PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Brazil has one of the largest commercial cattle herds in the world, which naturally coexist with an enormous number of parasitic species. Southern cattle tick, Rhipicephalus (Boophilus) microplus, is among these species, interfering with animal productivity and causing losses to the beef and dairy cattle sector. The use of chemical acaricides in the control of this mite has resulted in the emergence of resistant populations. In this sense, alternative control measures using plants as sources of botanical acaricides have shown to be effective. Eugenia pyriformis Cambess is a Brazilian plant with antioxidant and antimicrobial activity; however, there are no reports on its acaricidal activity in the literature. The present study aimed to evaluate the acaricidal and larvicidal potential of E. pyriformis leaf essential oil (EO) on southern cattle tick at different stages of the reproductive cycle. E. pyriformis leaves were collected and dried, and had their EO extracted by hydrodistillation (3h) using a modified Clevenger apparatus. Chemical analysis was performed by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), and 32 compounds belonging to the sesquiterpene class were identified: hydrocarbons (17.98%) and oxygenated forms (81.96%), with spathulenol (43.65%) and caryophyllene oxide (12.17%) as the most common. The EO was evaluated by the Adult Immersion Test at the concentrations (500.00 to 3.12mg/mL) in which the following parameters were measured: mortality of females (%), hatchability of eggs (%), and product efficiency (%). Larvae were assessed by the Larval Packet Test at concentrations ranging from 25.00 to 0.00004mg/mL. Lethal concentrations (LC) required for killing 50 and 99.9% of adult females and larvae were determined using Probit analysis. LC50 and LC99.9 of EO were 0.06 and 24.60mg/mL and 1,208.80 and 2,538mg/mL for larvae and adult females, respectively. Action of the EO in the free-living cycle of R. (B.) microplus larvae was another parameter assessed. To this end, the larvae were deposited in pots containing Brachiaria decumbens and, after migration to the leaf apex, a solution containing LC99.9 (24.60mg/mL) of the EO was sprayed. After 24h, 72.25% of the larvae had died, indicating stability of the EO when subjected to uncontrolled temperature and humidity conditions. The mechanism of action through which the EO killed the larvae and adult females was investigated by the Bioautographic Method, which showed inhibition of 3.15mg/mL of the EO on the acetylcholinesterase (AChE) enzyme. The results found in the present experiment indicate that E. pyriformis essential oil is an alternative in the control of southern cattle tick in the larval (parasitic) and free-living cycle (non-parasitic) stages under field conditions.

• Biocidal Eugenia pyriformis essential oil Rhipicephalus (Boophilus) microplus free-living cycle “uvaia” acaricide larvicide spathulenol caryophyllene oxide acetylcholinesterase alternative acaricides tick.

Abstract in Portuguese:

