Abstract in English:
ABSTRACT.- Oliveira D.M.N.M., Costa F.S. & Wischral A. 2018. BI-RADS classification and gray level histogram of malignant mammary tumors in bitches. [Classificação BI-RADS e histograma dos níveis de cinza de tumores mamários malignos em cadelas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1942-1948. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: deboramnavarro@gmail.com
Mammary tumor is the most frequent among the tumors that affect canine females, with relevant importance in veterinary medicine. The objective of this study was to determine the image characteristics of mammary tumors in female dogs, and compare different ultrasonographic techniques for neoplastic evaluation. During the experiment, 30 bitches with presence of nodular lesion in the mammary gland were used. Initially females were submitted to clinical and laboratory evaluations, and subsequent to the ultrasound examination of the tumor mass, as well as abdominal ultrasound and thoracic x-ray for the metastasis investigation. Quantitative analysis by histogram of the gray levels and categorization of the tumor masses by the BI-RADS system were performed. Later, the bitches were submitted to surgical resection of the tumors, where samples of the neoplastic tissue were collected for histopathological analysis. Carcinoma in mixed tumor showed a higher rate (33.3%), and the malignancy degree of epidermal tumors were classified in grade 1 (n=9), grade 2 (n=12) and grade 3 (n=3). Malignancy degree showed positive correlation with BI-RADS (r=0.55; P<0.05) and with the parameter echotexture - histogram base width (r=0.42, P<0.05). BI-RADS graduation also showed a positive correlation with the echotexture parameters (standard deviation of average echogenicity r=0.66, P<0.05 and base width r=0.55, P<0.05). It was concluded that the BI-RADS method in combination with the echotexture of tumors, can be used to evaluate mammary tumors in dogs and establish the planning of treatment.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Oliveira D.M.N.M., Costa F.S. & Wischral A. 2018. BI-RADS classification and gray level histogram of malignant mammary tumors in bitches. [Classificação BI-RADS e histograma dos níveis de cinza de tumores mamários malignos em cadelas.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1942-1948. Departamento de Medicina Veterinária, Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: deboramnavarro@gmail.com
Entre os tumores que acometem cadelas a neoplasia mamária é a de maior incidência, apresentando relevante importância na medicina veterinária. Este trabalho teve o objetivo de determinar as características ultrassonográficas de neoplasias mamárias em cadelas, e comparar diferentes técnicas ultrassonográficas de avaliação tumoral. Durante a realização deste experimento, foram utilizadas 30 cadelas com presença de lesão nodular em glândula mamária. Inicialmente as fêmeas foram submetidas a avaliações clínicas e laboratoriais, e subsequentemente à realização de exame ultrassonográfico da massa tumoral, assim como ultrassom abdominal e raio x torácico para a pesquisa de metástase. Foram realizadas a análise quantitativa por histograma dos níveis de cinza e categorização das massas tumorais pelo sistema BI-RADS. Posteriormente as cadelas foram submetidas à ressecção cirúrgica dos tumores, onde foram coletadas amostras do tecido neoplásico para análise histopatológica. O carcinoma em tumor misto foi o tipo tumoral de maior incidência (33.3%), e a graduação de malignidade dos tumores epiteliais foram classificadas em grau 1 (n=9), grau 2 (n=12) e grau 3 (n=3). A graduação demonstrou correlação positiva com a categorização BI-RADS (r=0,55; P<0,05) e com o parâmetro de ecotextura – largura de base do histograma (r=0,42; P<0,05). A graduação BI-RADS também demonstrou uma correlação positiva com os parâmetros de ecotextura (desvio padrão da média da ecogenicidade r=0,66; P< 0,05 e largura de base r=0,55; P<0,05). Conclui-se que o método de categorização BI-RADS, assim como os parâmetros de ecotextura dos tumores, podem ser usados para avaliação de neoplasia mamária em cadelas e assim auxiliar no planejamento de tratamento de cada caso.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Salomão R.L., Crivellenti L.Z., Simões A.P.R., Brito M.B.S., Silva P.E.S., Costa P.B., Tinucci-Costa M., Santana A.E. & Borin-Crivellenti S. 2018. Evaluation of serum concentrations of cortisol and thyroxine in bitches with early-stage mammary carcinoma. [Concentrações séricas de cortisol e tiroxina em cadelas com carcinoma mamário em estádio inicial.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1949-1954. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Avenida Pará 1720, bloco 2T, Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: sofiabcrivellenti@ufu.br
