Abstract in English:
Adipose tissue-derived stem cells (ADSCs) are an attractive source of mesenchymal stem cells (MSCs) for use in tissue engineering and clinical applications. This paper focuses on the characterization of ADSCs used as immunosuppressive agent in rabbits undergoing partial allograft for urine bladder restorage. For this study highlighted the characterization of the ADSCs used as immunosuppressive agents in rabbits submitted to partial allograft for restoration of the urinary vesicle, using 25 animals, six months old, New Zealand. ADSCs at the third peal were characterized by the MSC-specific CD105, CD73 and CD90 expression and by the absence of the hematopoietic marker CD45, as revealed by flow cytometry analysis. Moreover, ADSCs were efficient in preventing allograft rejection from the urinary bladder, as judged by biochemical, clinical and ultrasonography analysis. Together, these results compose characterization of protein expression profiles and immunosuppressive functionality of ADSCs in rabbits, which had undergone partial allografts of the urinary bladder, foreseeing future applications in clinical practice.
Abstract in Portuguese:
As células mesenquimais derivadas de tecido adiposo (ADSCs) são uma fonte atraente de células-tronco mesenquimais (MSCs) para uso na engenharia de tecidos e suas aplicações clínicas. Este trabalho destacou a caracterização das ADSCs utilizadas como agentes imunossupressores em coelhos submetidos a aloenxerto parcial para restauração da vesícula urinária, sendo utilizados 25 animais, de seis meses de idade, Nova Zelândia. As ADSCs, após o terceiro repique, foram caracterizadas pela expressão específica de MSC CD105, CD73 e CD90 e pela ausência do marcador hematopoiético CD45, tal como revelado por análise de citometria de fluxo. Além disso, os ADSCs foram eficientes na prevenção da rejeição de aloenxertos da vesícula urinária, conforme avaliado por análises clínica, bioquímica e ultrassonográfica. Juntos, esses resultados compõem a caracterização dos perfis de expressão proteica e a funcionalidade imunossupressora de ADSCs em coelhos, que sofreram aloenxertos parciais da bexiga, prevendo futuras aplicações na prática clínica.
Abstract in English:
Bovine herpesvirus 1 (BoHV-1) is an important bovine pathogen that is responsible for causing respiratory diseases and reproductive failures. The presence of BoHV-1 in an in vitro embryo production system affects fertilization, maturation, and embryonic development. The objective of this study was to evaluate the developmental capacity of oocytes from naturally infected cows with no reproductive history. Moreover, this study investigated the presence of viral DNA in cumulus oophorus complexes (COCs). Experimental groups were differentiated by titrating the antibodies detected through seroneutralization assays, establishing three groups: seronegative animals (titer lower than 2), low titer (2 to 8), and animals with a titer above or equal to 16. COCs were obtained from 15 donors during 22 sessions of ultrasound-guided follicular aspiration. DNA was extracted from a pool of COCs obtained from all aspirations from the same donor as well as from whole blood and nested PCR reactions were performed. Only COCs with a compact layer of cumulus cells, an intact zona pellucida, and homogeneous cytoplasm were selected for in vitro culture and evaluation of nuclear maturation rate. After culturing for 24 hours, the oocytes were fixed and stained to evaluate the meiotic cell cycle stage. Oocytes that showed a chromosomal configuration in metaphase II were considered to have reached nuclear maturation. Compared with the other groups, the oocyte nuclear maturation rate in animals with a titer greater than or equal to 16 (50%) was compromised (P< 0.05). However, the viral titer did not influence the maturation rate of bovine oocytes in animals exhibiting low titration (62.2%) when compared with the control group (76.7%). Viral DNA was not observed in the blood samples but was detected in the COC pool from three seropositive donors. In view of the results obtained, we conclude that natural infections by the BoHV-1 virus can compromise the nuclear maturation rate in cows, depending on the titration levels of antibodies against the virus. Moreover, viral DNA could be present in COCs, contradicting the hypothesis that seropositive animals with no history of clinical symptomatology pose a negligible risk of transmitting BoHV-1 by COCs.
