Resultado da pesquisa (166)
Termo utilizado na pesquisa plasma
#11 - In-vitro production and pre-validation of lyophilized canine platelet-rich plasma for therapeutic use
Abstract in English:
Platelet-rich plasma (PRP) has been considered a promising therapeutic alternative, since platelets are rich in growth factors that are used in the Regenerative Medicine field. However, fresh PRP cannot be stored for long periods. This study aimed to develop a protocol for obtaining lyophilized canine PRP capable of maintaining viability after its reconstitution. For that purpose, canine PRP extraction and lyophilization protocols were initially tested. Subsequently, assays were carried out to quantify the growth factors VEGF and TGF-β, before and after the lyophilization process, gelation test and the three-dimensional gel structure analysis of the reconstituted lyophilized PRP by electron microscopy, as well as in vitro cell proliferation test in lyophilized PRP gel. Additionally, the immunogenicity test was performed, using allogeneic samples of lyophilized PRP. The results showed that the lyophilized PRP had adequate therapeutic concentrations of growth factors VEGF and TGF-β (9.1pg/mL and 6161.6pg/mL, respectively). The reconstituted PRP gel after lyophilization showed an in vitro durability of 10 days. Its electron microscopy structure was similar to that of fresh PRP. In the cell proliferation test, an intense division process was verified in mesenchymal stem cells (MSCs) through the three-dimensional mesh structure of the lyophilized PRP gel. The immunogenicity test showed no evidence of an immune reaction. The findings were promising, suggesting the possibility of having a lyophilized canine PRP that can be marketed. New in vivo and in vitro studies must be carried out for therapeutic confirmation.
Abstract in Portuguese:
O plasma rico em plaquetas (PRP) é uma alternativa terapêutica promissora, pois as plaquetas são ricas em fatores de crescimento com ação na regeneração de tecidos. No entanto, o PRP fresco não pode ser armazenado por longos períodos. Esse trabalho teve como objetivo desenvolver um protocolo de obtenção de PRP liofilizado canino capaz de manter a viabilidade pós reconstituição. Portanto, foram testados diversos protocolos de extração e liofilização. Para validação do PRP canino liofilizado foi analisada a concentração dos fatores de crescimento VEGF e TGF-β antes e após o processo de liofilização, a estrutura tridimensional do PRP liofilizado reconstituído em forma de gel por microscopia eletrônica e seu efeito in vitro na proliferação de células-tronco mesenquimais. Os resultados demonstraram que o PRP liofilizado apresentou concentrações terapêuticas adequadas dos fatores de crescimento VEGF e TGF- β (9,1pg/ml e 6161,6pg/ml, respectivamente). O gel de PRP reconstituído após liofilização apresentou uma durabilidade in vitro de 10 dias, sua estrutura tridimensional mostrou-se semelhante ao PRP fresco e proporcionou intensa proliferação de células-tronco mesenquimais durante o cultivo. O teste de imunogenicidade não demonstrou evidências de reação imune. Os achados foram promissores, sugerindo a possibilidade de uso de PRP canino liofilizado para o mercado. Novos estudos in vivo e in vitro deverão ser conduzidos para comprovação terapêutica.
#12 - Sinonasal neoplasms in 49 dogs: clinical, macroscopic, and histopathological aspects
Abstract in English:
This study aimed to quantify nasosinusal neoplasms diagnosed in dogs in 20 years (2000-2019) and characterize the main clinical, macroscopic, and histological aspects of these neoplasms. The sex, breed, age, skull conformation, the main clinical signs, and the anatomopathological characteristics (distribution, macroscopy, and histology) were computed. During this period, 49 dogs were affected by neoplasms in these regions, totaling 50 neoplasms (one dog had two neoplasms of different locations and histogenetic origins). Similar amounts of mixed-breed dogs (25/49) and purebred dogs (24/49) were affected, these distributed in 16 breeds. Among purebreds, it was noted that dogs with mesocephalic cranial conformation (12/24) were the most affected, followed by dolichocephalic (10/24) and brachycephalic (2/24). There were 22 cases in males and 27 in females, making a proportion of 1:1.23. There was an age variation from 11 months to 16 years old. The epithelial neoplasms have occurred in older dogs compared to those of other histogenic origins (mesenchymal and other origins/round cells). The main clinical signs were similar between the histogenetic categories, related to the involvement of the upper respiratory tract, sometimes accompanied by nervous signs (when there was brain invasion of nasal neoplasms or vice versa). The possible origin site was mostly in the nasal cavity concerning the paranasal sinuses (and other locations). Invasions occurred in different tissues adjacent to the nasal cavity and paranasal sinuses, resulting in cranial and facial deformities (21/49). The frequency was 48% of epithelial neoplasms, 32% of mesenchymal neoplasms, and 10% of neoplasms with other origins and round cells. The neoplasms most frequently observed, in decreasing order of frequency, were: adenocarcinoma (9/50), squamous cell carcinoma (9/50), transmissible venereal tumor (5/50), osteosarcoma (5/50), chondrosarcoma (4/50), and undifferentiated sarcoma (4/50). Through this study, it was possible to establish the frequency of these neoplasms in 20 years and their clinical, macroscopic, and histological characteristics.
