Abstract in English:
ABSTRACT.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil.
Bovine Herpesviruses (BHV) type 1 (BHV-1) and type 5 (BHV-5) were analysed by immunoperoxidase staining with a panei of monoclonal antibodies (Mabs) prepared against BHV antigens. One of the Mabs recognized ali BHV isolates tested. The remainder four mabs recognized only BHV-1 samples, including standard laboratory strains. Ali isolates associated with clinical cases of encephalitis (BHV-5) displayed a pattern of reactivity distinct from that of viruses isolated from syndromes associated with BHV-1 infections. The results obtained indicate that such Mabs allowed the differentiation between BHV-1 and BHV-5, with a perfect correlation between the clinical pictures and the patterns of reactivity in vitro.
Abstract in Portuguese:
SINOPSE.- Roehe P.M., Silva T.C., Nardi N.B., Oliveira L.G. & Rosa J.C.A. 1997. [Monoclonal antibody differentiation between bovine herpesviruses type 1 and 5.] Diferenciação entre os vírus da rinotraqueíte infecciosa bovina (BHV-1) e herpesvírus da encefalite bovina (BHV-5) com anticorpos monoclonais. Pesquisa Veterinária Brasileira 17(1):41-44. Centro de Pesquisas Veterinárias Desidério Finamor, Caixa Postal 2076, Porto Alegre, RS 90001-970, Brazil.
Amostras de herpesvírus bovinos (BHV) tipo 1 (Virus da Rinotraqueíte Infecciosa BovinaNulvovaginite Pustular Infecciosa; BHV-1) e tipo 5 (Herpesvírus da Encefalite Bovina; BHV-5) tiveram seu perfil de reatividade analisado em testes de imunoperoxidase frente a um painel composto por cinco anticorpos monoclonais (AcM) produzidos contra antígenos de BHV-1. Um dos AcM reconheceu todas as amostras de BHV examinadas. Os quatro AcM restantes reconheceram somente amostras de BHV-1. Todas as amostras isoladas de casos de encefalites (BHV-5) apresentaram um padrão de reação distinto daquelas isoladas de outros síndromes associados à infecção pelo BHV-1. Os resultados obtidos indicam que os AcM avaliados permitem a diferenciação entre amostras de BHV-1 e BHV-5, havendo perfeita correlação entre os quadros clínicos observados com os perfis de reatividade obtidos in vitro.
Abstract in English:
In arder to study laboratorial aspects of beef cow mortality, a syndrome popularly known as "doença da vaca caída", examens were made of blood, cerebrospinal fluid, serum, bone and liver samples from 32 naturally affected 4 to 9 year old cows, 27 belonging to the Nellore breed and5 were crossbred Nellore, all originating from farms located in municipalities near Botucatu, State of São Paulo. Laboratory determinations were analysed by descriptive statistics and included hematological values, total plasma protein, plasma fibrinogen, cerebrospinal fluid analysis, and concentration measurements of serum calcium, phosphorus, magnesium, sodium, potassium, chloride, total protein, albumin, globulin, alkaline phosphatase, aspartate aminotransferase, gama-glutamyltransferase and creatine kinase activities, included bane ash percentage and concentrations of calcium, phosphorus and magnesium, and also hepatic levels of copper, zinc, iron, manganese and cobalt. In addition, mouse bioassays and complement micro-fixation tests were performed to detect botulinum toxins in liver samples. The results indicated leukocytosis (13,3±3,9 x103/mm3) with neutrophilia (8,9±3,2 x103/mm3), hypocalcemia (7,8±1,7mg/dl), hypophosphatemia (3,6±1,6mg/dl), hypoalbuminemia (2,9±0,9g/cll), increased creatine kinase activity (691,0±829,7 UI/1), and reduced ash percentage (60,3±1,9%) and low phosphorus (17,2±0,4%) in bane. The other values were all within normal limits. The diagnosis of botulism, involving type C and D toxins, was confirmed as the cause of the mortality in the region of study, what is strongly consistent with the other laboratorial findings.