Abstract in Portuguese:
Herpesvírus bovino 1 (BoHV 1) é um importante patógeno bovino, responsável por causar doenças respiratórias e falhas reprodutivas. A presença do BoHV-1 em sistema de produção in vitro de embriões afeta a fertilização, a maturação e o desenvolvimento embrionário. O objetivo deste estudo foi avaliar a capacidade de desenvolvimento de ovócitos oriundos de vacas infectadas naturalmente sem histórico reprodutivo. Além disso, este estudo investigou a presença do DNA viral em Complexos Cumulus Ooforus (COCs). Os tratamentos foram definidos a partir do título de anticorpos detectados pelos ensaios de soroneutralização, sendo estabelecidos três grupos: animais soronegativos (título menor do que 2), título baixo (2 a 8) e animais com título maior ou igual a 16. Os COCs foram obtidos de 15 doadoras durante 22 sessões de aspiração folicular guiada por ultrassom. A extração do DNA foi realizada em um pool de COCs de todas as aspirações de uma mesma doadora e no sangue total para a realização das reações de Nested-PCR. Para avaliação da taxa de maturação nuclear, foram selecionados para o cultivo in vitro somente os COCs com camada compacta de células do cumulus, zona pelúcida íntegra e citoplasma homogêneo. Após 24 horas de cultivo, os ovócitos foram fixados e corados em lâmina para a avaliação do estádio do ciclo celular meiótico. Os ovócitos que apresentaram configuração cromossômica em metáfase II foram considerados como tendo alcançado a maturação nuclear. Verificou-se comprometimento na taxa de maturação nuclear ovocitária (P<0.05) nos animais de título maior ou igual a 16 (50%). No entanto, não houve influência do título viral na taxa de maturação de ovócitos bovinos em animais que apresentaram titulação baixa (62,2%) quando comparados com o grupo controle (76,7%). O DNA viral não foi identificado nas amostras de sangue, mas foi detectado no pool de COCs de três doadoras soropositivas. Diante dos resultados encontrados conclui-se que vacas infectadas naturalmente pelo vírus BoHV-1 apresentam comprometimento na taxa de maturação nuclear, dependendo do grau de titulação de anticorpos contra o vírus. Ademais, o DNA viral pode estar presente em COCs contrariando a hipótese de que animais sorologicamente positivos e sem histórico de sintomatologia clínica oferecem risco negligível de transmissão do BoHV-1 por COCs.
Abstract in English:
Vernonia rubricaulis is a hepatotoxic plant found in the Pantanal biome. Under natural conditions, it is responsible for highly fatal poisonings in cattle. From January 1999 to December 2016, 33 outbreaks of V. rubricaulis poisoning were recorded, resulting in 1509 bovine deaths, of which 719 (47.6%) were adult females, 413 (27.4%) were adult males, 244 (16.2%) adult cattle with no information about sex and 133 (8.8%) calves. The coefficients of morbidity, mortality and lethality were respectively 2.79%, 2.77% and 99.24%. Most outbreaks occurred in properties containing up to 1,000 cattle, where the most significant economic impacts were also observed. Among the total recorded deaths, the total direct monetary loss was estimated at US$764,893.33, which represents an average of 3.05% of the total assets (US$25,090,683.51) of the herds involved in the outbreaks. The plant can cause more severe damage to properties with less than 500 cattle, and can reach 50% of the total value of the herd. In comparison to other methods, the methodology used in this study has an economic impact consistent with reality, not overestimating the losses. Toxic plants, such as V. rubricaulis, can cause significant economic losses in the extensive systemic livestock, and it is important decision-making and prophylactic management to avoid the occurrence of poisoning in the herds.