Abstract in Portuguese:
Este estudo teve como objetivo quantificar os neoplasmas nasossinusais diagnosticados em cães em 20 anos (2000-2019) e caracterizar os principais aspectos clínicos, macroscópicos e histológicos desses neoplasmas. Foram computados sexo, raça, idade, conformação do crânio, principais sinais clínicos e características anatomopatológicas (distribuição, macroscopia e histologia). Nesse período, 49 cães foram acometidos por neoplasmas nessas regiões, totalizando 50 neoplasmas (um cão tinha dois neoplasmas de localização e origens histogenéticas distintas). Foram acometidas quantidades semelhantes de cães sem raça definida (25/49) e de cães com raça definida (24/49), estes distribuídos em 16 raças. Entre os cães com raça definida, notou-se que os cães com conformação craniana mesocefálica (12/24) foram os mais acometidos, seguidos pelos dolicocefálicos (10/24) e braquicefálicos (2/24). Foram observados 22 casos em machos e 27 em fêmeas, perfazendo a relação de 1:1,23. Ocorreu uma variação de idade de 11 meses a 16 anos; tendo os neoplasmas epiteliais ocorrido em cães mais velhos quando comparado aos de outras origens histogênicas (mesenquimais e outras origens/células redondas). Os principais sinais clínicos foram semelhantes entre as categorias histogenéticas, sendo relacionados ao comprometimento do trato respiratório superior, por vezes acompanhados de sinais nervosos (quando houve invasão encefálica de neoplasmas nasais ou vice-versa). O possível local de origem em sua maioria foi na cavidade nasal em relação aos seios nasais (e de outras localizações). Ocorreram invasões para diferentes tecidos adjacentes à cavidade nasal e seios paranasais, tendo como consequência deformidades cranianas e faciais (21/49). A frequência foi de 48% de neoplasmas epiteliais, 32% de neoplasmas mesenquimais e 10% de neoplasmas com outras origens e de células redondas. Os neoplasmas mais frequentemente observados, em ordem decrescente de frequência, foram: adenocarcinoma (9/50), carcinoma de células escamosas (9/50), tumor venéreo transmissível (5/50), osteossarcoma (5/50), condrossarcoma (4/50) e sarcoma indiferenciado (4/50). Com isso, pode-se estabelecer a frequência desses neoplasmas em 20 anos, bem como suas características clínicas, macroscópicas e histológicas.
#13 - Testicular tumors in 190 dogs: clinical, macroscopic and histopathological aspects
Abstract in English:
This study aimed to characterize the prevalence and clinical, macroscopic and histopathological aspects of dogs affected by testicular tumors based on biopsy specimens from the Laboratório de Patologia Veterinária of the Universidade Federal de Santa Maria (LPV-UFSM) over 19 years. Parameters regarding the age, size, and breed of the affected dogs were also established. Of all dogs with some type of neoplasm submitted to histopathological analysis at the LPV over these 19 years (n=1,900), 213 (11.2%) had at least one testicular neoplasm. The tissues of 190 dogs (with 220 neoplasms) were available for histological reassessment. The dogs in this study had different types of testicular tumors with relatively similar frequencies. In descending order, the most frequent testicular neoplasms were seminomas (88/220), Leydig (interstitial) cell tumor (LCT; 64/220), Sertoli cell tumor (SCT; 61/220), and mixed germ cell-sex cord stromal tumor (MGSCT) (07/220). Among the dogs of defined breed (119 cases), large breeds had the largest number of cases (50/119), followed by small (47/119) and medium-sized (22/119) breeds. The ages of dogs affected by testicular tumors ranged from 10 months to 18 years. Increased testicular volume was the most common clinical manifestation. Eleven dogs presented information about clinical signs suggestive of testicular feminization syndrome. In seminomas, the diffuse pattern predominated over the intratubular pattern. Two sites (luminal and basal compartments) suggestive of the onset of neoplastic transformations in germ cells were observed in intratubular seminomas. They corroborate the hypothesis that canine seminomas possibly have pathogenesis similar to that observed in human spermatocytic seminomas. The SCTs and LCTs presented high cell morphology variation. SCTs had neoplastic cells organized in five different histological arrangements. As for LCT, solid-diffuse and cystic-vascular histological patterns were the most commonly observed. Through this study, it was possible to establish some of the leading clinical, macroscopic, and histopathological aspects of testicular neoplasms diagnosed over 19 years in the area covered by the LPV-UFSM.
