intoxicação espontânea e experimental aguda por Solanum pseudoquina. Na forma espontânea a planta foi ingerida por bovinos em duas propriedades, uma situada no município de Canoinhas e outra em Painel, Santa Catarina. O surto de Canoinhas ocorreu após a derrubada de exemplares da árvore e, cinco bovinos que ingeriram folhas da planta manifestaram olhar atento, tremores musculares; destes, quatro morreram e um se recuperou. Na propriedade de Painel o surto ocorreu após a poda de duas árvores, no qual dois bovinos adultos ingeriram a planta e foram encontrados mortos. As informações foram fornecidas pelos proprietários e apenas um bovino foi necropsiado em cada surto, não foram evidenciadas lesões na necropsia e não foi coletado material para avaliação histológica. Para reprodução experimental, folhas verdes de S. pseudoquina foram coletadas nos munícipios de Canoinhas, Painel e Urubici, localizados em Santa Catarina. As folhas foram administradas por via oral para quatro bovinos. Dois bovinos receberam dose única de 40g/kg, um recebeu duas doses de 35g/kg e outro recebeu seis doses de 20g/kg. Um bovino que recebeu 40g/kg morreu sem serem observados sinais clínicos. Os demais apresentaram apatia, tremores musculares, ataxia, incoordenação motora e, dificuldade para levantar. Na necropsia, foram observadas alterações cardíacas, caracterizadas por hidropericárdio e dilatação ventricular no bovino que recebeu doses repetidas de 20g/kg e em todos os bovinos foi observada congestão hepática. O exame microscópico revelou nas amostras cardíacas dos quatro bovinos que foram coradas com hematoxilina e eosina (HE), infiltrado mononuclear, leve, perivascular e por entre feixes das fibras. Cardiomiócitos com hipereosinofilia citoplasmática, multifocal e núcleos picnóticos. No fígado dos quatro bovinos havia congestão, moderada entre os sinusóides. A técnica de imunhistoquímica (IHQ) anti-troponina foi realizada em três amostras cardíacas, as quais apresentaram cardiomiócitos com diminuição da expressão da troponina C nas áreas que corresponderam com hipereosinofilia de cardiomiócitos de diferentes intensidades. S. pseudoquina demonstrou potencial de tóxico para bovinos quando ingeridas doses superiores a 20g/kg.
Abstract in English:
Considering the practice of using ‘brewer’s yeast’ (BY) – liquid brewery yeast waste from the brewing industry – in animal feed in some establishments in the south of the State of Rio de Janeiro in Brazil, this study was conducted to establish safety margins and to determine epidemiological and clinical aspects. In addition, this study suggested prophylactic measures that can prevent or minimise alcohol intoxication due to BY in sheep and swine. The main characteristics of the clinical features in both natural poisoning and controlled spontaneous ingestion in swine as well as intoxication by controlled ingestion of BY using a ruminal probe in sheep were found to be staggering gait, tripping and falls. Overall, 3.8 and 8.875mL/kg of ethanol content in the BY caused mild-moderate and severe clinical conditions, respectively, in swine and sheep. The following prophylactic measures are suggested: 1. BY must be adequately diluted in water, whey, or with BY that has been previously stored in the property (old BY); 2. It must be administered in proportion to the animals’ weight and size. 3. It must be administered continuously, without interruptions, and with the provision of other food in the trough (such as soybean meal or cornmeal and water ad libitum). In conclusion, although BY is increasingly used in sheep and swine breeding properties – in the south of the State of Rio de Janeiro – many owners use one or more of the suggested prophylactic measures. Hence, ethanol intoxications because of BY are infrequent and rarely cause deaths; therefore, BY can be used provided adequate prophylactic measures are followed.
