Abstract in English:
Inclusion body disease (IBD) is a global viral infectious disease that affects snakes, mainly from the Boidae and Pythonidae families. The appearance of secondary infections is common in cases of IBD. The aim of this study was to report a case of inclusion body disease (IBD) associated with secondary infection in the respiratory system by Salmonella spp. in a captive Boa constrictor in the state of Ceará, northeastern Brazil. A male captive snake from a private captivity was sent for necropsy after presenting apathy and anorexia. It was sent for necropsy to the “Laboratório de Anatomia e Fisiologia Animal” at the “Universidade Federal do Cariri.” Macroscopically, there was a discrete focal brownish catarrhal content in the tracheal lumen. The lungs, especially the right one, were reddish, with multifocal to coalescing yellowish areas. On the cut surface, these areas extended to the lung parenchyma. They were soft, yellow and had a pasty texture. A brownish catarrhal exudate was also observed in the lung cavity. Microbiological examination of the tracheal swab and lungs resulted in the isolation of Salmonella spp. as well as Achromobacter denitrificans in the trachea. Fragments from all organs were collected, fixed in 10% buffered formalin solution and routinely processed to make histological slides stained with hematoxylin and eosin (HE). Microscopically, there was lymphoplasmacytic and heterophilic tracheitis, with hyperplasia of the mucosal epithelium associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies. In the lungs, there was granulomatous pneumonia. The faveolar epithelium showed degeneration and necrosis associated with intracytoplasmic eosinophilic inclusion bodies. In the intestine, there was necrotic enteritis. In the liver there was random necrotic hepatitis. In the kidneys, there was degeneration and necrosis of the tubular epithelium and interstitial nephritis. Round to oval, intracellular eosinophilic to amphophilic inclusion bodies were also seen in the pancreas, liver, bile ducts, kidneys, and brain. Paraffin blocks of lung and intestine fragments were sent to the Veterinary Pathology Department at “Universidade Federal do Rio Grande do Sul” for immunohistochemistry with anti-Salmonella antibody, with positive immunostaining. The findings of inclusion bodies were consistent with infection by a virus of the genus Reptarenavirus. This appears to be the first reported case of IBD in a Boa constrictor from a private zoo in the state of Ceará, northeastern Brazil. In the present report, the disease was associated with secondary infection in the respiratory system by Salmonella sp. Additionally, this seems to be the first report of isolation of A. denitrificans from the microbiome of a respiratory sample in a snake in Brazil. Although Salmonella spp. infections are common in snakes, the isolation of A. denitrificans requires further studies on infection routes, pathogenicity and antimicrobial sensitivity.
Abstract in Portuguese:
A doença do corpúsculo de inclusão (“Inclusion Body Disease” – IBD) é uma doença infecciosa viral e de caráter global que acomete serpentes, principalmente das famílias Boidae e Pythonidae. O surgimento de infecções secundárias é comum em casos de IBD. Objetivou-se com este trabalho, relatar um caso da doença de corpúsculos de inclusão (IBD) associada a infecção secundária do sistema respiratório por Salmonella spp. em uma jiboia (Boa constrictor) de cativeiro, no estado do Ceará, nordeste do Brasil. Uma serpente, macho, proveniente de cativeiro particular foi encontrada morta em seu recinto após apresentar apatia e anorexia, e encaminhada para necropsia no Laboratório de Anatomia e Fisiologia Animal na Universidade Federal do Cariri. Macroscopicamente, no lúmen da traqueia havia conteúdo catarral acastanhado focal discreto. Os pulmões, principalmente o direito, estava avermelhado, com áreas multifocais a coalescentes amareladas. Ao corte, estendiam-se ao parênquima pulmonar, eram macias, amarelas e de consistência pastosa e na cavidade pulmonar havia exsudato catarral acastanhado. O exame microbiológico foi feito a partir de swab traqueal e pulmão resultou em isolamento de Salmonella spp., além de Achromobacter denitrificans em traqueia. Foram colhidos fragmentos de todos os órgãos, fixados em solução de formalina tamponada a 10% e, em seguida, processados rotineiramente para fazer confecção de lâminas histológicas coradas com hematoxilina e eosina (HE). Microscopicamente, havia traqueíte linfoplasmocitária e heterofílica com hiperplasia do epitélio da mucosa associada a corpúsculos de inclusão intracitoplasmáticos. No pulmão, havia pneumonia granulomatosa. No epitélio faveolar foi visto degeneração e necrose associada a corpúsculos de inclusão eosinofílicos intracitoplasmáticos. No intestino havia enterite necrótica. No fígado havia hepatite necrótica, aleatória. Nos rins, havia degeneração, necrose do epitélio tubular e nefrite intersticial linfoplasmocitária. Corpúsculos de inclusão eosinofílicos a anfofílicos, redondos a ovais, intracitoplasmáticos foram vistos ainda em pâncreas, fígado, ductos biliares, rins e encéfalo. Blocos de parafina de fragmentos de pulmão e intestino foram encaminhados ao Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul para realização de imuno-histoquímica com anticorpo anti-Salmonella, com imunomarcação positiva. Os achados de corpúsculos de inclusões foram compatíveis com infecção por vírus do gênero Reptarenavirus. Este parece ser o primeiro relato de caso de doença do corpúsculo de inclusão em uma jiboia de um zoológico particular no estado do Ceará, Nordeste do Brasil. No presente relato, a doença foi associada à infecção secundária no sistema respiratório por Salmonella sp. Além disso, este parece ser o primeiro relato de isolamento de A. denitrificans do microbioma de uma amostra respiratória em uma serpente no Brasil. Embora infecções por Salmonella spp. sejam comuns em serpentes, o isolamento de A. denitrificans requer mais estudos sobre as vias de infecção, patogenicidade e sensibilidade antimicrobiana.