Abstract in Portuguese:
Este estudo teve por objetivo caracterizar a prevalência, aspectos clínicos, macroscópicos e histopatológicos dos cães acometidos por neoplasmas testiculares, a partir dos espécimes de biópsias do Laboratório de Patologia Veterinária da Universidade Federal de Santa Maria (LPV-UFSM) em 19 anos. Parâmetros quanto à idade, porte, raça dos cães acometidos também foram estabelecidos. De todos os cães com algum tipo de neoplasma submetido à análise histopatológica no LPV nesses 19 anos (n=1.900), 213 (11,2%) tinham ao menos um neoplasma testicular. Os tecidos de 190 cães (com 220 neoplasmas) estavam disponíveis para reavaliação histológica. Os cães deste estudo apresentaram diferentes tipos de neoplasmas testiculares com frequências relativamente semelhantes. Em ordem decrescente, os neoplasmas testiculares mais frequentes foram: seminomas (88/220), leydigomas (64/220), sertoliomas (61/220) e o tumor misto de células germinativas e do estroma do cordão sexual (MGSCT; 07/220). Dentre os cães com raça definida (119 casos), as raças de grande porte tiveram o maior número de casos (50/119), seguido das raças de pequeno (47/119) e médio porte (22/119). As idades dos cães acometidos por neoplasmas testiculares variaram de 10 meses a 18 anos. Aumento de volume testicular foi a manifestação clínica mais comum. Onze cães tinham informações sobre sinais clínicos sugestivos da síndrome da feminilização. Nos seminomas, houve o predomínio do padrão difuso sobre o intratubular. Dois locais (compartimentos luminal e basal) sugestivos de início das transformações neoplásicas nas células germinativas foram observados nos seminomas intratubulares, corroborando com a hipótese de que os seminomas caninos possivelmente tem patogênese semelhante à observada nos seminomas espermatocíticos humanos. Sertoliomas e leydigomas foram neoplasmas com alta variação na morfologia celular. Os sertoliomas tinham células neoplásicas dispostas em cinco arranjos histológicos distintos. Quanto aos leydigomas, os padrões histológicos sólido-difuso e cístico-vascular foram os mais comumente observados. Através deste estudo foi possível estabelecer alguns dos principais aspectos clínicos, macroscópicos e histopatológicos dos neoplasmas testiculares diagnosticados em 19 anos na área de abrangência do LPV-UFSM.
#14 - Primary hepatic neoplasms in cattle
Abstract in English:
Primary hepatic neoplasms are mostly detected in cattle as incidental findings in slaughterhouses or diagnosed at the necropsy, wherein it may be related to the cause of death. A proper characterization of primary hepatic neoplasms is essential to provide an accurate diagnosis, especially at the slaughter lines, in order to reduce erroneous condemnations. This work aimed to characterize the gross, histological, and immunohistochemical features of primary liver neoplasms detected in slaughtered cattle in Southern Brazil. Nineteen primary hepatic neoplasms were identified. Grossly, these lesions were classified according to their distribution, as focal, multifocal, or diffuse. Histologically, the shape and arrangement of the cells, as well as possible malignant features were evaluated. Immunohistochemistry (IHC) was also performed for biliary epithelium (anti-CK7) and hepatocytes (anti-Hep Par-1) markers. Hepatocellular carcinoma (84.2%) was the most frequently detected hepatic neoplasm, followed by cholangiocarcinoma (15.8%), and these were only identified in adult cows. Hepatocellular carcinomas occurred as solitary masses or multifocal nodules, which on the cut surface were often green. Cholangiocarcinomas occurred as multifocal nodules, occasionally showing an umbilicated appearance. Histologically, hepatocellular carcinomas had mostly trabecular and solid patterns, while cholangiocarcinomas presented mostly a solid arrangement. Upon IHC, all hepatocellular carcinomas were immunolabeled for anti-Hep Par-1, ranging from mild (25%), moderate (31.2%) to marked (43.7%), while immunolabeling for anti-CK7 was detected only in one case of cholangiocarcinoma.