In view of the fact that cancer is considered a chronic disease that can interfere with hormonal homeostasis by means of cytokines, we hypothesized that, even at early stages, mammary carcinoma is able to alter the balance of the hypothalamic-pituitary-thyroid and hypothalamic-pituitary-adrenal axes. To test this hypothesis, the serum concentrations of basal cortisol, thyroxine (T4), free thyroxine (fT4), and thyroid-stimulating hormone (TSH) were evaluated in 20 unspayed bitches that had a histopathological diagnosis of grade 1 mammary carcinoma at clinical stage I according to the World Health Organization (WHO) classification (T1N0M0). The control animals comprised 10 unspayed bitches in perfect health conditions that were matched with those with mammary carcinoma by age. No significant differences regarding the concentrations of basal cortisol, TSH, t4, and fT4 were found between the bitches carrying early stage mammary carcinoma when compared to the control group. This suggests that, even if malignant, early-stage mammary carcinomas do not exhibit the ability to alter the concentrations of hormones produced by the hypothalamic-pituitary-adrenal or hypothalamic-pituitary-thyroid axes.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Salomão R.L., Crivellenti L.Z., Simões A.P.R., Brito M.B.S., Silva P.E.S., Costa P.B., Tinucci-Costa M., Santana A.E. & Borin-Crivellenti S. 2018. Evaluation of serum concentrations of cortisol and thyroxine in bitches with early-stage mammary carcinoma. [Concentrações séricas de cortisol e tiroxina em cadelas com carcinoma mamário em estádio inicial.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1949-1954. Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Uberlândia, Avenida Pará 1720, bloco 2T, Umuarama, Uberlândia, MG 38400-902, Brazil. E-mail: sofiabcrivellenti@ufu.br
Em vista do fato de neoplasias serem consideradas doenças crônicas que por meio de citocinas podem interferir na homeostase hormonal, hipotetizou-se que o carcinoma mamário, mesmo nos seus estádios iniciais, fosse capaz de alterar o equilíbrio dos eixos hipotalâmico-hipofisário‑tireóideo e hipotalâmico-hipofisário-adrenal. Para tal, foram avaliadas as concentrações séricas de cortisol basal, tiroxina (T4), tiroxina livre (fT4) e tireotrofina (TSH) de 20 fêmeas caninas, inteiras, com diagnóstico histopatológico de carcinoma mamário grau 1 e estadiamento clínico I segundo a classificação da Organização Mundial da Saúde - OMS (T1N0M0). Os animais controle constituíram-se por 10 fêmeas caninas inteiras, em perfeitas condições de higidez, as quais foram pareadas, por idade, com aquelas portadoras de carcinoma mamário. Não foram encontradas diferenças significativas nas concentrações de cortisol basal, TSH, T4 e fT4 das cadelas portadoras de carcinoma mamário em estádio inicial quando comparadas às controles sugerindo que, mesmo considerados malignos, ainda não apresentam a capacidade de alterar as concentrações dos hormônios produzidos pelos eixos hipotalâmico-hipofisário-adrenal e tireóideo.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Vieira-Filho C.H.C., Barrouin-Melo S.M., Damasceno K.A., Araújo M.S.S., Borges N.F., Silva F.L., Cassali G.D. & Estrela-Lima A. 2018. Tumor-associated macrophage is correlated with survival and SOCS expression in canine mammary carcinoma. [Correlação do infiltrado macrofágico com a sobrevida e a expressão da proteína SOCS no carcinoma mamário canino.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1972-1980. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia, Av. Adhemar de Barros 500, Ondina, Salvador, BA 40170-110, Brazil. E-mail: aestrela@ufba.br
The inflammatory infiltrate in the tumor microenvironment, particularly in mammary tumors, has aroused great interest in oncology, to play different roles in the progression or tumor regression dependent on the types and cell subsets involved. The present study aimed to evaluate (1) the occurrence and intensity of macrophage infiltration in the mammary carcinoma microenvironment, (2) the expression of SOCS1 and SOCS3 proteins in tumor associated macrophages, (3) any association between these parameters and tumor development, as well as survival rates in female dogs. Twenty-two female dogs diagnosed as carcinoma arising in a mixed tumor (CMT) by histopathology were divided into two groups following mastectomy: dogs without metastasis (CMT(-)=11) and those with metastasis (CMT(+)=11). The following parameters were analyzed: tumor size, lymph node metastasis, clinical stage, histological grade, distribution and intensity of inflammatory infiltrate, tumor macrophage quantification by immunohistochemical analysis of SOCS1 and SOCS3 expression, and immunophenotyping of peripheral blood leukocytes by flow cytometry. Dogs with the higher proportions of macrophages in the inflammatory infiltrate (≥400/tumor) also had higher survival rates in comparison with dogs with less macrophages. Immunostaining revealed higher proportions of SOCS3-positive macrophages in dogs without lymph node metastasis, while SOCS1-positive macrophages were predominant in dogs with metastasis (p<0.05). Multivariate analysis found associations between survival rate and clinical staging (p=0.025), histological grade (p=0.007), and the expression of MHC-CI in circulating monocytes (p=0.018). Higher SOCS3 expression in activated macrophages within the inflammatory infiltrate were considered indicative of an antitumor immune response, improved clinicopathological parameters and longer survival, whereas SOCS1-related activation was associated with tumor progression, metastasis development and reduced survival in female dogs with mammary carcinomas.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Vieira-Filho C.H.C., Barrouin-Melo S.M., Damasceno K.A., Araújo M.S.S., Borges N.F., Silva F.L., Cassali G.D. & Estrela-Lima A. 2018. Tumor-associated macrophage is correlated with survival and SOCS expression in canine mammary carcinoma. [Correlação do infiltrado macrofágico com a sobrevida e a expressão da proteína SOCS no carcinoma mamário canino.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10):1972-1980. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal da Bahia, Av. Adhemar de Barros 500, Ondina, Salvador, BA 40170-110, Brazil. E-mail: aestrela@ufba.br