Abstract in English:
Salivary gland neoplasms are infrequently documented in veterinary medicine and rare in non-human primates; therefore, they are scarce in the literature. Adenocarcinomas are malignant neoplasms that originate in the glandular epithelium and can affect various species. Our study presents detailed cytological, histological, and immunohistochemical findings of a salivary gland adenocarcinoma in a capuchin monkey (Sapajus nigritus). In the necropsy, a multilobulated mass was observed in the left submandibular region, characterized by a dark red surface, soft and firm upon cut surface. Histologically, a neoplastic proliferation of malignant epithelial cells was identified in the submandibular region and the lungs. The cells showed acinar formation, areas of architectural tissue differentiation loss, and solid aggregates. Immunohistochemistry was conducted to corroborate and elucidate the case. In the neoplasia, there was positive immunolabelling for pan-cytokeratin (Pan CK) and cytokeratin 7 (CK7), and negative labeling for thyroglobulin, thyroid transcription factor-1 (TTF-1), cytokeratin 20 (CK20), and Napsin A. The cytological, anatomopathological, and immunohistochemical findings lead to the diagnosis of salivary gland adenocarcinoma. Remarkably, this report seems to be the inaugural documentation of this neoplasm in a capuchin monkey (Sapajus nigritus).
Abstract in Portuguese:
Neoplasias de glândula salivar são pouco documentadas na medicina veterinária e raras em primatas não-humanos, portanto são escassos na literatura. Adenocarcinomas são neoplasias malignas que se originam do epitélio glandular e podem afetar várias espécies. Nosso estudo apresenta achados citológicos, histológicos e imuno-histoquímicos de um adenocarcinoma de glândula salivar em macaco-prego (Sapajus nigritus). Na necropsia, foi observada uma massa multilobulada na região submandibular esquerda, caracterizada por uma superfície vermelha escura e macia a firme ao corte. Histologicamente, uma proliferação neoplásica de células epiteliais malignas foi identificada na região submandibular e nos pulmões. As células apresentaram formação acinar, áreas com perda de diferenciação tecidual e agregados sólidos. Foi realizado imuno-histoquímica para corroborar e elucidar o caso. Houve imunomarcação positiva para citoqueratina (Pan CK) e citoqueratina 7 (CK7), e marcação negativa para tireoglobulina, fator de transcrição de tireoide-1 (TTF-1), citoqueratina 20 (CK20) e Napsin A. Os achados citológicos, anatomopatológicos e imuno-histoquímicos levam ao diagnóstico de adenocarcinoma de glândula salivar. Este relato apresenta um caso que parece ser inédito desta neoplasia em um macaco-prego (Sapajus nigritus).