Abstract in Portuguese:
Os neoplasmas hepáticos primários são detectados em bovinos principalmente como achados incidentais em matadouros ou diagnosticados na necropsia, quando podem estar relacionados à causa da morte. A caracterização adequada dos tumores hepáticos primários é essencial para obter diagnósticos precisos, especialmente nas linhas de abate, com o propósito de reduzir condenações errôneas. Este trabalho teve o objetivo de determinar as características macroscópicas, histológicas e imuno-histoquímicas dos neoplasmas primários do fígado de bovinos abatidos em um matadouro-frigorífico no Sul do Brasil. Dezenove neoplasias hepáticas primárias foram identificadas. Macroscopicamente, os tumores hepáticos foram classificados de acordo com sua distribuição, como focais, multifocais ou difusos. Histologicamente, a forma e o arranjo das células e possíveis características malignas foram avaliados. Também foi realizada imuno-histoquímica (IHQ) para marcadores de epitélio biliar (anti-CK7) e hepatócitos (anti-Hep Par-1). O carcinoma hepatocelular (84,2%) foi o neoplasma hepático mais frequentemente detectado, seguido pelo colangiocarcinoma (15,8%). Esses tumores foram identificados apenas em vacas adultas. Os carcinomas hepatocelulares eram vistos como massas solitárias ou nódulos multifocais que na superfície de corte geralmente eram esverdeados. Os colangiocarcinomas foram observados como nódulos multifocais, ocasionalmente com aspecto umbilicado. Histologicamente, os padrões mais observados nos carcinomas hepatocelulares foram trabeculares e sólidos, enquanto nos colangiocarcinomas o arranjo sólido foi o mais frequente. Na IHQ, todos os carcinomas hepatocelulares foram marcados por anti-Hep Par-1, com marcação que variou de leve (25%), moderada (31,2%) a acentuada (43,7%); imunomarcação para anti-CK7 foi detectada em apenas um caso de colangiocarcinoma.
#15 - Evaluation of platelet-rich plasma gel as an angiogenesis-inducing agent in canine advancement skin flaps
Abstract in English:
This work aimed to evaluate the effect of platelet-rich plasma (PRP) on advancement skin flaps in dogs regarding improvement of vascularization, with focus on increasing its viable area, since there are reports that it is a potential angiogenesis stimulator. The experimental group was composed of eight adult bitches, in which two advancement skin flaps were made in the ventral abdominal region. No product was applied in the control flap (CF), while PRP was used in the contralateral flap, called treated flap (TF). The areas were clinically evaluated every two days until the 7th postoperative day regarding skin color and presence of necrosis. At 10 days, both flaps were removed and submitted to histological examination and blood vessel morphometry. The vessels counted in each group were statistically analyzed by the F-test at 1% probability. Results showed no significant difference in macroscopic changes in the wound, or CF and TF vascularization, thus suggesting that PRP gel did not improve advancement skin flap angiogenesis in bitches under the experimental conditions in which this research was developed.