O Brasil dispõe de um dos maiores rebanhos bovinos comerciais do mundo, sendo natural que junto a esse rebanho, coexista uma enorme quantidade de espécies parasitárias; dentre estes o carrapato Rhipicephalus (Boophilus) microplus que interfere na produtividade animal, causando prejuízos à pecuária de corte e leite. A utilização de acaricidas químicos no controle deste ácaro tem causado o surgimento de populações resistentes e neste sentido, controles alternativos utilizando plantas como fontes de acaricidas botânicos têm se mostrado eficazes. Eugenia pyriformis Cambess é uma planta brasileira com atividades antioxidante e antimicrobiana, entretanto não há relatos da atividade acaricida. O objetivo do presente estudo consistiu na avaliação do potencial acaricida e larvicida do óleo essencial das folhas de E. pyriformis sobre o carrapato bovino nos diferentes estágios do ciclo reprodutivo. As folhas foram coletadas, secas e o OE extraído por hidrodestilação (3 horas) em aparelho Clevenger modificado. A análise química foi realizada por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG/EM) sendo identificados 32 compostos, pertencentes à classe sesquiterpenos: hidrocarbonetos (17.98%) e oxigenados (81.96%); tendo como majoritários o spathulenol (43,65%) e caryophylene oxide (12,17%). O OE foi avaliado pelo teste de imersão de adultos nas concentrações (500,00 a 3,12mg/mL) onde foram mensurados os parâmetros: mortalidade das fêmeas (%), eclodibilidade dos ovos (%) e eficiência do produto (%). As larvas foram avaliadas pelo teste de imersão larval (Larval Packet Test) nas concentrações que variaram de 25,00 a 0,00004mg/mL. Foram determinadas as concentrações letais (CLs) necessárias para matar 50 e 99,9% das fêmeas adultas e das larvas utilizando a análise de Probitos. As CL50 e CL99,9 do OE foram (0,06 e 24,60mg/mL) para as larvas e (1.208,80 e 2.538mg/mL) para as fêmeas adultas, respectivamente. Outro parâmetro avaliado em nossa pesquisa foi mensurar a ação do OE no ciclo de vida livre das larvas de R. (B.) microplus; onde as larvas foram depositadas em vasos com Brachiaria decumbens e após migração destas para o ápice das folhas, foi aspergido solução contendo a CL99,9 (24,60mg/mL) do OE. Após 24 horas, 72,25% das larvas morreram indicando que houve estabilidade do OE quando submetido a condições de temperatura e umidade não controladas. O mecanismo de ação pelo qual o OE matou as larvas e fêmeas adultas foi investigado pelo método bioautográfico, indicando uma inibição de 3,15mg/mL do óleo essencial sobre a enzima acetilcolinesterase (AChE). Os resultados encontrados no presente experimento indicaram que o óleo essencial de E. pyriformis é uma alternativa no controle do carrapato bovino no estágio larval (parasitário) e no ciclo de vida livre (estágio não parasitário) em condições de campo.

• Biocida óleo essencial Eugenia pyriformis Rhipicephalus (Boophilus) microplus ciclo de vida livre uvaia acaricida larvicida spathulenol caryophyllene oxide acetilcolinesterase alternative acaricida carrapato

Abstract in English:

Diseases’ clinical-epidemiological characterization assists in directing the diagnosis. The objective of this study was to describe epidemiological, clinical and laboratorial aspects of a case series of canine hyperadrenocorticism (HAC). One-hundred fifteen records of dogs diagnosed by the low dose dexamethasone suppression test and/or ACTH stimulation test were evaluated. Of the cases, 81.3% were HAC ACTH-dependent and 18.7% HAC ACTH-independent. Females were more affected, representing 69.3% of the cases. The mean age was 10.3±2.5 years and 64.9% were gonadectomized. Most of the patients were small size dogs, weighting less than 10kg (73.9%). The most frequent breeds were: Poodle (27%), Dachshund (17.4%), and Yorkshire Terrier (10.4%). The most frequent clinical manifestations were polyphagia (86%), polydipsia (82.6%), polyuria (80%), abdominal enlargement (82.6%), thin skin (79.1%), muscular weakness (78.3%) and panting (74.8%). However, eventually unusual HAC-associated signs would be present in some dogs in a more important way compared with the classic disease´s clinical signs. The CBC showed neutrophilia (66%), eosinopenia (58.3%) and lymphopenia (42.6%) as main hematological abnormalities. The most common findings in serum biochemistry were increased alkaline phosphatase activity (81.74%), increased ALT activity (62.6%), hypercholesterolemia (66%) and hypertriglyceridemia (54.7%). Urinalysis revealed hyposthenuria in 14.9% and isostenuria in 13.5%; besides proteinuria in 50% of the cases. Abdominal ultrasound showed bilateral adrenal hyperplasia (92.2%) with adrenal asymmetry in 20.8% of the cases, in addition to hepatomegaly (80.9%), biliary sludge (67.8%) and hepatic hyperechogenicity (47.8%). It was concluded that small size gonadectomized female dogs, mainly Poodles and Dachshunds, presented higher frequency in the population studied, and that the main changes observed in clinical and complementary tests were polyphagia, polyuria, polydipsia, abdominal enlargement, adrenal hyperplasia, increased phosphatase alkaline and hyperlipidemia. These results corroborated to a better disease characterization at Brazil. This work concluded that the population studied resembles the profile describe in European and North American epidemiologic studies, and that the HAC dog´s clinical picture looks similar worldwide.