Abstract in English:
Histiocytic sarcomas have been described in veterinary medicine since 1980, but studies on the subject are still scarce. Based on this, the objective of this article is to describe the epidemiological, anatomopathological and immunohistochemical aspects of histiocytic sarcoma in dogs submitted to necropsy in a diagnostic service covering the midwestern region of Rio Grande do Sul State, Brazil. From 2007 to 2021, 4,310 dogs were necropsied, of which 598 died or were euthanized due to some type of cancer. At least 18 cases of histiocytic sarcoma were diagnosed, i.e., 3% of cancer deaths and 0.4% of total deaths. The criterion used to establish the definitive diagnosis and inclusion in the study was an interaction between characteristic histopathology and positive immunostaining for CD204. Almost all (17/18, 94.4%) of these patients were of a defined breed and were large, with the vast majority (14/18, 77.8%) being Rottweiler. There was a predominance of disseminated histiocytic sarcoma (15/18, 83.3%) affecting several organs, while 10 (66.7%) affecting the lungs, liver, spleen and lymph nodes were affected concomitantly. Of the few cases (3/18, 16.7%) diagnosed as localized histiocytic sarcoma, where lungs were affected. Five different presentation patterns were observed macroscopically, not mutually exclusive: multinodular, massive, diffuse, peribronchiolar, and placoid. The most affected organs were the lungs (17/18, 94.4%), lymph nodes (15/18, 83.3%), liver (13/18, 72.2%), spleen (12/18, 66.7%), kidneys (6/15, 60%) and heart (6/15, 40%). Other less affected organs included adrenals (4/15, 26.7%), skeletal muscle (diaphragm) (4/15, 26.7%), bones (2/15, 13.3%), pancreas (2/15, 13.3%), pericardial sac (2/15, 13.3%), joint (1/15, 6.7%), omentum (1/15, 6.7%) and parietal pleura (1/15, 6.7%). Histologically, histiocytic sarcoma was characterized by a non-delimited, mantle-shaped proliferation with a scant stroma of round cells, many markedly anaplastic, often giving the tumor a rather pleomorphic appearance. A hallmark was the occurrence of a variable, but often high, number of mono, bi and multinucleated giant cells (30-100 µm in diameter), which always had large nuclei (karyomegaly) formed by loose chromatin and with nucleoli almost always multiple and conspicuous. Although there are peculiarities in the neoplastic involvement in each affected organ, in general, this proliferation tends to obscure the affected parenchyma and often invades and obliterates lymphatic and blood vessels. About 90% of neoplastic cells, including the most anaplastic and many of the multinucleated ones, immunostained strongly for CD204 and MHC-II but not for CD11d, confirming that they were histiocytes, other than splenic/bone marrow macrophages. It is hoped that this information will contribute to a better characterization of histiocytic sarcoma in the canine species and may help veterinary pathologists in their diagnostic routines.
Abstract in Portuguese:
Os sarcomas histiocíticos têm sido descritos na medicina veterinária desde meados de 1980, mas os estudos sobre o tema ainda são escassos. Com base nisso, o objetivo deste artigo foi determinar os aspectos epidemiológicos, anatomopatológicos e imuno-histoquímicos do sarcoma histiocítico em cães submetidos à necropsia em um serviço de diagnóstico que abrange a região centro-oeste do Rio Grande do Sul, Brasil. Entre os anos de 2007 e 2021 foram necropsiados 4.310 cães, dos quais 598 morreram ou foram submetidos à eutanásia devido a algum tipo de câncer. Pelo menos 18 casos de sarcoma histiocítico foram diagnosticados, ou seja, 3% das mortes por câncer e 0,4% das mortes totais. O critério utilizado para estabelecer o diagnóstico definitivo e inclusão no estudo foi uma interação entre a histopatologia característica e a imunomarcação positiva para CD204. Quase a totalidade (17/18; 94,4%) desses pacientes tinha raça definida e era de porte grande, sendo a grande maioria (14/18; 77,8%) da raça Rottweiler. A maior parte dos casos (15/18; 83,3%) eram sarcomas histiocíticos disseminados, sendo que em 10 (66,7%), os pulmões, o fígado, o baço e os linfonodos foram acometidos concomitantemente. Dos poucos casos (3/18; 16,7%) diagnosticados como sarcoma histiocítico localizado, os pulmões foram sempre afetados. Macroscopicamente foram observados cinco padrões de apresentação, não mutualmente excludentes, a saber: multinodular, massivo, difuso, peribronquiolar e placoide. Os órgãos mais afetados foram: pulmões (17/18; 94,4%), linfonodos (15/18; 83,3%), fígado (13/18; 72,2%), baço (12/18; 66,7%), rins (6/15; 60%) e coração (6/15; 40%). Outros órgãos menos afetados incluíram: adrenais (4/15; 26,7%), músculo esquelético (diafragma) (4/15; 26,7%), ossos (2/15; 13,3%), pâncreas (2/15; 13,3%), saco pericárdico (2/15; 13,3%), articulação (1/15; 6,7%), omento (1/15; 6,7%) e pleura parietal (1/15; 6,7%). Histologicamente, o diagnóstico do sarcoma histiocítico sempre foi suspeitado pela presença de um tumor de células redondas ou fusiformes, marcadamente anaplásico e pleomórfico, rico em células gigantes mononucleadas e frequentemente associado à presença de variável quantidade de células gigantes (com 30-100 µm de diâmetro) mono, bi e multinucleadas, as quais sempre possuíam grandes núcleos (cariomegalia) formados por cromatina frouxa e com nucléolos quase sempre múltiplos e conspícuos. Apesar de em cada órgão afetado haver peculiaridades no acometimento neoplásico, no geral essa proliferação tendia a obscurecer o parênquima afetado e frequentemente invadir e obliterar vasos linfáticos e sanguíneos. A maior parte das células neoplásicas (cerca de 90%), incluindo as mais anaplásicas e muitas das multinucleadas, imunomarcaram fortemente para CD204 e MHC-II, mas não para CD11d, confirmando tratar-se de histiócitos outros que não macrófagos esplênicos/medulares ósseos. Espera-se que essas informações contribuam para uma melhor caracterização do sarcoma histiocítico na espécie canina e que possam auxiliar patologistas veterinários em suas rotinas diagnósticas.