Abstract in Portuguese:
Objetivou-se com o presente artigo avaliar a ação angiogênica do gel de plasma rico em plaquetas (PRP) em flapes cutâneos de avanço em animais da espécie canina, visando aumentar a viabilidade da pele após o procedimento, uma vez que existem relatos de que o produto é um potente estimulador da angiogênese. O grupo experimental foi composto por oito cadelas adultas, onde foram confeccionados dois flapes de avanço (de padrão subdérmico) na região abdominal ventral. Em um dos flapes, considerado controle (FC) não foi aplicado nenhum produto, enquanto que no flape contralateral, denominado tratado (FT), foi usado o gel de PRP. As áreas foram macroscopicamente avaliadas a cada dois dias até o 7º dia de pós-operatório em relação à coloração da pele e presença de área de necrose, e com 10 dias ambos os flapes foram coletados por biópsia e submetidos ao exame histológico e morfometria dos vasos sanguíneos. Os vasos contados em cada grupo foram estatisticamente analisados pelo teste de F ao nível de 1% de probabilidades. Os resultados demonstraram que não houve diferença significativa nas alterações macroscópicas das feridas e na morfometria vascular dos FC e FT, sugerindo dessa maneira que dentro das condições experimentais nas quais a pesquisa foi executada, que o gel de PRP não incrementou a angiogênese de flapes de avanço em cadelas.
#16 - Occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibody and evaluation of risk infection factors in goats raised in Sergipe state, Brazil
Abstract in English:
The objective was to determine, through indirect immunofluorescence reaction (RIFI, 1:64), the occurrence of IgG antibodies to Toxoplasma gondii and the risk factors associated with infection in goats in the state of Sergipe. To this study were used 675 samples of blood of animals from 41 farms of the three state mesoregions from 2013 to 2014. The occurrence of seropositive goats was 30.07%, with 90.24% of farms with seropositive animals. The distribution of titers obtained was 37.93%, 11.82%, 17.24%, 18.22%, and 17.77% for 64, 128, 512 and 1024 respectively. The risk factors observed were farms that did not have facilities (p=0.000, OR=2.30, CI 95%=1.41-3.74), with flooded soils (p=0.011, OR=2.94, CI 95%=1.27-6.79), which provided feed on the ground (p=0.032, OR=1.69, CI 95%=1.04-2.74), in uncovered cages (p=0.032, OR=1.69, CI 95%=1.04-2.74), pasture-based feed (p=0.003, OR=3.52, CI 95%=1.53-8.09), with access from cats to (p=0.031, OR=1.45, CI 95%=1.03-2.04) and introduced new breeders in the last five years (p=0.036, OR=1.58, CI 95%=1.02-2.74).
Abstract in Portuguese:
O objetivo desse estudo foi determinar, através da reação de imunofluorescência indireta (RIFI, 1:64), a ocorrência de anticorpos IgG para o Toxoplasma gondii e os fatores de risco associados à infecção em rebanhos caprinos do estado de Sergipe, a partir de 675 amostras de sangue de animais de 41 propriedades das três mesorregiões do estado entre os anos de 2013 e 2014. A ocorrência de caprinos soropositivos foi de 30,07% com 90,24% de propriedades com animais soropositivos. A distribuição dos títulos obtidos foi de 37,93%, 11,82%, 17,24%, 18,22% e 17,77% para 64, 128, 512 e 1024 respectivamente. Os fatores de riscos observados foram propriedades que não possuíam instalações (p=0,000, OR=2,30, IC 95%=1,41-3,74), com terrenos alagados (p=0,011, OR=2,94, IC 95%=1,27-6,79), que disponibilizam a ração no chão (p=0,032, OR=1,69, IC 95%=1,04-2,74), em cochos descobertos (p=0,000, OR=1,97, IC 95%=1,32-2,94), alimentação à base de pastagem (p=0,003, OR=3,52, IC 95%=1,53-8,09), com acesso de gatos à fonte de água (p=0,031, OR=1,45, IC 95%=1,03-2,04) e que introduziram novos reprodutores nos últimos cinco anos (p=0,036, OR=1,58, IC 95%=1,02-2,74).
#17 - Effect of pre-anesthetic fasting on gastric emptying and plasma glucose in healthy dogs of different age groups
Abstract in English:
Gastric emptying and plasma glucose were evaluated in young and adult dogs, fed with dry and wet food, submitted to different periods of pre-anesthetic fasting (6, 8, and 12 hours). Forty healthy dogs were selected, which were segmented into four groups according to the age group and type of diet. It was evaluated the gastric emptying by ultrasound and serum glycemia. Only 17.5% presented complete gastric emptying, and no significant differences were found between the 6 and 8-hour fasting evaluations, or between the age groups and the diets, considering significance level p<0.05. Mean plasma glucose values from the groups indicated normal glycemia at all times of evaluation. A significant difference was found between the means of glycemia in young and adult dogs, with the 8-hour fasting with wet diet (p=0.03) and with 12 hours with dry diet (p=0.04). Healthy young and adult dogs, in physiological equilibrium, maintain average values of plasma glucose despite prolonged periods of pre-anesthetic fasting, which may be necessary, since 8-hour fasting for solid food is not enough to provide complete gastric emptying.