Abstract in Portuguese:
Com o objetivo de verificar alguns aspectos laboratoriais da mortalidade de vacas de corte, popularmente conhecida como "doença da vaca caída", estudaram-se amostras de sangue total, líquor, soro sanguíneo, osso e fígado colhidas de 32 fêmeas bovinas (27 da raça Nelore e 5 mestiças), entre 4 e 9 anos de idade, naturalmente acometidas e pertencentes a propriedades rurais localizadas em municípios próximos a Botucatu, Estado de São Paulo. Procederam-se as determinações e o estudo estatístico descritivo das variáveis: 1) hematológicas, de proteínas plasmáticas totais e fibrinogênio; 2) dos aspectos físicos, bioquímicos e celularidade no líquor; 3) de cálcio, fósforo, magnésio, sódio, potássio; cloretos, proteína total, albumina, globulina e atividades da fosfatase alcalina, aspartato aminotransferase, gama-glutamiltransferase e creatina quinase no soro sanguíneo; 4) de cinzas, cálcio, fósforo e magnésio no osso, e, 5) de cobre, zinco, ferro, manganês e cobalto no fígado, empregando-se as provas de inoculação em camundongos e de microfixação de complemento para a detecção da presença de toxinas botulínicas nas amostras de tecido hepático. Os resultados apontaramcomo alterações, leucocitose (13,3±3,9 x103/mm3) com neutrofilia (8,9±3,2 x103/mm3), hipocalcemia (7,8±1,7mg/ dl), hipofosfatemia (3,6±1,6mg/dl), hipoalbuminemia (2,9±0,9g/dl), elevação na atividade da creatina quinase (692,0±829,7 UI/1) e reduções na cinza (60,3±1,9%) e fósforo (17,2±0,4%) ósseos, como indicativos do estado carencial de fósforo, apresentando-se as demais variáveis dentro dos limites de variação considerados normais para a espécie. O diagnóstico de botullsmo, com envolvimento das toxinas C e D, foi confirmado como a causa da mortalidade investigada na área de abrangência do estudo, e encontra coerência com o conjunto de resultados.
Abstract in English:
Eight hundred and fifty sheep sera from 18 herds, located in 15 municipalities of the State of São Paulo, were examined by complement fixation test, indirect enzyme immunoassay and gel diffusion test for antibodies to Brucella ovis. The combination of the serological test results and the clinical and epidemiological data suggest that none of the examined animals was infected. The complement fixation and the gel diffusion tests showed good specificity, but the indirect enzyme immunoassay showed false positive results in nine of the sera.
Abstract in Portuguese:
Foram examinados soros sanguíneos de 850 ovinos, pertencentes a 18 rebanhos situados em 15 municípios do Estado de São Paulo. Esses soros foram submetidos à reação de fixação de complemento, ao teste imunoenzimático indireto e à prova de imunodifusão em gel de ágar para a pesquisa de anticorpos contra Brucella ovis. A pesquisa de anticorpos e os dados clínicos e epidemiológicos sugerem que nenhum dos animais que fizeram parte do estudo estava infectado por aquela bactéria. A reação de fixação de complemento e a prova de imunodifusão em gel de ágar revelaram boa especificidade, mas o teste imunoenzimático indireto apresentou resultados falso-positivos em nove soros examinados.
Abstract in English:
In order to investigate epidemiological and clinical aspects of beef cattle mortalities caused by botulism, a syndrome popularly known as "doença da vaca caída", studies were carried out in 32 naturally affected 4 to 9 year old cows, 27 belonging to the Nellore breed and 5 to crossbred Nellore, all from 27 farms located in municipalities near Botucatu, State of São Paulo. The epidemiological anel clinical features were based, respectively, on the farm and herd managements, and on the general physical examination of the cows. Mouse bioassay anel complement microfixation tests were performed to detect the presence of botulinum toxins in liver samples. The results showed that the disease occurs in beef cattle of range breeding systems, reared under inadequate mineral nutrition and deficient health management. Pregnant and milking cows represented the group at risk, anel the incidence was higher during the rainy season (December to March), with morbidity and mortality rates of 3,2 ± 3,6%. Clinical examination revealed cows with no alterations of vital signs, behavior, visual and auditory acuities and skin sensation; but revealed ruminai hypomotility, anorexia, dehydration, flaccid para or tetraparesis with permanent recumbency, and a paretic or paralytic tongue. The diagnosis of botulism, involving type C and D toxins, was consistent with the epidemiological and clinical findings.