Abstract in Portuguese:
Considerando-se à prática de utilizar “levedo de cerveja” (LC) – resíduo líquido da indústria cervejeira – na alimentação de animais, em alguns estabelecimentos no sul do Estado do Rio de Janeiro, esse estudo foi realizado para estabelecer as margens de segurança e os quadros epidemiológico e clínico, bem como sugerir medidas profiláticas que impeçam ou minimizem esse tipo de intoxicação alcoólica para ovinos e suínos. Verificou-se que o quadro clínico na intoxicação por ingestão controlada de LC por sonda em ovinos e na intoxicação natural e ingestão espontânea controlada em suínos, caracterizou-se principalmente por andar cambaleante, tropeços e quedas. Concentrações de 3,8 e 8,875mL/kg de etanol contido no LC, causaram quadros clínicos leve a moderado e grave em suínos e ovinos, respectivamente. Como medidas profiláticas sugere-se: diluição adequada do LC com água, soro de leite ou com o LC já estocado na propriedade (LC antigo); administração do LC proporcional ao peso/tamanho dos animais, administração contínua, sem interrupções, disponibilizar outro alimento no cocho, como farelo de soja ou fubá de milho e água à vontade. Conclui-se que apesar de o LC ser cada vez mais utilizado nas propriedades criadoras de ovinos e suínos no sul do Estado do Rio de Janeiro já que, muitos proprietários aplicam uma ou mais medidas profiláticas aqui sugeridas, as intoxicações pelo etanol, contido no LC são pouco frequentes e raramente ocorrem mortes, de forma que esse produto deve ser utilizado, desde que as medidas profiláticas sejam observadas.
Abstract in English:
Toxoplasma gondii can be eliminated in bovine semen. Cryopreserved semen is often used due to the fact that artificial insemination in dairy and beef cattle provides benefits in terms of production. However, little is known regarding the viability and infectivity of T. gondii tachyzoites in cryopreserved bovine semen. In the present study, cattle semen negative for T. gondii were contaminated with 1 x 106 tachyzoites (RH strain) and cryopreserved with and without different cryoprotectants, such as DMSO (concentrations of 2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% and 10.0%) and glycerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% and 10.0%), followed by freezing in liquid nitrogen (-196°C). After 24 hours, the samples were thawed and inoculated in 10 mice per cryoprotectant concentration. The mice were evaluated for clinical signs of toxoplasmosis (rough coat, diarrhea, hypoactivity and sudden death) as well as serum titers of IgM and IgG and the presence of tachyzoites in the peritoneal lavage. The results revealed that T. gondii remained infective in all samples. Clinical signs of toxoplasmosis were observed in the mice beginning with the 6th day post-inoculation (DPI) and 100% lethality was found between the 7th and 9th DPI. Viable tachyzoites were recovered from peritoneal exudate of dead mice (except for the control group), with higher mean of tachyzoite counts in the intraperitoneal lavage for 5% DMSO (±3.32 x 106), 8% DMSO (±3.53 x 106), 3% glycerol (±4.75 x 106), 7.5% glycerol (±6.26 x 106) and the absence of cryoprotectant (±3.11 x 106). Seroconversion occurred in the treated groups, with titers of IgG from 1:16 to 1:128 and IgM from 1:16 to 1:512. T. gondii viability and infectivity were maintained in cattle semen during 24 hours of cryopreservation at -196°C with and without cryoprotectant. However, further studies are necessary to determine whether cryopreserved semen contributes to the spread of toxoplasmosis through artificial insemination.