Abstract in Portuguese:
Avaliou-se o esvaziamento gástrico e a glicemia plasmática em cães jovens e adultos, alimentados com ração seca e úmida, submetidos a diferentes períodos de jejum pré-anestésico (6, 8 e 12 horas). Foram selecionados 40 cães hígidos, os quais foram segmentados em 4 grupos de acordo com a faixa etária e o tipo de dieta administrada. Foi avaliado o esvaziamento gástrico por ultrassonografia e a glicemia sérica. Apenas 17,5% apresentaram completo esvaziamento gástrico, não sendo encontradas diferenças significativas entre as avaliações com 6 e 8 horas de jejum, ou entre as faixas etárias e dietas, considerando nível de significância p<0,05. Os valores médios da glicose plasmática dos grupos indicaram normoglicemia em todos os momentos de avaliação. Foi encontrada diferença significativa entre as médias da glicemia dos cães jovens e adultos, no período de 8 horas de jejum com dieta úmida (p=0,03) e com 12 horas nos animais com dieta seca (p=0,04). Conclui-se que cães hígidos jovens e adultos, em equilíbrio fisiológico, mantêm valores normais de glicemia plasmática apesar de períodos prolongados de jejum pré-anestésico, os quais podem ser necessários, tendo em vista que 8 horas de jejum alimentar de sólidos não é suficiente para proporcionar completo esvaziamento gástrico.
#18 - Hemoplasma infection in wild captive carnivores
Abstract in English:
Hemoplasmas are bacteria able to adhere themselves loosely to the plasma membrane of erythrocytes and may parasitize several species of mammals. There are three known species of hemoplasmas that parasitize domestic and wild cats: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. Dogs are infected by at least two species of hemoplasmas: ‘Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ and Mycoplasma haemocanis. The hemoplasmoses are very important in veterinary clinics, either because of its worldwide distribution and severity of clinical signs, depending on parasite species and host immune competence, or due to its zoonotic potential and capability of infecting endangered species. This study set out to investigate which hemoplasmas species parasitize different captive wild carnivores in order to clarify the epidemiology of hemoplasmoses in wild animals. Furthermore, the research intended to characterize the hematological changes caused by different species of hemotropic mycoplasmas infection in order to establish their clinical importance to wild species and the capacity of these species to become a reservoir of studied agents. Samples of 33 wild felids and 18 wild canids were investigated using polymerase chain reaction (PCR) to detect hemoplasmas DNA and it was observed that the occurrence of infection in these species is 45.5% and 83.3%, respectively. Factors such as age, gender or anaemia are not more frequent in animals positive for the infection. Therefore, it is concluded that infection caused by hemoplasmas in wild carnivores has high prevalence, and either agent pathogenicity is low, or chronic stage is more frequent, resulting in a low rate of diagnosis.
Abstract in Portuguese:
Hemoplasmas são bactérias capazes de aderir frouxamente à membrana plasmática de eritrócitos e que podem parasitar diversas espécies de mamíferos. São conhecidas três espécies de hemoplasmas que parasitam felídeos domésticos e selvagens: Mycoplasma haemofelis, ‘Candidatus Mycoplasma haemominutum’ and ‘Candidatus Mycoplasma turicensis’. Cães são infectados por ao menos duas espécies de hemoplasmas: Candidatus Mycoplasma haematoparvum’ and Mycoplasma haemocanis. As hemoplasmoses são de grande importância na clínica veterinária, tanto pela sua distribuição ubíqua e severidade dos sinais clínicos, a depender da espécie do parasita e imunocompetência do hospedeiro, quanto pelo seu potencial zoonótico e capacidade de infectar espécies ameaçadas. Este estudo visa investigar quais espécies de hemoplasmas parasitam diferentes carnívoros selvagens de cativeiro, a fim de esclarecer a epidemiologia das hemoplasmoses em animais selvagens. Além disso, o trabalho objetivou caracterizar as alterações hematológicas causadas pela infecção por diferentes espécies de micoplasmas hemotrópicos visando estabelecer sua importância clínica para espécies selvagens e a capacidade destas espécies de se tornar reservatórios dos agentes estudados. Amostras de 33 felídeos selvagens e de 18 canídeos selvagens foram investigadas por meio da reação em cadeia da polimerase (RCP) para detectar o DNA dos agentes e foi observado que a ocorrência da infecção por hemoplasmas nestas espécies é de 45,5% e 83,3%, respectivamente. Fatores como idade, sexo ou anemia não são mais frequentes em animais positivos para a infecção. Dessa forma, conclui-se que a infecção causada por hemoplasmas em carnívoros selvagens possui alta prevalência, no entanto ou a patogenicidade dos agentes é baixa ou o estágio crônico da infecção é mais frequente, resultando em uma baixa frequência diagnóstica.