Abstract in Portuguese:
Com o objetivo de verificar aspectos epidemiológicos e clínicos da mortalidade de vacas de corte causada pelo botulismo, popularmente conhecida como "doença da vaca caída", estudaram-se 32 vacas (27 da raça Nelore e 5 mestiças), entre 4 e 9 anos de idade, naturalmente acometidas, e pertencentes a 27 propriedades rurais distintas, localizadas em 17 municípios próximos a Botucatu, Estado de São Paulo. As caracterizações da epidemiologia e do conjunto de sintomas basearam-se, respectivamente, no histórico dos rebanhos acometidos e no exame clínico das vacas estudadas, com análise estatística descritiva. Empregaram-se as provas de inoculação em camundongos e de microfixação de complemento para a detecção de toxinas botulínicas em amostras de fígado colhidas durante a necropsia dos animais. Os resultados apontaram a ocorrência da doença em rebanhos de corte, explorados extensivamente, com manejas de suplementação mineral e sanitário inadequados. A incidência foi maior de dezembro a março, em vacas prenhes ou lactantes, com coeficientes de morbidade e mortalidade de 3,2 ± 3,6%. Clinicamente observaram-se funções vitais, comportamento, visão, audição e sensibilidade cutânea normais, porém hipotonia ruminal, anorexia, desidratação, para ou. tetraparesia flácidas com decúbito permanente e diminuição ou ausência do tônus da língua. O diagnóstico de botulismo, com envolvimento das toxinas tipos C e D, foi coerente com as observações epidemiológicas e clínicas.
Abstract in English:
A radiological study of the fore and hind limb lymphatic system was performed in seven calves with hereditary hypoplasia. Four healthy calves from an unrelated Hereford herd were used as a contrai group. Sixteen calves, without signs of disease, from an experimental affected herd were also studied to detect subclinical cases of lymphedema. After sedation and local anaesthesia a trian-guiar flap of skin was reflected over the lateral aspect of the metacaÍpus and metatarsus to expose the subcutaneous lymphatics, which were previously stained by methylene blue injected subcutaneously into the interdigital space. The contrast medium was injected into the stained lymph vessels and lymphographies were taken in the anatomical regions where the popliteal and prescapular lymph nades are located. The lymphangiograms obtained were used to determine the caliber of lymph vessels and the cranio-caudal and proximo-distal dimensions of the popliteal lymph nades. It was demonstrated that direct lymphography is a suitable method to study the peripheral lymphatic system in the hind limbs of cattle with hereditary lymphatic hypoplasia. The lesions were hypoplasia and/or aplasia of the peripheral lymphatic system, characterized by decreased number and enlargement or absence of peripheral lymph vessels and decreased size or absence of popliteal lymph nodes. In calves without clinical signs the peripheral lymphatic lesions which would allow to detect subclinical cases were not observed.
Abstract in Portuguese:
Hipoplasia linfática heriditária foi estudada através do exame radiológico do sistema linfático periférico de sete bovinos da raça Hereford com diagnóstico clínico da doença. Quatro bovinos sadios, da mesma raça, pertencentes a um rebanho livre da doença foram utilizados como controle. Dezesseis bovinos sem sinais clínicos, pertencente a um rebanho experimental, no qual a doença foi reproduzida, foram, também, estudados com o objetivo de detectar-se casos subclínicos da enfermidade. Após a sedação dos animais e anestesia local, foi feita uma incisão na pele, no terço médio da face lateral dos ossos metacarpo e metatarso para exposição dos vasos linfáticos, marcados previamente por azul de metileno. Nos vasos linfáticos foi injetado meio de contraste e foram tomadas radiografias nas regiões anatômicas onde estão localizados os linfonodos pré-escapulares e poplíteos. Nas radiografias eram medidos o calibre dos vasos linfáticos e as dimensões dorso-ventral e crâneo-caudal dos linfonodos. Este estudo demonstrou ser a linfografia direta eficiente para a avaliação do sistema linfático periférico dos membros posteriores de bovinos com hipoplasia linfática. As lesões observadas, de hipoplasia e/ou aplasia do sistema linfático periférico, caracterizaram-se por redução no número e aumento do diâmetro ou ausência de vasos linfáticos e diminuição do tamanho ou ausência dos linfonodos poplíteos. Nos animais que não apresentavam sinais clínicos não foram observadas alterações no sistema linfático periférico que permitissem a detecção de casos subclínicos da enfermidade.