Abstract in English:
Apocrine adenocarcinoma is a malignant tumor arising from the apocrine gland. It’s well-reported in dogs, uncommon in cats, and rarely described in other species. A 4-year-old female domestic rabbit with lameness in the left pelvic limb, which progressed to loss of function over seven months, was treated in a medical routine. Upon palpation of the affected region, the rabbit presented alertness without exhibiting painful sensitivity. Radiographic imaging revealed pronounced alterations in the bone trabeculae of the left femur, accompanied by areas of corticomedullary osteolysis. A biopsy from the left femur was performed for histopathological and immunohistochemical analysis. The morphological diagnosis comprises apocrine adenocarcinoma. This report aims to present what seems to be the first worldwide case of apocrine adenocarcinoma invading muscle tissue and causing bone lysis in the joint region in an Oryctolagus cuniculus.
Abstract in Portuguese:
O adenocarcinoma apócrino é um tumor maligno que surge da glândula apócrina. Este é bem relatado em cães, incomum em gatos e raramente descrito em outras espécies. Uma coelha doméstica, fêmea, de quatro anos de idade, com claudicação em membro pélvico esquerdo, que evoluiu para impotência funcional em sete meses, foi tratada em rotina médica. Esta apresentou estado de alerta sem sensibilidade dolorosa à palpação da região afetada. A imagem radiográfica revelou alterações pronunciadas em trabéculas ósseas do fêmur esquerdo, acompanhadas de áreas de osteólise corticomedular. Foi realizada biópsia do fêmur esquerdo para análise histopatológica e imunohistoquímica. O diagnóstico morfológico compreende o que parece ser o primeiro caso mundial de adenocarcinoma apócrino invadindo o tecido muscular e causando lise óssea em região articular de um Oryctolagus cuniculus.
Abstract in English:
Retrospective studies that address the diseases in the feline species are scarce. Herein, we presented the cause of death or euthanasia of cats from January 2020 to December 2021, during the first and second years of the SARS-CoV-2 pandemic. The data were obtained from necropsies performed by the Federal Rural University of Rio de Janeiro and the Federal University of Mato Grosso. A total of 96 feline necropsies were performed. In 87 cases (90.6%), we established the reason for death, while in nine cases (9.4%), the diagnoses were inconclusive. We established the diagnostic groups: infectious and parasitic (37.5%), neoplasm (14.5%), malformation (7.3%), lower urinary tract disease (7.3%), degenerative (6.2%), traumas (6.2%), other causes (8.4%) and iatrogenic (3.1%). The most common cat diseases in Mato Grosso and Rio de Janeiro were infectious. The most common inflammatory lesions were bacterial and viral pneumonia. Alphaherpesvirus (FeHV), Mycoplasma sp., and Pseudomonas sp. were the main detected agents.
Abstract in Portuguese:
Estudos retrospectivos que abordam doenças em felinos domésticos são escassos. Apresentamos aqui a causa da morte ou razões para eutanásia de gatos domésticos entre janeiro de 2020 e dezembro de 2021, durante o primeiro e segundo ano da pandemia de SARS-CoV-2. Os dados foram obtidos em necropsias realizadas pela Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro e Universidade Federal de Mato Grosso. Foram realizadas 96 necropsias de felinos. Em 87 casos (90,6%) foi estabelecido a causa da morte e em nove casos (9,4%) os diagnósticos foram inconclusivos. Estabelecemos os grupos diagnósticos: infecciosos e parasitários (37,5%), neoplasias (14,5%), malformações (7,3%), doenças do trato urinário inferior (7,3%), degenerativas (6,2%), traumas (6,2%), outras causas (8,4%) e iatrogênicas (3,1%). As doenças mais frequentes em gatos do Mato Grosso e Rio de Janeiro foram as infecciosas. As lesões inflamatórias mais frequentes foram as pneumonias bacterianas e virais. Os principais agentes detectados foram Alphaherpesvirus (FeHV), Mycoplasma sp. e Pseudomonas sp.