Abstract in Portuguese:
Sabe-se que Toxoplasma gondii pode ser eliminado no sêmen bovino. A inseminação artificial em bovinos leiteiros e de corte proporcionou avanços e benefícios nas produções e para isso o sêmen criopreservado é frequentemente utilizado. No entanto, pouco se sabe sobre a viabilidade e infectividade dos taquizoítos de T. gondii em sêmen bovino criopreservado. Para isso o sêmen bovino, negativo para T. gondii, foi contaminado com 1x106 taquizoítos (cepa RH), criopreservados com ou sem diferentes crioprotetores como DMSO (2.5%, 5.0%, 7.5%, 8.0% e 10.0%) e Glicerol (2.25%, 2.5%, 3.0%, 5.0%, 7.5% e 10.0%) e congelados em nitrogênio líquido (-196°C). Após 24 horas, essas amostras foram descongeladas e inoculadas em 10 camundongos por diluente de concentração de crioprotetor. Os camundongos foram avaliados quanto a sinais clínicos de toxoplasmose (pele áspera, diarreia, hipoatividade e morte súbita), títulos séricos de IgM e IgG e presença de taquizoítos no lavado peritoneal. Os resultados mostraram que T. gondii se manteve infectante em todas as amostras, inclusive naquelas sem crioprotetor. Sinais clínicos de toxoplasmose foram observados nos camundongos a partir do 6º dia pós-inoculação (DPI) e 100% de letalidade foi verificada entre o 7º ao 9º DPI. Nos camundongos mortos, exceto no grupo controle, taquizoítos viáveis foram recuperados do exsudato peritoneal, com maior média de taquizoítos quantificados na lavagem intraperitoneal para DMSO a 5% (±3.32x106), 8% (±3.53x106) e glicerol 3% (±4.75x106), 7,5% (±6.26x106) e livre de crioprotetor (±3.11x106). A soroconversão ocorreu nos grupos tratados com títulos de IgG (1:16 a 1:128) e IgM (1:16 a 1:512). A viabilidade e infectividade do T. gondii no sêmen bovino durante as 24 horas de criopreservação a -196°C foram mantidas com ou sem crioprotetor. No entanto, mais estudos são necessários para verificar se o sêmen criopreservado contribui para a disseminação da toxoplasmose na inseminação artificial.
Abstract in English:
Listeriosis is an infectious disease caused by bacteria of the genus Listeria, the neurological form being more common in ruminants. There are many reports of listeriosis in small ruminants in the region that includes Brazil, Argentina and Uruguay. However, these diagnoses were mainly based on histological lesions in the central nervous system (CNS) without the isolation and characterization of the involved Listeria strains. The aim of this study was to report sheep and goats listeriosis cases from 2016 to 2021 in northwestern Uruguay. The diagnosis was made according to lesions observed at histopathology, plus Listeria isolation in CNS, identifying it at specie and serotype level. Nine animals (n=9) of three outbreaks and five sporadic cases of listeriosis were studied. Sheep was the species with more cases in relation to goats, and adults were the category most affected. Cases occurred in spring and less frequently in winter. All presented neurological clinical signs and the lesions in the CNS were consistent with suppurative meningoencephalitis and micro-abscesses in the brainstem. In eight of nine CNS samples, Listeria strains were isolated (seven L. monocytogenes and one L. innocua). All the L. monocytogenes isolates carried the inlA gene; serotyping showed that four strains belonged to serotype 1/2b, two isolates belonged to serotype 4b, and one to serotype 1/2a. Considering that listeriosis is a common disease in this region and the fact that isolates are scarcely recovered from small ruminants, it would be important to emphasize the need for Listeria isolation to better characterize the strains that affect animals. Not only to improve knowledge about the epidemiology of disease but also with the objective of developing serotype specific vaccines for animal use.
Abstract in Portuguese:
Listeriose uma doença bacteriana causada pelo gênero Listeria, a forma nervosa é a mais comum em ruminantes. No Brasil, Argentina e Uruguai há vários relatos de listeriose em pequenos ruminantes com diagnóstico baseado na histopatologia do sistema nervoso central (SNC), sem o isolamento e a caracterização do agente. O objetivo deste trabalho foi relatar uma série de casos diagnosticados em ovinos e caprinos no período 2016-2021 no noroeste do Uruguai. O diagnóstico foi feito basado nas lesões observadas na histopatologia, e caracterização das cepas de Listeria recuperadas do SNC quanto à espécie e sorotipo. Nove animais (n=9) do três surtos e cinco casos isolados de listeriose foram estudados. Os ovinos foram a espécie com o maior número de casos em relação aos caprinos, sendo os animais adultos a categoria mais afetada em ambas espécies. A doença ocorreu principalmente na primavera com alguns casos observados no inverno. Todos os casos apresentavam sinais clínicos nervosos e as lesões no SNC caracterizavam-se por meningoencefalite supurativa com presença de microabscessos no tronco encefálico. Em oito de nove amostras do SNC foram isoladas cepas de Listeria (sete L. monocytogenes e uma L. innocua). Todos os isolados de L. monocytogenes continham o gene inlA; a sorotipagem apresentou quatro cepas do serotipo 1/2b, duas cepas serotipo 4b e uma cepa 1/2a. Levando em consideração que nesta região a listeriose é uma doença frequente e que existem poucos isolados recuperados de casos clínicos em pequeño ruminantes, torna-se relevante o isolamento deste agente para caracterização das cepas que afetam os animais. Não só para melhorar o conhecimento sobre a epidemiologia da doença, mas também com o objetivo de desenvolver vacinas sorotipo-especificas para uso animal.