Abstract in English:
The objective of the present study was to show the efficiency of histologic and microradiographic techniques performed on rib bane samples as a mean of diagnosing the phosphorus status of cattle raised on phosphorus deficient pastures and receiving different mineral supplements. The rib samples were obtained from cattle of diferente ages which died from disease that was clinically and epidemiologically diagnosed as botulism. Ten out of 24 juvenile and adult animals studied exibited alterations of osteomalacia, while the others without those alterations served as controls. It is suggested that the method could be useful to improve the diagnosis of phosphorus deficiency of cattle in Brazil.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente estudo foi de mostrar a eficácia de exames histológicos e microrradiográficos de costelas para avaliar o "status" de fósforo em bovinos criados em pastagens deficientes neste elemento e que receberam suplementos minerais diversos. As amostras de costelas foram coletadas de animais de diferentes idades, os quais morreram de doença com diagnóstico clínico e epidemiológico de botulismo. Dez dos 24 bovinos estudados mostraram alterações de osteomalácia, ao passo que os outros sem estas alterações serviram de controles. Sugere-se que o método poderia ser útil para aperfeiçoar o diagnóstico da deficiência de fósforo em bovinos no Brasil.
Abstract in English:
One hundred twenty-six milk samples from 63 apparently healthy cows, but positive in the California Mastitis Test were submitted to determinations of pH, acidity, density, butter-fat, total solids, non-fat solids, cryoscopic point, caseine level, chloride level And polymorphonuclear leukocytes. Forty-one cows were infected by coagulase-positive Staphylococcus and 22 by coagulase-negative Staphylococcus. The results obtained in the milk sample analysis from the healthy quarters and infected by coagulase-positive Staphylococcus showed variations of all constituents investigated. However only the pH values (F=4.17*) and the polymorphonuclear leukocytes (F=ll.35**) showed significant differences. On the other hand, between the milk samples from healthy quarters and infected quarters by coagulase-negative Staphylococcus, only the polymorphonuclear leukocytes (F=16.29**) showed significant differences.
Abstract in Portuguese:
Foram submetidas às determinações do pH, acidez titulável, densidade, teor de gordura, extrato seco total, extrato seco desengordurado, ponto crioscópico, teor de cloreto, teor de caseína e às contagens de leucócitos polimorfonucleares, 126 amostras de leite procedentes de 63 vacas aparentemente sadias, porém, positivas ao Califórnia Mastitis Test, das quais 41 mostraram-se infectadas por cepas de Staphylococcus coagulase positiva e 22 por cepas de Staphylococcus coagulase negativa. Apesar de ter sido observada a variação de todos os constituintes investigados entre as amostras de leite procedentes de quartos sadios e infectados por Staphylococcus coagulase positiva, apenas os valores de pH (F=4,17*) e das contagens de leucócitos polimorfonucleares (F=ll,35**), mostraram diferenças estatisticamente significativas. Por outro lado, verificou-se, também, que entre as amostras de leite oriundas de quartos sadios e infectados por Staphylococcus coagulase negativa, apenas os valores das contagens de leucócitos polimorfonucleares (F=l6,29**) apresentaram diferenças estatisticamente significativas.
Abstract in English:
The extent of antigen interference between Yersinia enterocolitica 0:9 and Bmcella spp was evaluated in 245 bovine serum samples divided into groups according to status of immunization against brucellosis, and in 119 swine serum samples. The specimens were submitted to the plate serum agglutination test, tube serum agglutination test and to the Rose Bengal test for Brucella spp, and to tube sérum agglutination for Y. enterocolitica 0:9. The immune response to Y. enterocolitica was demonstrated and considered significant in terms of its possible effects on the interpretation of serological tests for brucellosis. Agglutinating titers were dose or even similar from a quantitative viewpoint. Since in most cases it was not possible to determine precisely the etiologic agent, it is clearly necessary to set up a laboratory method for the diagnosis of brucellosis that will permit the distinction of specific infections.
Abstract in Portuguese:
O grau de interferência antigênica entre Yersinia enterocolitica 0:9 e Bmcella spp foi analisado em 245 soros de bovinos discriminados quanto ao estado de imunização contra brucelpse, e 119 soros de suínos. Os espécimens foram submetidos às provas de soroaglutinação rápida, soro-aglutinação lenta e antígeno acidificado para Brucella spp e soro-aglutinação lenta para Y. enterocolitica 0:9. A resposta imune a Y. enterocolitica foi evidenciada e considerada significativa em relação aos seus possíveis efeitos na interpretação dos testes sorológicos para brucelose. Os títulos aglutinantes foram aproximados ou mesmo similares do ponto de vista quantitativo. Como não foi possível determinar com precisão, na maioria dos casos, o agente etiológico, é necessário instituir um método laboratorial de diagnóstico de brucelose que permita distinguir as infecções específicas.