Abstract in English:
There are reports of septicemic salmonellosis in exotic birds caused by Salmonella enterica serotype Typhimurium, although they are scarce and do not address the anatomopathological and immunohistochemical aspects of this condition in blue-fronted Amazon parrots (Amazona aestiva). This study aims to report an outbreak of salmonellosis by S. Typhimurium in 15 blue-fronted parrots introduced to a rehabilitation center in the state of Mato Grosso do Sul, Brazil. Hepatomegaly and splenomegaly, accompanied by flat white areas in the capsule and parenchyma, were the most frequent gross changes, histologically represented by necrotic and heterophilic hepatitis and splenitis and associated with bacteria in the cytoplasm of macrophages and free in the affected tissue. S. Typhimurium was identified from bacterial culture, PCR, and DNA sequencing. Along with immunohistochemistry samples of liver, spleen, kidney, small intestine, pancreas, thyroid, heart, and lung, immunostaining was used for Salmonella spp. without previous bacterial isolation. The lethality of this outbreak demonstrates the relevance of salmonellosis in blue-fronted parrots, which are known to be carriers of this bacteria.
Abstract in Portuguese:
Apesar de existirem relatos sobre salmonelose septicêmica em aves silvestres por Salmonella enterica sorovar Typhimurium, eles são escassos e não abordam os aspectos anatomopatológicos e imuno-histoquímicos da condição em papagaios-verdadeiros (Amazona aestiva). Este trabalho visou relatar um surto de salmonelose por S. Typhimurium em 15 papagaios-verdadeiros introduzidos em um centro de reabilitação localizado no estado de Mato Grosso do Sul, Brasil. Hepatomegalia e esplenomegalia acompanhadas por áreas planas brancacentas na cápsula e no parênquima foram as alterações macroscópicas mais frequentes, representadas histologicamente por hepatite e esplenite necróticas e heterofílicas associadas a bactérias no citoplasma de macrófagos e livres no tecido afetado. S. Typhimurium foi identificada a partir de cultura bacteriana, PCR e sequenciamento de DNA. Na imuno-histoquímica, as amostras de fígado, baço, rim, intestino delgado, pâncreas, tireoide, coração e pulmão evidenciaram imunomarcação para Salmonella spp., mesmo quando não houve isolamento bacteriano prévio. A alta letalidade deste surto demonstra relevância da salmonelose em papagaios-verdadeiros, que são majoritariamente atribuídos como hospedeiros carreadores desta bactéria.
Abstract in English:
Palicourea marcgravii is a lethal toxic plant widely distributed in Brazil. Ingestion of this plant causes cardiotoxic effects in animals, leading to acute heart failure without evident macroscopic changes in the heart due to the rapid progression of the disease. Currently, the diagnosis is confirmed based on microscopic identification of characteristic renal lesions. Although troponin is used as a biomarker for myocardial lesions in human and veterinary medicine, its serum levels in sheep poisoned with P. marcgravii remain unknown. The objective of this study was to determine serum levels of troponin I and evaluate its expression in incipient heart lesions in sheep. Eight male sheep were experimentally intoxicated with 1g kg-1 of fresh P. marcgravii plants. The animals were physically examined every two hours, and blood samples were collected before the administration of the plant material and during the agonizing period immediately before death. Additionally, necropsy and immunohistochemistry were performed on cardiac tissue samples. All animals presented minimal serum levels of troponin I before plant administration, with a significant increase in these levels immediately before death, indicating leakage due to the cardiac injury. These results confirm the hypothesis that troponin is released into the bloodstream before morphological changes in the myocardium can be observed through conventional microscopy and immunohistochemical testing. These findings contribute to understanding the pathological mechanisms of this toxicity and may assist in the early diagnosis and treatment of affected animals.