• Epidemiology clinics laboratory case series canine hyperadrenocorticism dogs Cushing syndrome hypercortisolism glucocorticoids

Abstract in Portuguese:

A caracterização clínica-epidemiológica de doenças auxilia no direcionamento do diagnóstico. O objetivo deste trabalho foi descrever aspectos epidemiológicos, clínicos e laboratoriais de uma série de casos de hiperadrenocorticismo (HAC) canino. Foram avaliados 115 prontuários de cães diagnosticados pelo teste de supressão por baixa dose de dexametasona e/ou teste de estimulação com ACTH. Os casos de HAC ACTH-dependentes representaram 81,3% da população, e 18,7% foram ACTH-independentes. As fêmeas foram mais acometidas, representando 69,3% dos casos. A média de idade foi 10,3 ± 2,5 anos e 64,9% eram gonadectomizados. A maioria dos cães foi de porte pequeno, de até 10 kg (73,9%). As raças mais frequentes foram Poodle (27%), Dachshund (17,4%) e Yorkshire (10,4%). As manifestações clínicas mais relatadas foram polifagia (86%), polidipsia (82,6%), poliúria (80%), abdome pendular (82,6%), atrofia cutânea (79,1%), fraqueza muscular (78,3%) e dispneia (74,8%). Entretanto, eventualmente sinais clínicos pouco associados ao HAC se manifestaram de forma mais importante que os sinais clássicos da doença. O hemograma revelou neutrofilia (66%), eosinopenia (58,3%) e linfopenia (42,6%) como principais alterações hematológicas. Na bioquímica sérica foi observado aumento de fosfatase alcalina (81,74% dos casos), aumento da atividade da ALT (62,6%), hipercolesterolemia (66%) e hipertrigliceridemia (54,7%). A urinálise revelou hipostenúria em 14,9% e isostenúria em 13,5%; além de proteinúria em 50% dos casos. A ecografia abdominal evidenciou hiperplasia bilateral de adrenal (92,2%) com assimetria de adrenais em 20,8% dos casos, além de hepatomegalia (80,9%), lama biliar (67,8%) e hiperecogenicidade hepática (47,8%). Concluiu-se que fêmeas castradas de pequeno porte, principalmente das raças Poodles e Dachshunds, apresentaram maior frequência na população estudada e que as principais alterações observadas clínicas e nos exames complementares foram polifagia, poliúria, polidipsia, aumento abdominal, hiperplasia da adrenal, aumento de fosfatase alcalina e hiperlipidemia. Estes resultados corroboram para melhor caracterização da doença no Brasil. Este estudo concluiu que a população estudada se assemelha ao perfil populacional de cães com HAC descrito em estudos Europeus e Norte Americanos de forma que o perfil dos casos ao redor do globo parece similar.

• Epidemiologia clínica laboratório série de casos cães hiperadrenocorticismo síndrome de Cushing hipercortisolismo glicocorticoides

Abstract in English:

Malassezia pachydermatis is a lipophilic and lipid-dependent yeast mostly isolated from animals’ skin; hence, it is regarded as a zoophilic species causing otitis externa in dogs. Aspects associated with its epidemiology and pathogenicity is a matter of interest. This study aimed to conduct a molecular characterization of 43 isolates of M. pachydermatis obtained from dogs with otitis externa. For this purpose, the 5.8S internal transcribed spacer 2 (ITS2) and D1/D2 26S rRNA regions were amplified, sequenced and analyzed using restriction fragment length polymorphism (RFLP) with AluI, CfoI, and BstF5I endonucleases. Phylogenetic analyses revealed that these isolates grouped with the sequence types I, IV and V, previously proposed for M. pachydermatis. Interestingly, we found a new polymorphic RFLP pattern using BstF5I, these isolates were associated with the sequence types IV and V, nevertheless an association between polymorphic RFLP patterns, and fosfolipase activity or canine population data was not observed. These findings underline the genetic diversity of M. pachydermatis and provide new insights about the epidemiology of this species in the analyzed population.

• Genotype Malassezia pachydermatis genetic variation isolates dogs Colombia gene otitis PCR-RFLP sequence types

Abstract in Portuguese:

Malassezia pachydermatis é uma levedura lipofílica e dependente de lipídios, principalmente da pele de animais. Sendo, por essa razão, considerada uma espécie zoofílica e causadora de otite externa em cães. Neste sentido, aspectos associados à sua epidemiologia e patogenicidade constituem um tema de interesse científico. O objetivo deste estudo foi realizar a caracterização molecular de 43 isolados de M. pachydermatis obtidos a partir de cães com otite externa. Para esta propósito, foram amplificadas, sequenciadas e analisadas com enzimas de restrição as regiões do gene 5.8S, do espaçador interno transcrito 2 (ITS2) e D1/D2 do 26S do rRNA pelo método RFLP, com as endonucleases AluI, CfOI e BstF5I. Análises filogenéticas revelaram que os isolados se agruparam com as sequências tipo I, IV e V de M. pachydermatis como já descrito anteriormente. De maneira interessante, se observou um novo RFLP polimórfico utilizando BstF5I. Os isolados que mostraram esse padrão foram associados com os padrões IV e V. No entanto, não foi observada associação entre padrões polimórficos de RFLP e atividade de fosfolipase ou dados da população canina. Estes resultados demonstram a diversidade genética de M. pachydermatis e fornecem novas perspectivas sobre a epidemiologia destas espécies na população analisada.

• Genotipagem Malassezia pachydermatis variação genética isolados cães Colômbia genes otite PCR-RFLP tipos de sequência

Abstract in English:

Few reports have been published regarding the use of ultrasonography as a method of evaluating the normal thyroid gland in horses. For these reasons, this study aimed at determining reliably of the thyroid measurements from the comparison between the left and right thyroid lobes, as well as assessing the contour, format, echotexture and echogenicity of the healthy thyroid by mode-B ultrasonography. Additionally, the equine thyroid vascularization was quali‑quantitatively characterized the by Doppler. The sample size initially was determined by the animal selection with advanced age and without volume increase in the neck proximal region. Finally, eleven horses were selected by laboratory test, search of thyroid neoformations by ultrasonography and cytology thyroid. Next, these animals were submitted to thyroid lobes ultrasonographic evaluation. Excellent reproducibility was observed for all measurements obtained. Among the comparisons made between the quantitative parameters of the left and right lobes, it was observed that there was only difference between their respective lengths. Qualitatively, there was a significant variation between the lobes elliptical format in the longitudinal plane of some glands, which oscillated between a rounded and flattened conformation. Thus, we can conclude that the difference between the lobes format of some thyroids can be explained by the significant difference observed between the length of the left and right lobes. Additionally, it was verified that there was no difference between the Doppler quantitative parameters. Therefore, we may suggest that unilateral analysis of the cranial thyroid artery by spectral Doppler can be used to evaluate equine thyroid diffuse disorders.