Abstract in Portuguese:
Vernonia rubricaulis é uma planta hepatotóxica encontrada no bioma Pantanal. Em condições naturais, é responsável por intoxicações altamente fatais em bovinos. De janeiro de 1999 a dezembro de 2016, foram registrados 33 surtos de intoxicação por V. rubricaulis em bovinos que resultaram em 1509 mortes, sendo 719 (47,6%) fêmeas adultas, 413 (27,4%) machos adultos, 244 (16,2%) bovinos adultos sem informação sobre o sexo e 133 (8,8%) bezerros. Os coeficientes de morbidade, mortalidade e letalidade foram respectivamente de 2,79%, 2,77% e 99,24%. A maioria dos surtos ocorreu em propriedades contendo até mil bovinos, onde também foram constatados os impactos econômicos mais significativos. Do total das mortes registradas, o prejuízo monetário direto total foi calculado em US$764.893,33, o que representa em média 3,05% do total do patrimônio (US$25.090.683,51) dos rebanhos envolvidos nos surtos. A planta pode causar prejuízos mais severos em propriedades com menos de 500 bovinos, podendo chegar a 50% do total do valor do rebanho. Em comparação aos outros métodos, a metodologia utilizada neste estudo afere um impacto econômico condizente com a realidade, não superestimando os prejuízos. Plantas tóxicas, como a V. rubricaulis, podem causar prejuízos econômicos significativos na pecuária extensiva, sendo importantes tomadas de decisões e manejos profiláticos para evitar a ocorrência de intoxicação nos rebanhos.
Abstract in English:
Cranial cruciate ligament is the main responsible for knee stability by preventing cranial tibial displacement regarding the femur. Deficiency in this ligament (CCLD) may cause subluxation of the tibia and dysfunction of the pelvic member due to overloading. Tibial osteotomies are among the more current surgical techniques for treating CCLD in dogs and they proportionate the dynamic stability by means of modifying bone geometry and the distribution of forces acting on the articulation. The objective of this work is to describe the use of the allogeneic cortical bone graft conserved in glycerin as a spacer on the tibial tuberosity advancement (TTA) for treating the CCLD. In order to do that, 34 dogs submitted to TTA surgery correction were evaluated, being 23 males (67.35%) and 11 females (32.35%). Surgical procedures happened from May 2011 to October 2015. Regarding the surgical procedure after osteotomy of the tibial tuberosity, a disk of allogeneic cortical disk, sawn wedge-hapsed, conserved in glycerin, proportions of 2x1mm was applied as spacer, enabling TTA. Advancements from 3 to 12 mm were executed, depending on the need of the patient. For animals with patella dislocation, trochleoplasty and TTA were executed in order to correct the deviation. The mean ± SD age of animals was 6.67±3.58 and weight was 15.16±12.97 kg. Mongrel dogs, Poodles and Yorkshire terriers were the most affected ones. From the 36 evaluated knees, 11 (30.56%) were associated with some traumatic process and in 25 (69.44%) there was no relation with previous trauma. From those wounds, 20 (55.56%) happened in the right limb and 16 (44.44%) in the left limb and two animals had CCLD bilaterally. Animals had continuous support, discreet drawer movement and negative tibial compression 15 days after surgery. At 30 days, 26 cases (72.22%) had firm support (FS); at 45 days, 24 cases (66 test at 7 and 67%) had FS and eight cases (22.22%) without claudication (WC). During subsequent radiographic evaluations the progressive incorporation of the graft and osteotomy union were observed. In this study, most of the diagnosed CCLD occurred in males diverging from results obtained by other authors that found greater frequency in females. Support without claudication it was observed in most of the cases of implants at 60 days. We concluded that the conserved allogeneic cortical bone graft was able to promote bone union in TTA of dogs with CCLD. None of the animals had signs of contamination, infection of the surgical wound or rejection related with the presence of the graft, demonstrated by the complete graft bone incorporation observed early at 45 days in some animals. The glycerin was a good conservation medium for those fragments intended for grafting because, besides being of low cost, it kept bone fragments free of contamination, reducing antigenicity and preserving the functions of osteoinduction and osteoconduction. The possibility of molding the graft to the animal need is a characteristic favorable to executing the modified technique that could be molded according to the size of the animal, allowing perfect adaptation to the osteotomized local in different breeds. Intercurrences commonly observed in TTA with patellar dislocation, meniscal lesions, tibial crest fracture and displacement were not found in the animals of this study, probably due to the better distribution of forces between the pass screw in TT and the TTA plate confirming that it has good adaptation to the technique conferring to the modified TTA advantages regarding the conventional TTA.