O infiltrado inflamatório no microambiente tumoral, particularmente nos tumores mamários, tem despertado grande interesse na oncologia, por desempenhar diferentes funções na progressão ou regressão tumoral, dependendo dos tipos e subtipos celulares envolvidos. O presente estudo teve como objetivo avaliar: (1) a ocorrência e a intensidade do infiltrado macrofágico no microambiente do carcinoma mamário; (2) a expressão das proteínas SOCS1 e SOCS3 nos macrófagos associados ao tumor; (3) qualquer associação relacionada ao prognóstico entre estes parâmetros e o desenvolvimento tumoral, assim como a taxa de sobrevida. Vinte e duas cadelas diagnosticadas com carcinoma em tumor misto (CTM) por exame histopatológico foram divididas em dois grupos após a mastectomia: cadelas sem metástase (CTM(-)=11) e cadelas com metástase (CTM(+)=11). Foram analisados os seguintes parâmetros: tamanho do tumor, metástase para linfonodo, estadiamento clínico, grau histológico, distribuição e intensidade do infiltrado inflamatório, quantificação dos macrófagos tumorais por análise imuno-histoquímica da expressão de SOCS1 e SOCS3, e imunofenotipagem dos leucócitos (monócitos e linfócitos) do sangue periférico por citometria de fluxo. Cadelas que apresentavam maiores proporções de macrófagos no infiltrado inflamatório (≥400/tumor) também tiveram maior taxa de sobrevida em comparação àquelas com menos macrófagos. A imunomarcação revelou maiores proporções de macrófagos SOCS3-positivos em cães sem metástase para linfonodo, enquanto que macrófagos SOCS1-positivos foram predominantes naqueles com metástase (p<0,05). A análise multivariada identificou associações entre a taxa de sobrevida e o estadiamento clínico (p=0,025), grau histológico (p=0,007) e a expressão de MHC-CI em monócitos circulantes (p=0,018). A maior expressão de SOCS3 nos macrófagos ativados foi considerada indicativa de uma resposta imune antitumoral, melhores parâmetros clínicos e maior taxa de sobrevida, ao passo que a ativação relacionada com SOCS1 foi associada à progressão tumoral, desenvolvimento de metástase e redução na taxa de sobrevida em cadelas com carcinoma mamário.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Heck L.C., Cony F.G., Bianchi M.V., Driemeier D., Sonne L. & Pavarini S.P. 2018. Pathological features of 78 metastatic or multicentric neoplasms involving the central nervous system in dogs. [Aspectos patológicos e distribuição de 78 neoplasias metastáticas ou multicêntricas envolvendo o sistema nervoso central de caninos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10)1989-1998. Setor de Patologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: saulo.pavarini@ufrgs.br
Secondary neoplasms affecting the central nervous system (CNS) may occur through blood flow or direct extension. This condition occurrence has increased both due to a longer life expectancy of dogs, as well as with the employment of chemotherapeutics, which may increase the survival period and, thus, the odds of the occurrence of metastasis. The aim of this study was to analyze the epidemiological features, such as the age, breed and sex of the animals affected, as well as the gross and microscopic findings of the metastasis from neoplasms involving the CNS of 78 dogs, and, based on the data, estimate the occurrence and frequency of the metastatic or multicentric neoplasms. Females (71.79%) were most affected than males, with an average age of 9.5-years-old and a median of 10-years-old. Most of the cases had a multifocal distribution (73.07%), and epithelial neoplasms (50%) were the most common. Telencephalon was the most affected neuroanatomical region (61.1%). Mammary neoplasms were the most frequent (47.44%), followed by hemangiosarcoma (19.23%), lymphoma (10.26%) and melanoma (6.41%). Less common neoplasms included osteosarcoma, histiocytic sarcoma and lung carcinoma (2.56%). Mammary neoplasms were mainly composed of anaplastic and micropapillary carcinomas, of which only multifocal microscopic lesions were observed.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Heck L.C., Cony F.G., Bianchi M.V., Driemeier D., Sonne L. & Pavarini S.P. 2018. Pathological features of 78 metastatic or multicentric neoplasms involving the central nervous system in dogs. [Aspectos patológicos e distribuição de 78 neoplasias metastáticas ou multicêntricas envolvendo o sistema nervoso central de caninos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 38(10)1989-1998. Setor de Patologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: saulo.pavarini@ufrgs.br