• Ultrasonography thyroid gland adult horses thyroid lobes ultrasound equines horses morphology

Abstract in Portuguese:

Poucas análises foram publicadas com relação ao uso da ultrassonografia como método de avaliação da glândula tireoide hígida em equinos. Alguns trabalhos incluem a determinação das dimensões e características do parênquima. Por essas razões, este estudo teve como objetivo determinar com segurança as medidas tireoidianas a partir da comparação entre o lobo tireoidiano esquerdo e direito, bem como avaliar os contornos, formato, ecotextura e ecogenicidade das glândulas tireoides hígidas pela ultrassonografia em modo B. Além disso, a vascularização da tireoide equina foi caracterizada quali-quantitativamente pela ferramenta Doppler. O tamanho da amostra inicialmente foi determinado pela seleção dos animais com idade avançada e sem aumento de volume na região proximal do pescoço. Por fim, onze equinos foram selecionados por meio de exame laboratorial, pesquisa de neoformações tireoidianas por ultrassonografia e citologia da tireoide. Em seguida, estes animais foram submetidos à avaliação de lobos tireoidianos por ultrassonografia. Observou-se excelente reprodutibilidade em relação a todas as medidas deste estudo. Foram observadas diferenças qualitativas entre os lobos tireoidianos direito e esquerdo. Assim, podemos concluir que tais diferenças entre o formato dos lobos tireoidianos podem ser explicadas pela diferença significativa e/ou tendência observada no parâmetro comprimento entre os respectivos lobos. Além disso, não foi encontrada diferença significativa entre os valores da artéria tireoidiana cranial esquerda em relação aos obtidos na artéria tireoidiana cranial direita, sugerindo que a análise dos valores espectrais do Doppler de uma das artérias tireoidianas craniais possa ser utilizada como método de avaliação de distúrbios difusos da tireoide equina.

• Ultrassonografia glândula tireoide equinos adultos lobos tireoidianos ultrassom cavalos morfologia

Abstract in English:

During pregnancy there are modifications in the metabolic profile of sheep that may predispose to the occurrence of metabolic disorders, of which pregnancy toxaemia (PT) is highlighted. Blood gas analysis is detects changes in acid-base and electrolyte balance effectively. The objectives of this study were to study the acid-base and electrolyte balance of sheep during gestation and in the immediate peripartum (up to 48 hours postpartum), comparing single gestation with twins. Sixty healthy sheep of Dorper breed, two to five years old were raised in a semi-intensive system and were divided in two experimental groups: Group 1: 30 ewes, with ultrasonographic diagnosis of single fetus gestation; Group 2: 30 ewes, with ultrasonographic diagnosis of twin pregnancy. The experimental moments were defined as: MI-immediately after artificial insemination (control); MG30 - 30 days of gestation; MG90 - 90 days of gestation; MG120 - 120 days of gestation; MG130 - 130 days of gestation; MG140 - 140 days of gestation; MP - lambing; MPP1 - 24h postpartum; MPP2 - 48h postpartum. At all times 1mL of blood was collected per jugular vein puncture for blood gas evaluation in a portable equipament (I-Stat). The pH, carbon dioxide pressure (PCO2), bicarbonate (HCO3–), base excess (BE), sodium (Na+), potassium (K+), chloride (Cl–), ionized calcium (Ca+2), lactate, anion gap (AG) were mensured and strong ion difference (SID) were calculed. This work showed that there were changes in acid-base and electrolyte balance in pregnant ewes, due to the decrease in BE, HCO3–, TCO2 and increase of lactate and AG during gestation, but the pH remained normal and did not present any difference among moments in both groups. Comparing the groups, single-gestation ewes presented higher alkaline expenditure at delivery than twin-gestation, evidenced by lower levels of BE and HCO3–. Lower Na+ levels were observed in prepartum; drop in K+ values ​​with advancing gestation; hyperchloremia and hypocalcemia during gestation according to the reference standards for species; decreased iCa+2 levels in the final third of gestation in both groups. It was concluded that the ewes of this study were healthy until the last moment analyzed (48h postpartum), although have shown greater consumption of the alkaline reserve in the peripartum, being more explicit in the single gestation animals. In addition, this situation can be physiological and result in increased energy demand during gestation, more exacerbated by peripartum.