Abstract in English:
This study collected samples from 50 Holstein cows, most intensively bred, and from the Campos Gerais region, Paraná, with an average milk production of 30.21L/day. Samples of the liver, spleen and lymph nodes were collected to determine the levels of copper, cobalt, iron, molybdenum and zinc. Spleen and lymph nodes were subjected to histological analysis and evaluation of the degree of hemosiderosis. The average concentrations of copper (495.05ppm), molybdenum (4.19ppm), and zinc (274.49ppm) were higher than those established for the bovines. For cobalt 26% of the animals presented levels below the established level, which characterized cobalt deficiency. Only iron (299.12ppm) exhibited an adequate average level. Histopathologically hemosiderosis was observed mainly in the spleen (78%) and less frequently in the lymph nodes (20%). The observation of hemosiderin in the spleen and lymph nodes is not related to copper deficiency. Still it may be related to high levels of molybdenum, zinc, iron, or other undetermined causes.
Abstract in Portuguese:
Para este estudo foram coletadas amostras de 50 vacas, da raça Holandesa, a maior parte criada intensivamente e oriunda da região dos Campos Gerais/PR, com média individual de produção de leite de 30,21L/dia. Foram coletadas amostras de fígado, baço e linfonodos para determinação dos níveis de cobre (Cu), cobalto (Co), ferro (Fe), molibdênio (Mo) e zinco (Zn). Baço e linfonodo foram submetidos à análise histológica e avaliação do grau de hemossiderose. A média das concentrações de Cu (495,05ppm), Mo (4,19ppm) e Zn (274,49ppm) encontrava-se acima dos níveis estabelecidos para bovinos. Para o Co, observou-se que 26% dos animais apresentaram níveis abaixo do estabelecido, o que caracterizou deficiência de Co. Apenas o Fe (299,12ppm) apresentou níveis médios adequados. Na histopatologia, hemossiderose foi observada, principalmente no baço (78%) e com menos frequência nos linfonodos (20%). A observação de hemossiderina no baço e linfonodos não está relacionada à deficiência de Cu, porém pode estar relacionada a elevados níveis de Mo, Zn e Fe ou a outras causas não determinadas.
Abstract in English:
Birds, cartilaginous and teleost fish, reptiles, and some amphibians have intrascleral cartilage and/or bone; however, these are rarely reported in therian mammals. This study aimed to investigate and characterize a nonpathological formation of cartilage in the posterior sclera of sheep macroscopically, histologically, and by immunohistochemical exam (IHC). Ninety eyes from 45 domestic sheep were collected, underwent gross examination, fixed in formalin, and embedded in paraffin for the microscopical assessment. Sections with histological shreds of cartilage were selected to perform IHC to confirm the presence of cartilage. Intrascleral cartilage was detected in 60 eyeballs (66.66%) from 37 sheep (82.22%). A slight whitish thickening was grossly seen in the posterior sclera. The histologic exam revealed a few scattered, isolated chondrocytes to larger aggregates of cartilaginous islands in the posterior sclera. Eighteen (30%) of 60 eyeballs revealed marked anti-collagen type II immunolabeling. The development of cartilaginous structures in the eyes is considered rare in mammalian animals. The high occurrence of intrascleral cartilage in the examined sheep eyes suggests that this finding corresponds to an anatomical component of sheep sclera, despite the age, breed, or body condition.