Abstract in Portuguese:
Palicourea marcgravii é uma planta tóxica letal e amplamente disseminada no Brasil. Sua ingestão causa efeitos cardiotóxicos em animais, levando à insuficiência cardíaca aguda sem alterações macroscópicas evidentes no coração devido à rápida progressão da doença. A confirmação do diagnóstico atual se baseia na identificação microscópica das lesões renais características. Embora a troponina seja usada como biomarcador de lesões miocárdicas na medicina humana e veterinária, seus níveis séricos em ovinos intoxicados por P. marcgravii ainda são desconhecidos. O objetivo deste estudo foi determinar os níveis séricos de troponina I e avaliar sua expressão em lesões incipientes no coração de ovinos. Oito ovinos machos foram experimentalmente intoxicados com 1g/kg da planta fresca. Os animais foram avaliados fisicamente a cada duas horas, e tiveram seu sangue coletado antes da administração da planta e durante a fase agônica, antes do óbito. Além disso, foram realizadas necropsia e imunohistoquímica em fragmentos cardíacos. Todos os animais apresentaram níveis mínimos de troponina antes da administração da planta, e mostraram aumento expressivo imediatamente antes do óbito, indicando extravasamento devido à lesão cardíaca. Esses resultados confirmam a hipótese de que a troponina é liberada na corrente sanguínea antes das alterações morfológicas no miocárdio serem observadas pela microscopia convencional e imunohistoquímica. Esses achados contribuem para a compreensão dos mecanismos patológicos dessa intoxicação e podem auxiliar no diagnóstico precoce e tratamento em animais afetados.
Abstract in English:
Lymph node status is considered an important clinical prognostic factor in canine mammary carcinomas and women’s breast neoplasms. However, occult isolated tumor cells (ITCs) can be missed during hematoxylin and eosin (HE) analyses. Immunohistochemistry (IHC) for cytokeratin can be used to detect carcinomatous occult ITCs in mammary drainage lymph nodes. However, brown pigments, such as hemosiderin and ceroid in lymph nodes, may hinder the search for occult metastases by IHC utilizing DAB (3,3′-diaminobenzidine) as the chromogen. The aim of this study was to identify ITCs in canine lymph nodes of cases in which it was not detectable by routine HE evaluation through IHC for cytokeratin (AE1/AE3) combined with histochemistry techniques, such as Perls’ Prussian blue and periodic acid-Schiff (PAS), to improve the detection of occult metastases when hemosiderin and ceroid were present in these lymph nodes. For this, 25 tubulopapillary mammary carcinomas with their respective submitted 29 regional lymph nodes, previously given as free of tumor cells by HE analyses, were selected. Mammary tumors were graduated, and vascular invasion was investigated in these tumors. The submitted lymph nodes were reevaluated in HE, looking for occult metastases. IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was used to detect occult metastases in mammary lymph nodes. Subsequently, a combined technique of IHC with Perl’s Prussian blue (for hemosiderin) or PAS (for ceroid) was performed to optimize the detection of ITCs by IHC, distinguishing them from pigments. Occult metastases were classified by their microanatomical location in subcapsular, cortical and medullary. Hemosiderin and ceroid were searched in lymph nodes and quantified as low, moderate, or high. The amount of pigments with a percentage of ITCs was also compared. Isolated tumor cells were found in 24.1% (7/29) of mammary lymph nodes. These ITCs were located mainly in subcapsular sinuses (4/7; 57.1%), followed by cortical (2/7; 28.5%) and medullary sinuses (1/7; 14.3%). There were concomitant lymph nodes with ITCs in 33.4% (2/6) of cases with vascular invasion. Hemosiderin and ceroid were present in about 90% of the 29 lymph nodes analyzed. In 42.8% (3/7) of lymph nodes with ITCs, hemosiderin and/or ceroid were in the same location as ITCs. It was found that lymph nodes in which ITCs were detected also present high amounts of hemosiderin (3/7; 42.9%) and low amounts of ceroid (5/7; 71.4%). In this study, IHC for cytokeratin (AE1/AE3) was an efficient method to detect occult tumor cells. IHC combined with Perls’ Prussian blue or with PAS proved to be a helpful way to investigate the presence of occult metastases in the lymph nodes of mammary canine tumors. It allowed distinguishing hemosiderin and ceroid, respectively, from ITCs in the same slide of IHC (immunostained by DAB), favoring a more accurate analysis by pathologists, which can be useful for the oncological staging of these patients.