Abstract in English:
The purpose of this study was to evaluate the competitive enzyme immunoassay used for the serological diagnosis of bovine brucellosis, comparing the results obtained using a conjugate prepared with monoclonal antibody and a conjugate prepared with policlonal sera. The results were also compareci with those obtained by a microtechnique of complement fixation. Two hundred and seventy-three sera from herds with a history of brucellosis, 205 sera from herds free of brucellosis and without vaccination with Brucella abortus strain 19 and 122 sera from herds without history of infection or vaccination were tested. Among sera from infected herds, the complement fixation test revealed antibody titres in 28.51%, the enzyme immunoassay using monoclonal conjugate in 39.19% and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate revealed antibody titres in 37.0% of the sera. The agreement between complement fixation and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 94.38% and the agreement between both of the enzyme immunoassays was 97.89%. Among the sera from vaccinated herds, the agreement between the complement fixation test and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 69.39%, and the agreement between the enzyme immunoassays was 90.73%. The complement fixation test did not reveal any antibody titre in 67.86% of the sera from vaccinated herds, the enzyme immunoassay using policlonal conjugate did not reveal titres in 51.22% and the enzyme immunoassay with monoclonal conjugate did not reveal antibody titres in 41.95% of the sera from vaccinated herds. All the 122 sera from herds without infection or vaccination were negative to the three serological tests.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do trabalho foi avaliar o comportamento do teste imunoenzimático competitivo quando aplicado ao diagnóstico sorológico da brucelose bovina, comparando-se o desempenho do teste ao usar um conjugado preparado com anticorpos monoclonais e um conjugado preparado com soro policlonal. Os resultados foram também comparados com aqueles obtidos através de uma microtécnica de fixação de complemento. Foram examinados 273 soros provenientes de rebanhos com histórico de brucelose, 205 soros provenientes de rebanhos sem problemas de infecção e que adotam a vacinação das bezerras com Brucella abortus amostra B 19 e 122 soros de bovinos procedentes de rebanhos sem histórico de brucelose e que não adotam a vacinação. Nos soros de rebanhos com histórico de infecção, a reação de fixação de complemento revelou títulos de anticorpos em 28, 51%, o teste imunoenzimático com o conjugado monoclonal revelou títulos em 39,19% e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal revelou títulos em 37,0% dos soros examinados, observando-se uma concordância de 94,38% entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático usando o conjugado policlonal e de 97,89% entre os dois testes imunoenzimáticos. Nos soros de rebanhos vacinados, a concordância entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal foi de 69,39%, enquanto que a concordância entre os testes imunoenzimáticos foi de 90,73%. Neste caso, a reação de fixação de complemento não revelou qualquer título em 67,86% dos soros examinados, o teste com o conjugado policlonal não revelou títulos em 51,22% dos soros, ao passo que o teste com o conjugado monoclonal não revelou título em 41,95% dos soros. Os 122 soros de rebanhos sem histórico de infecção e vacinação apresentaram resultados negativos nos três testes realizados.
Abstract in English:
One hundred ninety-five milk samples from 65 healthy quarters of 21 cows were submitted to somatic cell counts during the initial, middle and final phase of milking. The results showed that 65 (100%) milk samples obtained at the beginning of milking exhibited counts lower than 500,000 cel/mi, different from the harvested in the middle and final phase when counts higher to the mentioned values were found in 8 (12.31%) and 19 (29.23%) samples respectively. The differences revealed to be statistically significant showing the influence of the milking phases on the somatic cell counts. This fact is important for the diagnosis of subclinical bovine mastitis, as there exists a possibility of the occurrence of false-positive results in case milk samples are harvested in the middle or final phase of the milking process.
Abstract in Portuguese:
Foram realizadas contagens de células somáticas em 195 amostras de leite colhidas de 65 quartos sadios de 21 vacas lactantes, durante o início, meio e final da ordenha. Os resultados obtidos evidenciaram que as 65 (100%) amostras de leite obtidas no início da ordenha, apresentaram contagens inferiores a 500.000 cels/ml, diferentemente das colhidas no meio e final da ordenha, e cujas contagens foram superiores ao referido valor em 8 (12,31%) e 19 (29,23%) amostras, respectivamente. Tais diferenças mostraram-se estaticamente significativas, evidenciando, portanto, a influência das fases da ordenha sobre o número de células somáticas do leite. Este fato parece assumir destacado valor no estabelecimento do diagnóstico das formas subclínicas da mastite bovina, uma vez que existe a possibilidade da ocorrência de resultados falso-positivos, caso as amostras de leite a serem analisadas não sejam colhidas no início da ordenha.