Neoplasias secundárias envolvendo o sistema nervoso central (SNC) podem ocorrer por via hematógena ou por extensão direta. A ocorrência desta condição vem aumentando devido à expectativa de vida mais longa dos cães, bem como através do uso de quimioterápicos, os quais podem ampliar a sobrevida e, portanto, as chances para a ocorrência de metástases. O objetivo deste estudo foi analisar os aspectos epidemiológicos, como idade, raça e sexo dos animais afetados, bem como caracterizar os achados macroscópicos e microscópicos de neoplasmas com metástases envolvendo o SNC de 78 caninos e, baseado nestes dados, estimar a ocorrência e a frequência de neoplasias metastáticas ou multicêntricas. Fêmeas (71,79%) foram mais afetadas do que machos, com uma idade média de 9,5 anos e mediana de 10 anos. A maior parte dos casos apresentava distribuição multifocal (73,07%), e neoplasias de origem epitelial (50%) foram as mais frequentes. A localização neuroanatômica mais afetada foi o telencéfalo (61,1%). As neoplasias mamárias foram as mais frequentes (47,44%), seguidas por hemangiossarcoma (19,23%), linfoma (10,26%) e melanoma (6,41%). Osteossarcoma, sarcoma histiocítico e carcinoma pulmonar (2,56%) foram neoplasias menos frequentes. Os tipos de neoplasmas mamários mais observados foram o carcinoma anaplásico e o carcinoma micropapilar, nesses dois tipos as lesões eram multifocais e observadas somente na microscopia.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Lima M.C., Souza M.C.C., Espeschit I.F., Maciel P.A.C.C., Sousa J.E., Moraes G.F., Ribeiro Filho J.D. & Moreira M.A.S. 2018. Mastitis in dairy goats from the state of Minas Gerais, Brazil: profiles of farms, risk factors and characterization of bacteria. [Mastite em cabras de leite no estado de Minas Gerais: perfil de propriedades, fatores de risco e caracterização de bactérias.] Pesquisa Veterinária Brasilera 38(9):1742-1751. Laboratório de Doenças Bacterianas, Departamento de Veterinária, Universidade Federal de Viçosa, Avenida PH Rolfs s/n, Centro, Viçosa, MG 36570‑900, Brazil. E-mail: masm@ufv.br
The Zona da Mata of Minas Gerais has a specialized goat milk production chain. Goat milk is superior in quality compared with milk of other domestic species, and the demand for milk and milk products for the public has increased. Data on dairy goat breeding in Minas Gerais are scarce and relatively old, and this lack of information has limited the implementation of prophylactic measures, especially for mastitis, which represents the biggest sanitary problem for dairy herds. The objective of this work was to characterize mastitis and bacteria associated with it in milking goats in the Zona da Mata of Minas Gerais. It also causes socioeconomic problems and market issues for dairy goat farming. A total of 539 lactating goats were examined and 268 individual samples (one for teat) were collected from animals positive for strip cup test and/or the California Mastitis Test (CMT). Microbiological cultures were carried out on blood agar medium and the bacteria were subjected to phenotypic, genotypic and antimicrobial susceptibility tests. The prevalence of subclinical mastitis was 28.0% and the clinical prevalence was 2.8%. Bacterial multiplication was obtained in 62% of samples. One hundred eighty seven total bacteria were identified. The most common species identified was Staphylococcus aureus (60%), followed Staphylococcus epidermidis (9.1%,), Escherichia coli (6.9%), Staphylococcus saprophyticus (5.9%) e Staphylococcus caprae (4.3%). Bacteria of the genus Staphylococcus presented a profile of resistance to antimicrobials belonging to the beta-lactam class (penicillin, ampicillin and oxacillin) in addition to tetracycline, in contrast to the other antimicrobials tested. Twelve percent of multidrug resistence (MDR) was found in five microregions. Among the bacteria with the highest prevalence of MDR, 38.5% were E. coli and 10.6% were S. aureus. The producers of the Zona da Mata of Minas Gerais are technicians who work with specialized dairy breeds and practise good management. However, some measures related to prophylaxis and control of diseases, such as vaccination, have low adherence or are not performed due to a lack of veterinary assistance. This is the first study focusing on this region, which is highly prominent in goat milk production in Brazil. It provides important information that can help in the implementation of measures for the prophylaxis and control of diseases, and for maintenance of a constant supply of products in sufficient quantities and of a quality suitable for the consumer population.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Lima M.C., Souza M.C.C., Espeschit I.F., Maciel P.A.C.C., Sousa J.E., Moraes G.F., Ribeiro Filho J.D. & Moreira M.A.S. 2018. Mastitis in dairy goats from the state of Minas Gerais, Brazil: profiles of farms, risk factors and characterization of bacteria. [Mastite em cabras de leite no estado de Minas Gerais: perfil de propriedades, fatores de risco e caracterização de bactérias.] Pesquisa Veterinária Brasilera 38(9):1742-1751. Laboratório de Doenças Bacterianas, Departamento de Veterinária, Universidade Federal de Viçosa, Avenida PH Rolfs s/n, Centro, Viçosa, MG 36570‑900, Brazil. E-mail: masm@ufv.br