Abstract in Portuguese:
O ligamento cruzado cranial é o principal responsável pela estabilidade do joelho, impedindo o deslocamento da tíbia cranial em relação ao fêmur. A deficiência neste ligamento (CCLD) pode causar subluxação da tíbia e disfunção do membro pélvico devido à sobrecarga. As osteotomias tibiais estão entre as técnicas cirúrgicas mais atuais para o tratamento de CCLD em cães e proporcionam a estabilidade dinâmica por meio da modificação da geometria óssea da distribuição das forças que atuam sobre a articulação. O objetivo desse estudo é descrever o uso do enxerto ósseo cortical alogênico conservado em glicerina como espaçador no avanço da tuberosidade tibial (TTA) para o tratamento do CCLD. Para isso, 34 cães submetidos à cirurgia de TTA foram avaliados, sendo 23 machos (67,35%) e 11 fêmeas (32,35%). Os procedimentos curúrgicos aconteceram entre maio de 2011 e outubro de 2015. Com relação ao procedimento cirúrgico após a osteotomia da tuberosidade tibial, um disco alogênico cortical, em forma de cunha serrada, conservado em glicerina com proporções de 2 x 1mm foi aplicado como espaçador possibilitando a TTA. Avanços de 3 a 12mm foram executados, dependendo da necessidade do paciente. Para animais com luxação da patela, realizou-se a trocleoplastia e a TTA para a correção do desvio. A idade média dos animais foi de 6,67±3,58 anos e pesos médios de 15,16±12,97kg. Cães sem raça definida, Poodles e Yorkshire Terriers foram os mais afetados. Dos 36 joelhos avaliados, 11 (30,56%) foram associados a algum processo traumático e em 25 (69,44%) não havia nenhuma relação com um trauma prévio. Dos ferimentos, 20 (55,56%) aconteceram no membro direito e 16 (44,44%) no esquerdo, sendo que dois animais apresentavam CCLD bilateralmente. Os animais tiveram suporte contínuo, discreto movimento de gaveta e compressão tibial negativa 15 dias após a cirurgia. Aos 30 dias, 26 casos tinham suporte firme (FS); aos 45 dias, 24 casos tinham FS e oito casos sem claudicação (WC). Durante avaliações radiográficas subsequentes, observou-se a incorporação progressiva da união do enxerto e da osteotomia. Neste estudo, a maior parte do CCLD diagnosticado ocorreu em machos, divergindo dos resultados obtidos por outros autores que encontraram maior frequência em fêmeas. Suporte sem claudicação foi observado na maioria dos casos de implantes aos 60 dias. Foi concluído que o enxerto ósseo cortical alogênico conservado foi capaz de promover a união óssea na TTA de cães com CCLD. Nenhum dos animais apresentou sinais de contaminação, infecção da ferida cirúrgica ou rejeição relacionada à presença do enxerto, demonstrada pela incorporação completa do enxerto ósseo observada precocemente aos 45 dias em alguns animais. A glicerina foi um bom meio de conservação para os fragmentos destinados à enxertia porque, além do menor custo, manteve os fragmentos ósseos livres de contaminação, reduzindo a antigenicidade e preservando as funções de osteoindução e osteocondução. A possibilidade de moldagem do enxerto à necessidade do animal é uma característica favorável à execução da técnica modificada que pode ser moldada de acordo com o tamanho do animal, possibilitando perfeita adaptação ao local osteotomizado em diferentes raças. Intercorrências comumente observadas na TTA com luxação patelar, lesões meniscais, fratura da crista tibial e deslocamento não foram encontradas nos animais deste estudo, provavelmente devido à melhor distribuição de forças entre a passagem do parafuso no TT e a placa do TTA, confirmando que tem boa adaptação à técnica conferindo às vantagens da TTA modificada em relação à TTA convencional.