Abstract in Portuguese:
O status nodal é considerado um importante fator prognóstico clínico em cães com carcinomas mamários e em mulheres com neoplasmas mamários. No entanto, durante a análise histopatológica convencional (coloração de hematoxilina e eosina - HE), células neoplásicas podem permanecer ocultas no linfonodo. Imuno-histoquímica (IHQ) para citoqueratina pode ser utilizada para detectar células carcinomatosas isoladas ocultas em linfonodos de drenagem mamária. Entretanto, a presença de pigmentos marrons, como a hemossiderina e o ceroide em linfonodos, pode dificultar a procura por metástases ocultas durante a análise por IHQ utilizando o DAB (3,3′-diaminobenzidina) como cromógeno. O objetivo deste estudo foi identificar células tumorais isoladas (CTIs), não detectadas pela avaliação de rotina (HE), em linfonodos de cães, através de IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) combinada com técnicas histoquímicas, como azul da Prússia e ácido periódico Schiff (PAS), para otimizar a detecção de metástases ocultas, quando os pigmentos hemossiderina e ceroide estavam presentes nos linfonodos. Para esta finalidade, 25 carcinomas mamários túbulo-papilares com seus respectivos 29 linfonodos regionais remetidos, previamente diagnosticados como livres de células neoplásicas pelo HE foram selecionados. Os tumores mamários foram graduados e a presença de invasão vascular foi investigada nestes tumores. Os linfonodos submetidos foram reavaliados histologicamente no HE, à procura de metástases ocultas. IHQ para citoqueratina (AE1/A3) foi utilizada para detectar metástases ocultas nos linfonodos mamários. Subsequentemente, técnicas combinadas de IHQ com azul da Prússia (para hemossiderina) ou PAS (para ceroide) foram realizadas para otimizar a detecção de CTIs através da IHQ, distinguindo-as dos pigmentos. As metástases ocultas foram classificadas pela sua região microanatômica nodal em subcapsular, cortical e medular. Hemossiderina e ceroide foram identificados no linfonodo e classificados de acordo com sua quantidade em baixa, moderada e alta. Também foram comparadas a quantidade de pigmentos com a porcentagem de CTIs. Foram encontradas CTIs em 24,1% (7/29) dos linfonodos mamários. Estas CTIs estavam localizadas principalmente em seios subcapsulares (4/7; 57,1%), seguido pela cortical (2/7; 28,5%) e seios medulares (1/7; 14,3%). Em 33,4% (2/6) dos casos com invasão vascular havia, concomitantemente, linfonodos de drenagem com CTIs. Hemossiderina e ceroide estavam presentes em cerca de 90% dos 29 linfonodos analisados. Em 42,8% (3/7) dos linfonodos com CTIs, hemossiderina e/ou ceroide estavam na mesma localização das CTIs. Os linfonodos que apresentaram CTIs também apresentavam grande quantidade de hemossiderina (3/7; 42,9%) e pequena quantidade de ceroide (5/7; 71,4%). Neste estudo, IHQ para citoqueratina (AE1/AE3) foi um método eficiente para detecção de células tumorais ocultas. A técnica combinada de IHQ com azul da Prússia ou com o ácido periódico de Schiff (PAS) mostrou ser uma maneira útil de investigar a presença de metástases ocultas em linfonodos de cães com tumores mamários caninos, distinguindo a hemossiderina e o ceroide, respectivamente, de CTIs na mesma lâmina de IHQ (imunomarcadas por DAB), favorecendo uma análise mais acurada pelos patologistas, o que pode ser útil no estadiamento oncológico destes pacientes.
Abstract in English:
Mesotheliomas in cattle are often described as isolated case reports, and investigations of multiple cases within the same bovine herd are lacking. A series of cases of malignant epithelial mesothelioma, tubulopapilary type, is described in five 15 to 21-year-old Red Sindhi cows from the same herd. Clinical signs included three to eight months of progressive emaciation, dehydration, subcutaneous edema of the lower extremities, and abdominal distension. Grossly, severe subcutaneous edema and hydroperitoneum were noted. Multiple organs’ parietal and visceral serosal surfaces had multifocal to coalescing yellow, firm, sessile nodules ranging from 0.1 to 29.0cm. Similar free nodules floated in the peritoneal fluid. Histologically, the masses comprised a layer of cubic to columnar neoplastic cells forming papillary or cystic proliferation supported by a dense fibrovascular stroma. Neoplastic cells had strong and diffuse cytoplasmic immunolabeling for pan-cytokeratin but were negative for cytokeratin 7 and vimentin. Ultrastructurally, neoplastic cells had delicate microvilli and tight and anchoring junctions. Within the cytoplasm, a moderate amount of loose aggregate of intermediary filament with small mitochondria was observed. Epidemiological investigation evidenced endogamy in this herd. Asbestos exposure was not detected. The diagnosis was based on clinical, gross, histological, and immunohistochemical findings and confirmed by transmission electron microscopy features. A definitive underlying etiology remains unknown.