A Zona da Mata de Minas Gerais possui uma cadeia especializada de produção de leite de cabra. O leite de cabra é superior em qualidade em comparação com o leite de outras espécies domésticas, e a demanda por leite e produtos lácteos do público tem aumentado. Os dados sobre o sistema de criação de cabras leiteiras em Minas Gerais são escassos e relativamente antigos, e essa falta de informação limita a implementação de medidas profiláticas, especialmente para a mastite, que representa o maior problema sanitário nos rebanhos leiteiros. Isso também causa problemas socioeconômicos e problemas de mercado para a criação de cabras leiteiras. O objetivo deste trabalho foi caracterizar a mastite e as bactérias associadas em cabras leiteiras na Zona da Mata de Minas Gerais. Um total de 539 cabras em lactação foi examinado e 268 amostras individuais (uma por teto) foram coletadas de animais positivos no teste da caneca de fundo escuro e/ou Califórnia Mastitis test (CMT). As culturas microbiológicas foram realizadas em meio Agar sangue e as bactérias foram submetidas a testes fenotípicos, genotípicos e testes de susceptibilidade antimicrobiana. A prevalência de mastite subclínica foi de 28,0% e a prevalência clínica foi de 2,8%. A multiplicação bacteriana foi obtida em 62,0% das amostras. Cento e oitenta e sete bactérias foram identificadas. As espécies mais identificadas foram: Staphylococcus aureus (60,4%), seguida de Staphylococcus epidermidis (9.1%,), Escherichia coli (6.9%), Staphylococcus saprophyticus (5.9%) e Staphylococcus caprae (4,3%) em ordem decrescente. As bactérias do gênero Staphylococcus apresentaram um perfil de resistência aos antimicrobianos pertencentes à classe de beta-lactâmicos - penicilina, ampicilina e oxacilina - além da tetraciclina, em contraste com os outros antimicrobianos testados. Doze por cento dos isolados apresentaram resistência múltipla a antibióticos (MDR) e foram encontrados em cinco microrregiões. Entre as bactérias com maior prevalência de MDR, 38,5% foram E. coli e 10,6% S. aureus. Os produtores da Zona da Mata de Minas Gerais são tecnificados, trabalham com raças leiteiras especializadas praticam e possuem bom manejo. No entanto, algumas medidas relacionadas à profilaxia e ao controle das doenças, como a vacinação, têm baixa adesão ou não são realizadas por falta de assistência veterinária. Este é o primeiro estudo com foco nesta região, que possui grande relevância na produção de leite de cabra no Brasil, fornecendo informações importantes que podem auxiliar na implementação de medidas de profilaxia e controle das doenças, e na manutenção de um fornecimento constante de produtos em quantidade e qualidade suficientemente adequada para a população consumidora.
Abstract in English:
The aim of this study was to evaluate the serum concentrations of estradiol, progesterone, prolactin, the gene expression of estrogen α and β and progesterone receptors in bitches with mammary neoplasms. Sixty adult crossbred bitches distributed in two groups were used. Group I consisted of 30 bitches with mammary neoplasms and Group II consisted of 30 healthy bitches without neoplasia. For the tutors, interviews were made about the disease epidemiology. After preoperative examinations, bitches with mammary neoplasia were submitted to mastectomy; fragments of the neoplasms and regional lymph nodes were collected and processed for histopathological analysis. Blood samples were collected in tubes without anticoagulant and the serum was analyzed by electrochemiluminescence to measure estradiol, progesterone and prolactin. The gene expression of the hormonal receptors was performed by means of the Real-time PCR technique, thus fragments of mammary neoplasms were collected and the RNA was extracted to obtain cDNA. Expression of the mRNA for ERα, ERβ and PR was assessed from the amplification of these genes using specific primers. Higher serum levels of estradiol (mean 38.98±13.68pg/mL) were observed in bitches with malignant neoplasms when compared to the control bitches (p<0.05). Serum prolactin levels were higher (mean of 0.231±0.201ng/mL) in bitches that did not have mammary neoplasms when compared to Group I (p<0.05). No difference was observed for related to the progesterone levels between the groups (p>0.05). Both malignant and benign tumors expressed ERα, ERβ and RP with no statistical difference (p>0.05) and there were no difference related to the other prognostic factors investigated (clinical staging, presence of ulceration, vascularization and aging of neoplasms). Serum estradiol levels increased significantly with the clinical staging of the disease (p<0.05). There was a moderate negative correlation between serum levels of estradiol and prolactin. It was concluded that serum levels of estradiol and PRL were influenced by tumor malignancy and clinical staging of neoplasms. Hormonal receptors were expressed by neoplasms, regardless of tumor type and are not associated with other classical prognostic factors, such as ulceration, vascularization or clinical staging.