Abstract in English:
The objective of this study was to determine the biochemical profile of dairy cows with induced lactation. For comparison, another group of normally calved cows was used as control. Lactation was induced in multiparous Holstein cows (n=10) with two norgestomet implants (3mg each implant) on day 1. The testing continued with intramuscular norgestomet (3mg/animal) on days 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 and 15. On days 1, 9, 16 to 18 and then every 14 days, bSTr (500mg/animal) was added. On day 16, the intravaginal implant was removed and intramuscular prostaglandin F2α (0.530mg/animal) and intramuscular estradiol benzoate (5mg/animal) were added. On days 16 to 18 dexamethasone (10mg/animal) was added, and from days 18 to 20 intramuscular metoclopramide (100mg/animal) was added. Milking began on day 19 of the induction. Blood was collected for a biochemical profile after 21 days in milk. It was found that urea and triglyceride concentrations were significantly higher in the induced cows (P<0.05). Therefore, it was concluded that the animals that had lactation induced did not present disorders related to the biochemical profile indicating that the hepatic function, renal function and lipidogram of the animals were not affected by the use of the drugs to induce lactation.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste estudo foi determinar o perfil bioquímico de vacas leiteiras com submetidas a indução de lactação. Para comparação, outro grupo de vacas que apresentaram parto normal foi usado como controle. A lactação foi induzida em vacas Holandesas (n=10) utilizando dois implantes de norgestomet (3mg cada implante) no dia 1. O protocolo continuou com a aplicação de norgestomet intramuscular (3mg / animal) nos dias 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 e 15. Nos dias 1, 9, 16 a 18 e depois a cada 14 dias, foi adicionado bSTr (500mg / animal). No dia 16, o implante intravaginal foi removido e adicionou-se prostaglandina F2a intramuscular (0,530 mg / animal) e benzoato de estradiol intramuscular (5mg / animal). Nos dias 16 a 18 foi adicionada dexametasona (10mg / animal) e dos dias 18 a 20 foi adicionada metoclopramida intramuscular (100 mg / animal). A ordenha começou no dia 19 da indução. O sangue foi coletado para mensuração do perfil bioquímico após 21 em leite. Verificou se que as concentrações de ureia e triglicérides foram significativamente maiores nas vacas induzidas (P<0,05). Portanto, concluiu-se que os animais que tiveram a lactação induzida não apresentaram distúrbios relacionados ao perfil bioquímico, indicando que a função hepática, a função renal e o lipidograma dos animais não foram afetados pelo uso das drogas para induzir a lactação.
Abstract in English:
The analysis of animal movement patterns may help identify farm premises with a potentially high risk of infectious disease introduction. Farm herd sizes and bovine movement data from 2007 in the state of Mato Grosso, Brazil, were analyzed. There are three different biomes in Mato Grosso: the Amazon, Cerrado, and Pantanal. The analysis of the animal trade between and within biomes would enable characterization of the connections between the biomes and the intensity of the internal trade within each biome. We conducted the following analyses: 1) the concentration of cattle on farm premises in the state and in each biome, 2) the number and relative frequency of cattle moved between biomes, and 3) the most frequent purposes for cattle movements. Twenty percent (20%) of the farm premises had 81.15% of the herd population. Those premises may be important not only for the spread of infectious diseases, but also for the implementation of surveillance and control strategies. Most of the cattle movement was intrastate (97.1%), and internal movements within each biome were predominant (88.6%). A high percentage of movement from the Pantanal was to the Cerrado (48.6%), the biome that received the most cattle for slaughter, fattening and reproduction (62.4%, 56.8%, and 49.1% of all movements for slaughter, fattening, and reproduction, respectively). The primary purposes for cattle trade were fattening (43.5%), slaughter (31.5%), and reproduction (22.7%). Presumably, movements for slaughter has a low risk of disease spread. In contrast, movements for fattening and reproduction purposes (66.2% of all movements) may contribute to an increased risk of the spread of infectious diseases.