Abstract in Portuguese:
Mesotelioma em bovinos são frequentemente relatados como casos isolados, descrições de múltiplos casos no mesmo rebanho bovino não foram encontrados. Descreve-se uma série de casos de mesotelioma epitelial maligno, tipo tubulopapilar, em cinco vacas Red Sindi de 15 a 21 anos de idade do mesmo rebanho. Os sinais clínicos incluíram emagrecimento progressivo, desidratação, edema subcutâneo das extremidades dos membros e distensão abdominal em um curso clínico que variou de três a oito meses. Macroscopicamente, observou-se edema subcutâneo acentuado e hidroperitônio. Nas serosas parietais e viscerais de múltiplos órgãos haviam nódulos multifocais a coalescentes amarelo-claros, firmes e sésseis que variavam de 0,1 a 29,0 centímetros de diâmetro. Nódulos livres semelhantes também flutuavam no líquido peritoneal. Histologicamente, as massas eram compostas por uma camada de células cúbicas a colunares formando proliferação papilar ou cística sustentada por estroma fibrovascular denso. As células neoplásicas apresentavam imunomarcação citoplasmática forte e difusa para pan-citoqueratina, mas eram negativas para citoqueratina 7 e vimentina. Ultraestruturalmente, as células neoplásicas apresentavam delicadas microvilosidades e junções comunicantes e de ancoragem. No citoplasma observou-se moderada quantidade de agregados de filamentos intermediários soltos e pequenas mitocôndrias. A investigação epidemiológica revelou que não houve inserção de bovinos de outros rebanhos por mais de 30 anos e evidenciou endogamia. Não foram encontradas possíveis fontes de amianto para os bovinos deste rebanho. O diagnóstico de mesotelioma foi baseado em características clínicas, macroscópicas, histológicas, imuno-histoquímicas e confirmado pelos achados de microscopia eletrônica. A etiologia permanece desconhecida.
Abstract in English:
Ionophores are antibiotics frequently used in animals of production. The most common are monensin, salinomycin, narasin, and lasalocid. The equine species is highly susceptible to ionophores poisoning. The present study aimed to analyze the serum use of cardiac troponin I (cTnI) and the anti-troponin C immunohistochemistry (IHC) technique (anti-cTnC) as a diagnostic tool for cardiac injuries in horses spontaneously poisoned by salinomycin. Seven horses were affected by a disease lasting for 6-72 hours. Three horses recovered. The primary morphological lesions reported in the four necropsied horses that died spontaneously were necrosis of the myocardium and skeletal muscle. Immunohistochemistry for anti-cTnC was performed in selected sections of the cardiac muscle from the equine submitted for necropsy. A decrease in cTnC expression in the cytoplasm of cardiomyocytes was noticed in all four necropsied horses. Samples of serum from six horses tested for cardiac troponin I levels; the most expressive values were mainly in horses with more severe cardiac histological lesions. The serum detection of cTnI can be considered a good marker to determine cardiac damage in horses intoxicated with salinomycin with a clinical evolution of 48 hours or more. The anti-cTnC IHC aided in the detection of cardiac injury in horses independent of clinical evolution.
Abstract in Portuguese:
Ionóforos são antibióticos frequentemente utilizados em animais de produção. Dentre eles, os mais comuns são a monensina, salinomicina, narasina e lasalocida. A espécie equina é altamente suscetível à intoxicação por antibióticos ionóforos. O objetivo do presente estudo foi analisar o uso da troponina sérica cardíaca I (cTnI) e da técnica de imuno-histoquímica anti-troponina C (IHC) (anti-cTnC), como ferramenta diagnóstica para lesões cardíacas em equinos intoxicados espontaneamente por salinomicina. Sete equinos foram afetados, com evolução clínica de seis a 72 horas. Destes, quatro foram necropsiados e três se recuperaram. As principais lesões morfológicas observadas foram necrose do miocárdio e dos músculos esqueléticos. A imuno-histoquímica anti-cTnC foi realizada em amostras selecionadas de tecido cardíaco dos quatro equinos submetidos à necropsia. Em todos os casos foi observada diminuição da expressão de cTnC no citoplasma dos cardiomiócitos. Amostras de soro de seis equinos foram submetidas à dosagem de troponina cardíaca I. Os valores mais altos foram observados em equinos que apresentaram lesões histológicas cardíacas mais graves. A detecção sérica de cTnI pode ser considerada um bom marcador para determinar lesão cardíaca em equinos intoxicados com salinomicina com evolução clínica de 48 horas ou mais. A IHC anti-cTnC auxiliou na detecção da lesão cardíaca nos equinos independente da evolução clínica.