Abstract in Portuguese:
O objetivo desse estudo foi avaliar as concentrações séricas de estradiol, progesterona e prolactina, bem como a expressão gênica dos receptores de estrógeno α e β e de progesterona em cadelas com neoplasias mamárias. Foram utilizadas 60 cadelas adultas, sem raça definida que foram distribuídas em dois grupos. O Grupo I constituído por 30 cadelas portadoras de neoplasias mamárias e o Grupo II constituído por 30 cadelas saudáveis, não portadoras de neoplasia. Para os tutores, foram aplicados questionários sobre fatores epidemiológicos da doença. Após avaliação dos exames pré-operatórios, as cadelas com neoplasia mamária foram submetidas à mastectomia, coletaram-se fragmentos das neoplasias e linfonodos regionais, os quais foram processados para análise histopatológica. Para as dosagens hormonais de estradiol, progesterona e prolactina foram colhidas amostras de sangue em tubos sem anticoagulante e os soros foram submetidos à técnica de eletroquimioluminescência. A expressão gênica dos receptores hormonais foi realizada por meio da técnica de Real-time PCR e para isso foram coletados fragmentos das neoplasias mamárias e extraído o RNA para obtenção do cDNA. A expressão do mRNA para os REα, REβ e RP foi avaliada a partir da amplificação desses genes utilizando primers específicos. Verificaram-se maiores níveis séricos de estradiol (média de 38,98±13,68pg/mL) em cadelas portadoras de neoplasias mamárias malignas quando comparadas as cadelas do grupo controle (p<0,05). Já os níveis séricos de prolactina foram maiores (média de 0,231±0,201ng/mL) nas cadelas que não possuíam neoplasias mamárias quando comparadas ao Grupo I (p<0,05). Para os níveis de progesterona não foram observadas diferença entre os diferentes grupos (p>0,05). Tanto os tumores malignos como os benignos expressaram REα, REβ e RP, não havendo diferença (p>0,05) na expressão entre tumores malignos ou benignos ou relacionada aos outros fatores prognósticos investigados (estadiamento clínico, presença de ulceração, vascularização e tempo de evolução do processo). Os níveis séricos de estradiol aumentaram significativamente com o estadiamento clínico da doença (p<0,05). Verificou-se moderada correlação negativa entre os níveis séricos de estradiol e prolactina. Dessa forma, conclui-se que as dosagens séricas de estradiol e PRL foram influenciadas pela malignidade do tumor e pelo estadiamento clínico das neoplasias. Os receptores hormonais foram expressos pelas neoplasias, independentemente do tipo tumoral e não estão associados aos outros fatores prognóstico clássicos, como presença de ulceração, vascularização ou estadiamento clínico.
Abstract in English:
The immune response capacity of the mammary gland plays a major role to determine if mastitis will or not be established. Thus, we hypothesize that a better understanding of polymorphonuclear neutrophil leukocyte (PMN) function will elucidate mechanisms that will improve our knowledge of how we could avoid an inflammatory process by increasing the immune capacity of the cow, and even further, to search for a tool to diagnose mastitis or a possible way to select and identify non-susceptible animals. The present study utilized 112 quarters from 28 Holstein dairy cows that were divided into quarters milk samples with somatic cell count (SCC) <2×105 cells mL-1 (n=72) and SCC >2×105 cells mL-1 (n=40). The percentages of milk PMNs and the levels of intracellular reactive oxygen species (ROS) and the phagocytosis of Staphylococcus aureus by milk neutrophils were evaluated by flow cytometry. Our results showed a higher percentage of neutrophils in quarter milk samples with high SCC (P=0.0003), and this group also had a significantly higher percentage of neutrophils that produced ROS (P=0.008). On the other hand, the phagocytosis intensity of S. aureus by milk neutrophils was higher in quarters with low SCC (P=0.003), suggesting a better mammary gland immunity against invading pathogens. Analyzing the results of the predictive values of the measured PMN functions, they cannot be used isolated as a good diagnosis test since none of them had a satisfactory sensitivity and specificity values, which was also confirmed by the Youden index values being far from one. In conclusion, the assessment of milk bovine neutrophil functions could improve our understanding of the cellular basis of mastitis. Although, the intracellular ROS production and S. aureus phagocytosis by milk neutrophil did not have high predictive values to detect intramammary infections, our results strengthen the idea that that poor bovine mammary gland neutrophil phagocytic ability may be associated with high SCC, and might be considered to identify susceptible dairy cows to mastitis.