Abstract in Portuguese:
A análise dos padrões de trânsito animal pode ajudar a identificar estabelecimentos sob um risco potencialmente maior de introdução de doença infecciosa. Foram analisadas a rede de trânsito de bovinos no estado do Mato Grosso, Brasil, e uma base de dados com tamanho de rebanho, ambas de 2007. Há três biomas diferentes em Mato Grosso: Amazônia, Cerrado e Pantanal. A análise do trânsito animal entre e dentro dos biomas nos permitiu caracterizar quão conectados são os biomas e quão intenso é o trânsito interno dentro de cada bioma. Conduzimos as seguintes análises: 1) se o rebanho bovino está concentrado em alguns estabelecimentos no estado todo e em cada bioma; 2) sobre o número absoluto e a frequência relativa de bovinos movimentados entre os biomas; e 3) quais são os propósitos mais frequentes para o trânsito animal. Encontramos que 20% dos estabelecimentos possuíam 81,15% do rebanho total do estado. Estes estabelecimentos podem ser importantes para o espalhamento de doenças infecciosas, mas também para a implementação de estratégias de vigilância e controle. A maior parte do trânsito foi dentro do estado (97,1%), e o trânsito interno dentro de cada bioma foi predominante (88,6%). Um percentual alto de movimentos do Pantanal (48,6%) foi para o Cerrado, o bioma que recebeu mais bovinos para abate, engorda e reprodução (62,4%, 56,8% e 49,1% de todos os movimentos para abate, engorda e reprodução, respectivemente). Os principais propósitos para o comércio de bovinos foram engorda (43,5%), abate (31,5%) e reprodução (22,7%). Movimentos para abate presumivelmente oferecem um baixo risco para espalhamento de doença. Em contraste, movimentos para engorda e reprodução (66,2% de todos os movimentos) podem contribuir para o aumento do risco de espalhamento de doenças infecciosas.
Abstract in English:
The present study determined the frequency of Staphylococcus aureus virulence genes in 2,253 milk samples of cows (n=1000) and goats (n=1253) raised in three different geographical regions of the state Pernambuco, Brazil. The presence of genes of virulence factors associated to adhesion to host cells (fnbA, fnbB, clfA and clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla and hlb), and capsular polysaccharide (cap5 and cap8) was evaluated by PCR. A total of 123 and 27 S. aureus strains were isolated from cows’ and goats’ milk, respectively. The sec and tsst genes were detected exclusively in goats’ isolates, while the seh gene was only identified in cows’ isolates. The number of toxin genes per strain showed that goats’ isolates are likely more toxic than bovines’ isolates. The cap5 genotype predominated in both host species, especially in strains collected from cows raised in the Agreste region. The cap8 genotype is likely more virulent due to the number of virulence genes per strain. The results of the present study demonstrate that S. aureus may pose a potential threat to human health in Brazil, and, therefore, these results should support actions related to mastitis control programs.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo determinou a frequência de genes de virulência de Staphylococcus aureus em 2253 amostras de leite, sendo de vacas n=1000 e de cabras n=1253, procedentes das três regiões geográficas do estado de Pernambuco, Brasil. A presença de genes de fatores de virulência associados à adesão às células hospedeiras (fnbA, fnbB, clfA e clfB), toxinosis (sea, seb, sec, sed, seg, seh, sei, tsst, hla e hlb) e polissacarídeo capsular (cap5 e cap8) foram avaliadas por PCR. Um total de 123 e 27 cepas de S. aureus foram isoladas do leite de vacas e cabras, respectivamente. Os genes sec e tsst foram detectados exclusivamente em isolados de cabras, enquanto o gene seh foi identificado apenas em isolados de vaca. O número de genes de toxina por cepa mostrou que os isolados de cabras são potencialmente mais tóxicos do que os isolados obtidos de bovinos. O genótipo cap5 predominou em ambas as espécies hospedeiras, especialmente em cepas coletadas de vacas criadas na região Agreste. O genótipo cap8 é potencialmente mais virulento devido ao número de genes de virulência por isolado. Os resultados do presente estudo demonstram que S. aureus pode representar uma ameaça potencial para a saúde humana no Brasil e, portanto, estes resultados devem subsidiar ações relacionadas aos programas de controle de mastite.