#19 - Investigation of Mycoplasma spp. in birds of the Rio de Janeiro Zoo by isolation and PCR
Abstract in English:
Brazil is one of the countries with the most abundant avifauna in the world. The confinement of birds associated with close contact with other animals and humans favor the spread of agents of respiratory diseases. Among them, mycoplasmas can cause asymptomatic or apparent disease that manifests in birds by coughing, sneezing, rales, conjunctivitis, ocular and nasal discharge. Several described mycoplasmas cause disease in birds, especially Mycoplasma gallisepticum (MG) and Mycoplasma synoviae (MS). The diagnosis of Mycoplasma spp. can be done by clinical observation and laboratory analysis. Molecular diagnosis by PCR was boosted by its speed, sensitivity, and low cost of agent isolation techniques that take up to 21 days to complete. This study aimed to verify the occurrence of Mycoplasma spp. in birds of the Rio de Janeiro Zoo (Rio Zoo), by isolation and PCR. Of the total 635 birds from the Rio Zoo, 81 were studied for detection of Mycoplasma spp., when taken for routine health assessment exams. These birds belonged to the following orders: Psittaciformes (45), Accipitriformes (18), Galliformes (7), Piciformes (5), Strigiformes (4), Falconiformes (1) and Cariamiformes (1), all individuals already identified by microchip or leg-ring. There was no isolation of mycoplasmas in any of the samples tested, whereas, in the PCR, 62.96% (51/81) were positive, with 1.96% (1/51) identified as MG and 19.61% (10/51) as MS, representing 1.23% (1/81) and 12.34% (10/81) of the total population studied. PCR was shown to be a more effective technique than isolation in the detection of Mycoplasma spp. in birds. It was possible to detect mycoplasmas in birds from Riozoo with no clinical respiratory signs, with higher MS prevalence than MG. The positivities for Mycoplasma spp., MS, and MG were different among the orders studied, being the highest occurrence in birds of prey, followed by Galliformes and Piciformes. The presence of MG and MS in birds of Rio de Janeiro Zoo confirms the circulation of these agents and the need for further studies on the dissemination of mycoplasmas in zoos for the epidemiological analysis of these bacteria in these places.
Abstract in Portuguese:
O Brasil é um dos países com maior avifauna do mundo. O confinamento de aves associado ao contato próximo a outros animais e seres humanos favorece a disseminação de agentes etiológicos causadores de doenças respiratórias. Dentre eles, os micoplasmas podem causar doença assintomática ou aparente que se manifesta em aves por espirros, estertores, conjuntivite, corrimentos oculares e nasais. São diversos os micoplasmas descritos causadores de doença em aves, com destaque para Mycoplasma gallisepticum (MG) e Mycoplasma synoviae (MS). O diagnóstico de Mycoplasma spp. pode ser feito pela observação clínica e análises laboratoriais. O diagnóstico molecular pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) ganhou impulso por sua rapidez, sensibilidade e baixo custo em relação às técnicas de isolamento do agente que levam até 21 dias para conclusão do gênero Mycoplasma. Objetivou-se verificar a ocorrência da infecção por Mycoplasma spp. em aves no Zoológico do Rio de Janeiro (Rio Zoo), por isolamento e PCR. Do plantel de 635 aves do Rio Zoo, foram estudadas 81 para detecção de Mycoplasma spp., quando contidas para exames rotineiros de avaliação da condição de saúde. Essas aves eram pertencentes às ordens Psittaciformes (45), Accipitriformes (18), Galliformes (7), Piciformes (5), Strigiformes (4), Falconiformes (1) e Cariamiformes (1), todas já identificadas por microchip ou por anilha. Não houve isolamento de micoplasmas em nenhuma das amostras testadas, enquanto na PCR, 62,96% (51/81) foram positivas, sendo 1,96% (1/51) identificadas como MG e 19,61% (10/51) como MS, representando 1,23% (1/81) e 12,34% (10/81) da população total estudada. A PCR demonstrou ser uma técnica mais efetiva que o isolamento na detecção de Mycoplasma spp. em aves. Foi possível detectar micoplasmas nas aves do Riozoo sem sinal clínico respiratório, tendo MS maior prevalência do que MG. As positividades para Mycoplasma spp., MG e MS foram diferentes entre as ordens de aves estudadas, sendo a maior ocorrência nas aves de rapina, seguida dos Galliformes e dos Piciformes. A presença de MG e MS nas aves do Rio de Janeiro Zoo confirma a circulação destes agentes e a necessidade de mais estudos sobre a disseminação de micoplasmas em zoológicos para análise epidemiológica dessas bactérias nesse local.