Abstract in Portuguese:
A resposta imune da glândula mamária desempenha um papel importante ao determinar o estabelecimento da dos neutrófilos irá nos subsidiar conhecimentos, pelo qual podemos evitar o processo inflamatório pela otimização da resposta imune de bovinos leiteiros, e fornece ferramentas para diagnosticar a mastite ou um possível instrumento para identificar e selecionar animais resistentes à infecção intramamária, aumentando a produtividade do rebanho. O presente estudo utilizou 112 amostras provenientes de quartos mamários de 28 vacas Holandesas que foram divididos em amostras de leite com baixa (n=72; <2×105 células mL-1) ou alta (n=40; 2×105 células mL-1) contagem de células somáticas (CCS). A porcentagem de neutrófilos no leite, a produção intracelular de espécies reativas de oxigênio (ERO) e a fagocitose de Staphylococcus aureus pelos neutrófilos do leite foram avaliadas por citometria de fluxo. Os resultados do presente estudo demonstraram maior percentagem de neutrófilos (CH138+; P=0,0003) e percentagem de neutrófilos que produziram ERO (P=0,008) em amostras de leite com alta CCS. Por outro lado, a intensidade de fagocitose de S. aureus por neutrófilos em amostras de leite com baixa CCS (P=0,003), que demonstra maior atividade funcional destas células neste grupo. As funções neutrofílicas para o diagnóstico da mastite não apresentaram valores de sensibilidade e especificidade altos, que foram confirmados pelo índice Youden. Desta forma, conclui-se que a produção intracelular de ERO e fagocitose de S. aureus pelos neutrófilos do leite não apresentaram valores preditivos altos para detecção de mastite. Além disto, os resultados do presente estudo reforçam a ideia de neutrófilos do leite com menor capacidade fagocítica podem ser associados à alta CCS, e pode ser considerado como uma ferramenta para identificar animais mais susceptíveis à infecções intramamárias.
Abstract in English:
Mammary tumors research in bitches is important due to their high incidence. The aim of this study was to evaluate the importance of the axillary lymph node as a sentinel lymph node for mammary neoplasms in female dogs. Forty-nine bitches with mammary neoplasia were submitted to total unilateral mastectomy, and the axillary lymph node was identified using the patent blue dye. This lymph node was processed routinely for histopathological analysis and stained with hematoxylin-eosin and by immunohistochemistry (IHC) with cytokeratin antibody (AE1/AE3) to search for metastasis. Eight dogs had axillary lymph node metastases, seven of which were detected by histopathology and by IHC and only one by IHC (micrometastasis). One dog who presented tumor in caudal and inguinal abdominal mammary glands had metastases in the axillary and inguinal lymph nodes. It is concluded that the mammary tumor can cause alteration in lymphatic drainage leading to metastases in lymph nodes which normally do not drain certain glands; so the removal of the axillary lymph node should be included as a routine technique to allow better staging of mammary neoplasms of bitches.
Abstract in Portuguese:
Linfonodo axilar como sentinela de neoplasia mamária em cadelas. O estudo dos tumores de mama em cadelas é de grande importância devido à alta frequência com que surgem na clínica de pequenos animais. O presente estudo teve como objetivo avaliar a importância do linfonodo axilar como sentinela em neoplasias mamárias de cadelas. Foram avaliadas 49 fêmeas com neoplasia mamária, submetidas à mastectomia unilateral total, utilizando o corante azul patente para a identificação do linfonodo axilar, o qual foi submetido à análise histopatológica com a coloração de hematoxilina-eosina e imuno-histoquímica (IHQ) com anticorpo citoqueratina (AE1/AE3) para procura de metástase. Oito cadelas apresentaram metástases em linfonodo axilar, sendo sete detectadas por histopatologia e por IHQ e uma somente pela IHQ (micrometástase). Uma paciente que apresentava tumor em mamas abdominal caudal e inguinal tinha metástase no linfonodo axilar e inguinal. Assim, observa-se que o tumor pode causar alteração na drenagem linfática provocando metástase em linfonodos que normalmente não drenam determinadas mamas, por isso a retirada do linfonodo axilar deve ser incluída como técnica de rotina para permitir melhor estadiamento das neoplasias mamárias de cadelas.
Abstract in English:
Milk somatic cell count (SCC) is the basis of mastitis and milk quality control programs, however it not differentiate the distinct leukocyte populations which in turn can improve the diagnosis of mastitis. Thus, the present study aimed to evaluate different techniques used to measure the distinct leukocyte populations in milk in attempt to improve the diagnosis of mastitis. Here, milk samples from 31 dairy cows (124 quarter milk samples) were used. The differential leukocytes count was determined by cytocentrifugation, direct microscopy smears, and monoclonal antibodies by flow cytometry. The automatic SCC was also performed. The results showed a positive and significant correlation between the proportion of polymorphonuclear leukocytes determined by all techniques and automatic cell count; although a discrete higher correlation between flow cytometry and automatic SCC was found. Furthermore, the present study reinforces the idea that macrophages were the predominant cell type in mammary gland with low SCC. The proportion of each leukocyte population differ among techniques, probably due to the subjectivity of the examiner in the evaluation of the differential leukocyte counts by cytocentrifugation and direct microscopy smears, which emphasize that flow cytometry can be a useful and feasible tool in the diagnosis and control of mastitis.