Abstract in English:
The aim of the present study was to investigate the presence of Salmonella spp. in samples collected from beef meat at three points of the slaughter line (after skinning, washing and cooling) at three slaughterhouses in Brazil that export meat. Detection was based on ISO 6579:2002 and confirmed by PCR and qPCR. The isolates were typified using slide agglutination tests and PFGE. The antibiotic sensitivity profile was determined using the disk diffusion method. Contamination was detected in only one slaughterhouse. The overall frequency of contamination by Salmonella spp. was 6.7% of carcasses (6/90) and 2.6% of carcass surface samples (7/270). All isolates were confirmed by PCR and qPCR. The serological analysis and the PFGE showed a single profile: Typhimurium. The strains demonstrated 100% susceptibility to ampicillin, cefotaxime, ciprofloxacin, chloramphenicol, gentamicin and tetracycline. Positive carcasses after cooling pose a direct risk to consumers, since the meat is considered ready to be marketed after this process.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de Salmonella spp. em amostras coletadas de carcaças de bovinos, em três pontos da linha de abate (após a esfola, lavagem e refrigeração) de três frigoríficos exportadores no Brasil. A detecção foi realizada pela ISO 6579:2002, e confirmada por PCR e qPCR. Os isolados foram tipificados por testes de soroaglutinação e PFGE e avaliado o perfil de sensibilidade aos antibióticos pelo método de difusão em disco. A contaminação foi detectada em apenas um abatedouro‑frigorífico. As contaminações das carcaças (n=90) e amostras de carne (n=270) por Salmonella spp. foram 6 (6,7%) e 7 (2,6%), respectivamente. Todos os isolados foram confirmados por PCR e qPCR. A análise sorológica e o PFGE mostraram um único perfil: Typhimurium. As cepas apresentaram 100% de suscetibilidade à ampicilina, cefotaxima, ciprofloxacina, cloranfenicol, gentamicina e tetraciclina. As carcaças positivas após a refrigeração apresentam um risco direto para o consumidor, uma vez que, após este processo, a carne está pronta para ser comercializada.
Abstract in English:
Glycogen storage disease type II (GSD-II) and congenital myasthenic syndrome (CMS) are important autosomal recessive disorders in Brahman cattle. The objective of this study was to investigate the presence of mutations responsible for GSD II (E7, c.1057_1058delTA; and E13, c.1783C>T) and CMS (c.470del20) in purebred Brazilian Brahman cattle and in purebred Brahman bulls that were routinely used in breeding programs in Brazil. A total of 276 purebred Brahman cattle (167 females and 109 males, with ages ranging from 12-24 months) and 35 frozen semen samples taken from purebred Brahman bulls (22 bulls from the USA, 11 Brazilian bulls, one Argentine bull and one Australian bull) were used in this study. Genomic DNA was purified from hair root samples and from semen samples. Purified DNA was used in PCR genotyping to mutations c.1057_1058delTA (E7) and c.1783C>T (E13) in the GAA gene and c.470del20 in the CHRNE gene. The PCR products were purified and sequenced. The genotypic frequencies per polymorphism were estimated separately. Of the 276 Brahman cattle tested, 7.3% were identified as heterozygous for E7. All Brahman cattle studied were homozygous for the wild-type E13 allele. The E7 mutations was identified as heterozygous in 8.6% (3/35) of the commercial semen samples, whereas the E13 mutations was not identified. The c.470del20 mutation was identified as heterozygous in 0.73% of the hair root samples, but this mutation was not present in any semen sample assessed. No study had previously evaluated the prevalence of mutations responsible for GSD II or CMS in Brazilian Brahman cattle. In summary, the E7 and c.470del20 mutations are present in the Brazilian Brahman herd, and control measures should be adopted to prevent an increase in the incidence of GSD-II and CMS in Brahman cattle in Brazil.