#20 - Microbiological and molecular detection of Mycoplasma bovis in milk samples from bovine clinical mastitis
Abstract in English:
The genus Mycoplasma includes more than 200 bacterial species that cause disease in animals. It is responsible for causing mastitis in bovines and may be related to other manifestations, such as arthritis and pneumonia in calves and heifers. The present study aimed to detect Mycoplasma bovis isolated from milk samples of bovine clinical mastitis, and to compare the isolation rates in two culture media: Hayflick and SP4. An initial screening was performed in order to detect the presence of the class Mollicutes in 1166 milk samples from clinical mastitis by the conventional Polymerase Chain Reaction (PCR) technique. According to the 1166 milk samples evaluated, 8.6% (100/1166) were positive to class Mollicutes. Regarding molecular analyses, 1.1% (13/1166) of conventional PCR for positive M. bovis was obtained and 0.9% (11/1166) in real-time PCR. The results of the microbiological culture of the 100 samples previously screened demonstrated that 6% (6/100) of colony growth have been developed when using the Hayflick medium, and 11% (11/100) when using the SP4 medium (including the positive on Hayflick medium). Concerning the 11 isolates obtained in the microbiological culture, conventional PCR confirmed M. bovis in nine of them, and two cultures were negative. In the phylogenetic analysis of the isolates, all of them were grouped in M. bovis and M. agalactiae clusters. The results confirmed the importance of the presence of M. bovis in the etiology of bovine clinical mastitis and reinforced the need for further studies to elucidate other Mycoplasma species that may be involved in bovine clinical mastitis in Brazil.
Abstract in Portuguese:
O gênero Mycoplasma inclui mais de 200 espécies que causam doenças nos animais. É responsável por quadros de mastite em bovinos, podendo também estar relacionado à outras manifestações como artrite e pneumonia em bezerros e novilhas. O presente estudo objetivou a detecção de Mycoplasma bovis isolados a partir de amostras de leite de mastite clínica bovina, bem como, a comparação da taxa de isolamento em dois meios de cultura: Hayflick e SP4. Para efeito de triagem amostral, foram avaliadas quanto à presença da classe Mollicutes 1166 amostras de leite de casos de mastite clínica pela técnica de PCR convencional. Das 1166 amostras de leite avaliadas, 8,6% (100/1166) foram positivas à classe. Nas análises moleculares, obteve-se 1,1% (13/1166) de positividade para Mycoplasma bovis na PCR convencional e 0,9% (11/1166) na PCR em tempo real. Os resultados do cultivo microbiológico das 100 amostras triadas previamente demonstraram 6% (6/100) de crescimento de colônias ao se utilizar o meio Hayflick e 11% (11/100) ao se utilizar o meio SP4 (incluindo as positivas ao primeiro). A partir dos 11 isolados obtidos no cultivo microbiológico, a PCR convencional confirmou Mycoplasma bovis em nove deles, e dois foram negativos para o agente. Na análise filogenética dos isolados, todos agruparam no cluster Mycoplasma bovis e Mycoplasma agalactiae. Frente aos resultados, ressalta-se a importância da presença de Mycoplasma bovis na etiologia da mastite clínica bovina e reforça a necessidade de estudos mais aprofundados para a elucidação de outras espécies de micoplasmas que possam estar envolvidas na mastite bovina.