Abstract in Portuguese:
Aves, peixes cartilaginosos e teleósteos e répteis, bem como alguns anfíbios possuem cartilagem e/ou osso intraescleral, contudo, isso é raramente descrito em marsupiais. O objetivo deste trabalho foi investigar e caracterizar a formação não patológica de cartilagem hialina na esclera posterior de ovinos, por exame macroscópico, histológico e imuno-histoquímico. Olhos de 45 ovinos foram coletados, submetidos a exame macroscópico, fixados em formalina a 10% tamponada e incluídos em parafina para o exame histológico. Amostras com evidência de formação cartilaginosa ao exame histológico foram selecionadas para a realização da técnica de imuno-histoquímica para confirmação. Cartilagem intraescleral foi detectada em 60 amostras oculares (66,66%) de 37 ovinos (82,22%), caracterizada na avaliação macroscópica como discretos espessamentos esbranquiçados na esclera posterior. O exame histológico revelou formações que variaram de condrócitos isolados e dispersos a grandes agregados, formando ilhas cartilaginosas na esclera. Dezoito (30%) de 60 bulbos oculares mostraram imunomarcação anti-colágeno tipo II. O desenvolvimento de estruturas cartilaginosas nos bulbos oculares é considerado raro em mamíferos. A identificação de cartilagem intraescleral em 66% dos olhos ovinos avaliados no estudo indica que a formação de cartilagem corresponde a um componente anatômico normal na esclera de ovinos, independente de idade, raça ou condição corporal.
Abstract in English:
Laminitis is a disease that affects the dermis and epidermis of the bovine hoof, generating changes in the hoof capsule. This study evaluated the effects of clinical laminitis diagnosed after the adaptation phase to confinement on the morphology, density, and mineral composition of the hoof of Nellore cattle after finishing. The animals were separated in the first weeks of confinement into a sick group (SG), with clinical laminitis, and a healthy group (HG). SG animals had higher heel length, dorsal wall length, toe height, and diagonal hoof length (p<0.05) than healthy animals. The dermal laminae had similar measurements for thickness, length, and spacing between them between SG and HG. Animals with laminitis showed congestion, hemorrhage, and basement membrane irregularities on histology. Computed microtomography (µCT) revealed that the hoof density of sick animals is lower than healthy ones. According to the mineral composition by energy-dispersive X-ray fluorescence (ED-XRF) spectrometry, the hooves of animals with laminitis (SG) and healthy ones (HG) were not biochemically different. Therefore, the occurrence of clinical laminitis in Nellore cattle in the first weeks of confinement causes an increase in the morphometric parameters of the hoof capsule and a reduction in the density of the abaxial hoof wall evaluated after the finishing period. This disease does not promote changes in the histomorphometric parameters of the dermal laminae and the percentage of minerals in the abaxial hoof wall.
Abstract in Portuguese:
A laminite é uma doença que afeta a derme e epiderme do casco de bovinos gerando alterações no estojo córneo. O estudo avaliou os efeitos da laminite clínica diagnosticada após a fase de adaptação ao confinamento na morfologia, densidade e composição mineral do casco de bovinos da raça Nelore após terminação. Nas primeiras semanas de confinamento, os animais foram separados em um grupo doente (GD) com laminite clínica e em um grupo saudável (GS). Os animais do GD apresentaram maior comprimento de talão, comprimento da parede dorsal, altura da pinça e comprimento diagonal do casco (p<0,05) do que os saudáveis. As lâminas dérmicas tiveram medidas semelhantes para espessura, comprimento e espaçamento entre elas entre GD e GS. Animais doentes apresentaram congestão, hemorragia e irregularidades da membrana basal na histologia. A microtomografia computadorizada (µCT) revelou que a densidade do casco de animais doentes é menor do que o saudável. Para a composição mineral por meio da espectrometria de fluorescência de raio-X por dispersão de energia (ED-XRF), o casco dos animais doentes (GD) e dos saudáveis (GS), não se mostraram diferentes bioquimicamente. Conclui-se que a ocorrência de laminite clínica em bovinos da raça Nelore nas primeiras semanas de confinamento ocasiona aumento de parâmetros morfométricos do estojo córneo e redução da densidade da parede abaxial do casco, avaliados após o período de terminação. Essa enfermidade não promove modificações nos parâmetros histomorfométricos das lâminas dérmicas e na porcentagem de minerais da parede abaxial do casco.