Abstract in Portuguese:
A doença de armazenamento de glicogênio tipo II (DAG-II) e a síndrome miastênica congênita (SMC) são importantes doenças autossômicas recessivas no gado Brahman. O objetivo deste estudo foi investigar a presença das mutações responsáveis pela DAG-II (E7, c.1057_1058delTA; e E13, c.1783C>T) e pela SMC (c.470del20) em bovinos da raça Brahman e em touros Brahman que são rotineiramente utilizados em programas de reprodução no Brasil. Um total de 276 amostras de bulbo piloso de bovinos Brahman (167 fêmeas e 109 machos, com idade variando de 12 a 24 meses) e 35 amostras de sêmen congeladas de touros Brahman (22 touros americanos, 11 touros brasileiros, um touro argentino e um touro australiano) foram usados neste estudo. O DNA genômico foi purificado, das amostras de bulbo piloso e de sêmen, e utilizado na genotipagem por PCR das mutações c.1057_1058delTA (E7) e c.1783C>T (E13) no gene GAA e c.470del20 no gene CHRNE. Os produtos de PCR foram purificados e sequenciados. A frequência genotípica para cada polimorfismo foi estimada separadamente. Dos 276 Brahman testados, 7,3% foram identificados como heterozigotos para E7. Todos os Brahman foram homozigotos wild-type para o alelo E13. A mutação E7 foi identificada em homozigose em 8,6% (3/35) das amostras de sêmen comerciais, enquanto que a mutação E13 não foi identificada. A mutação c.470del20 foi identificada em heterozigose em 0,73% das amostras de bulbo piloso, mas esta mutação não estava presente nas amostras de sêmen avaliadas. Nenhum estudo prévio avaliou a prevalência das mutações responsáveis pela DAG-II ou SMC em bovinos Brahman brasileiro. Em suma, as mutações E7 e c.470del20 estão presentes no rebanho Brahman brasileiro, e medidas de controle devem ser adotadas para prevenir o aumento da incidência da DAG-II e SMC em bovinos da raça Brahman no Brasil.
Abstract in English:
This paper describes six cases of tuberculosis in the central nervous system (CNS) of cattle in the state of Paraíba in northeastern Brazil. We reviewed the autopsy reports of 851 bovine necropsies performed from 2003 to 2016. Seventy-three (8.6%) cattle were diagnosed with tuberculosis and six showed lesions in the CNS. Three cases affected cattle up to two-year-old and other three affected adults. Three cattle presented exclusively nervous signs, two had respiratory signs and weight loss and one did not present any clinical signs. At necropsy, five cattle had thickening of the leptomeninges of the cerebellum, pons, obex, spinal cord and cortex, mainly, in the region near the brain basilar Willis´ circle. Another animal, presented a single focal lesion in the cerebellum. Microscopically we observed moderate to severe granulomatous meningitis and encephalitis. Five cattle presented lesions in the lungs and mediastinal lymph nodes and three of them had disseminated lesions in other organs. In all cattle acid-fast bacilli were observed in the lesions and marked positive for immunohistochemistry with polyclonal antibody anti-Mycobacterium tuberculosis. It is concluded that bovine tuberculosis of central nervous system occurs sporadically in Paraíba, in cattle of different ages, most of them with disseminate lesions in other organs. The location of the lesions suggests that the agent invaded the brain by hematogenous route through the circle of Willis.
Abstract in Portuguese:
Descrevem-se seis casos de tuberculose no sistema nervoso central (SNC) em bovinos, no semiárido da Paraíba. Foram revisados os laudos de um total de 851 necropsias de bovinos realizadas no período de 2003 a 2016. Destes, 73 (8,6%) foram diagnosticados com tuberculose e seis apresentavam lesões no SNC. Três casos ocorreram em bovinos de até dois anos de idade e três em bovinos adultos. Três bovinos apresentaram exclusivamente sinais nervosos, dois tinham sinais respiratórios e perda de peso e um não apresentava nenhum sinal clínico. Macroscopicamente, em cinco bovinos, havia espessamento das leptomeninges do cerebelo, medula espinhal, ponte, obex, colículos e córtex, principalmente, na região basilar encefálica próxima ao polígono de Willis. Em apenas um bovino houve a presença de tubérculo único no cerebelo. Microscopicamente observou-se moderada a acentuada meningite e encefalite granulomatosa. Cinco bovinos apresentaram lesões pulmonares e nos gânglios mediastínicos e três deles tinham lesões disseminadas em outros órgãos. Em todos os bovinos foram encontrados bacilos ácido-álcool resistentes intralesionais e todos tiveram marcação positiva na técnica de imuno-histoquímica com anticorpo policlonal anti-Mycobacterium tuberculosis. Conclui‑se que a tuberculose do sistema nervoso central de bovinos ocorre de forma esporádica na Paraíba, principalmente em bovinos com lesões disseminadas em outros órgãos. Sugere-se que a disseminação do agente ocorre pela via hematógena, possivelmente através do polígono de Willis.