Abstract in Portuguese:
A contagem de células somáticas (CCS) é um parâmetro amplamente utilizado para monitorar a saúde do úbere e a qualidade do leite, porém não diferencia as distintas populações leucocitárias. Portanto, a diferenciação das populações celulares no leite pode aprimorar o diagnóstico da mastite bovina. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi avaliar as diferentes técnicas de contagem diferencial de leucócitos no leite para diagnosticar precisamente a mastite. Para tal, foram utilizadas 31 vacas da raça holandesa preta e branca em lactação (124 quartos mamários). Foram empregadas a contagem automática de células somáticas, e a contagem diferencial de leucócitos pelas técnicas de citocentrifugação, contagem diferencial de leucócitos por esfregaço direto, e citometria de fluxo com a utilização de anticorpos monoclonais específicos para identificação de cada população leucocitária. Os resultados demonstraram correlação positiva e significativa entre a proporção de leucócitos polimorfonucleares pelas diferentes técnicas e a contagem automática de células somáticas, sendo observada uma correlação discretamente mais forte com a citometria de fluxo. Além disso, foi demonstrado que os macrófagos são a população predominante no leite oriundo de glândula mamária com baixa CCS. Observaram-se também diferenças na proporção das distintas populações leucocitárias entre as distintas técnicas, resultado da possível subjetividade do examinador na contagem diferencial de leucócitos pelas técnicas de citocentrifugação e contagem microscópica direta por esfregaços, o que reforça que a citometria de fluxo pode ser uma ferramenta confiável no controle e diagnóstico da mastite.
Abstract in English:
ABSTRACT.- Magalhães L.F., Magalhães G.M., Calazans S.G., Crivellenti L.Z., Lima G.P. & Medeiros-Ronchi A.A. 2017. [Epithelial to mesenchymal transition immunostaining in canine primary mammary tumor and lymph node.] Imunomarcação da transição epitélio-mesenquima na neoplasia mamária primária de cadelas e sua metástase em linfonodo. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(12):1479-1482. Departamento de Patologia Animal, Universidade Federal de Uberlândia, Av. Mato Grosso 3289, bloco 2S, Bairro Umuarama, Uberlândia, MG 38405314, Brazil. E-mail: larissa.magalhaes@unifran.edu.br
Mammary carcinomas in dogs have a high metastatic capacity which gives a shorter survival rate for patients with this type of tumor. The epithelial-mesenchymal transition phenotype, characterized by the trade of intermediary filaments of cytokeratin by vimentin, also by the loss of the adhesion protein between cells (E-cadherin) is associated with metastasis. Due to this fact, it was aimed to evaluate, by immunostaining, the expression of vimentin, cytokeratin and E-cadherin in canine mammary tumors and the metastasis in lymph node, in order to assess the cell behavior when facing this cancer. Five cases of canine mammary tumors and metastasis in lymph node were evaluated. The averages of immunostainings of the group of primary neoplasms were compared with the averages of the lymph node group. The results showed that immunostaining for cytokeratins (p=0,1407) and E-caderina (p=0,312) were not significant between the groups, despite the expression mean of cadherin was higher in the metastase group. The expression of vimentin (p=0,04) was greater at sites of metastases. It is concluded that the expression of vimentin increases in the focus of the metastase in relation to their respective primary canine mammary tumors, characterizing cellular structural alteration, conferring a transient epithelial-mesenchymal phenotype. And cadherin present strong evidence of increased focus on metastasis characterizing increased adhesion.
Abstract in Portuguese:
RESUMO.- Magalhães L.F., Magalhães G.M., Calazans S.G., Crivellenti L.Z., Lima G.P. & Medeiros-Ronchi A.A. 2017. [Epithelial to mesenchymal transition immunostaining in canine primary mammary tumor and lymph node.] Imunomarcação da transição epitélio-mesenquima na neoplasia mamária primária de cadelas e sua metástase em linfonodo. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(12):1479-1482. Departamento de Patologia Animal, Universidade Federal de Uberlândia, Av. Mato Grosso 3289, bloco 2S, Bairro Umuarama, Uberlândia, MG 38405314, Brazil. E-mail: larissa.magalhaes@unifran.edu.br
Os carcinomas mamários em cães apresentam alta capacidade metastática o que confere menor sobrevida para os pacientes com este tipo de neoplasia. O fenótipo transição epitélio-mesênquima, caracterizado pela troca dos filamentos intermediários de citoqueratina por vimentina, além da perda da proteína de adesão entre células (E-caderina) está relacionado com a maior ocorrência de metástase. Diante disto, objetivou-se avaliar, por meio de imunomarcações, a expressão de vimentina, citoqueratina e E-caderina nos tumores mamários caninos e suas metástases em linfonodo, a fim de avaliar o comportamento celular frente a esta neoplasia. Foram analisados cinco casos de neoplasias mamárias primárias caninas e suas respectivas metástases em linfonodos. Foram comparadas as médias de imunomarcações do grupo de neoplasias primárias com as médias do grupo metástase. Não houve diferença estatística nas imunomarcações da citoqueratina (p=0,1407) e E-caderina (p= 0,312) entre os grupos, apesar da média de expressão da E-caderina ter sido maior no grupo de metástases. A expressão da vimentina foi maior nos sítios das metástases (p=0,0462). Conclui-se que a expressão de vimentina aumenta no foco da metástase em relação aos seus respectivos tumores primários mamários caninos, caracterizando alteração estrutural celular, conferindo um fenótipo transição epitélio-mesênquima. Além da E-caderina apresentar fortes indícios de aumento no foco da metástase caracterizando maior adesão.