• Electrolyte acid-base Dorper breed ewes twin pregnancies blood gas analysis metabolic diseases pregnancy small ruminants sheep ovine

Abstract in Portuguese:

Durante a gestação ocorrem modificações metabólicas nas ovelhas que podem predispor a ocorrência de transtornos metabólicos, dos quais se destaca a toxemia da prenhez (TP). A hemogasometria é um exame que detecta alterações nos equilíbrios ácido-básico e eletrolítico de forma eficaz. Os objetivos deste estudo foram estudar os equilíbrios ácido-básico e eletrolítico de ovelhas durante a gestação e no periparto imediato (até 48 horas pós-parto), comparando‑se gestação única com gemelar. Foram utilizadas 60 ovelhas criadas em manejo semi-intensivo, hígidas, da raça Dorper, com dois a cinco anos de idade. Foram constituídos dois grupos experimentais: Grupo 1: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação de feto único; Grupo 2: 30 ovelhas, com diagnóstico ultrassonográfico de gestação gemelar. Os momentos experimentais foram definidos como: MI - imediatamente após a inseminação artificial (controle); MG30 - 30 dias de gestação; MG90 - 90 dias de gestação; MG120 - 120 dias de gestação; MG130 - 130 dias de gestação; MG140 - 140 dias de gestação; MP - dia do parto; MPP1 - 24h pós-parto; MPP2 - 48h pós-parto. Em todos os momentos foi colhido 1mL de sangue por punção da veia jugular para avaliação hemogasométrica em aparelho portátil (I-Stat). Foram analisados os parâmetros: pH, pressão de dióxido de carbono (PCO2), bicarbonato (HCO3–), excesso de bases (EB), sódio (Na+), potássio (K+), cloreto (Cl–), cálcio ionizado (iCa+2), lactato, ânion gap (AG) e diferença de íons fortes (SID). Este trabalho mostrou que houve mudanças nos equilíbrios ácido-básico e eletrolítico nas ovelhas prenhes, pela diminuição do EB, HCO3– e aumento do lactato e AG no decorrer da gestação, porém o pH se manteve dentro da normalidade e não apresentou diferença ao longo dos momentos em ambos os grupos. Comparando os grupos, as ovelhas de gestação única apresentaram maior consumo da reserva alcalina no momento do parto do que as de gestação gemelar, evidenciado menores níveis de EB e HCO3–. Foram observados níveis mais baixos de Na+ no pré-parto; queda dos valores de K+ com o avanço da gestação; hipercloremia e hipocalcemia durante a gestação segundo os padrões de referência para espécie e diminuição dos níveis de iCa+2 no terço final da gestação nas ovelhas de ambos os grupos. Concluiu-se que as ovelhas deste estudo apresentaram-se saudáveis até o último momento analisado (48h pós-parto), embora tenham mostrado maior consumo da reserva alcalina no periparto, sendo mais evidente nos animais de gestação única. Apesar disso, essa ocorrência pode ser considerada fisiológica e consequência do aumento da demanda energética durante a gestação, mais exacerbada no periparto.

• Equilíbrio eletrolítico ácido básico ovelhas raça Dorper gestação única gestação gemelar doenças metabólicas gestação hemogasometria pequenos ruminantes ovinocultura ovinos

Abstract in English:

The most consumed cheese in Brazil, Minas Frescal cheese (MFC) is highly susceptible to microbial contamination and clandestine production and commercialization can pose a risk to consumer health. The storage of this fresh product under refrigeration, although more appropriate, may favor the growth of spoilage psychrotrophic bacteria. The objective of this study was to quantify and compare Pseudomonas spp. and other psychrotrophic bacteria in inspected and non-inspected MFC samples, evaluate their lipolytic and proteolytic activities and their metalloprotease production potentials. Twenty MFC samples were evaluated: 10 inspected and 10 non-inspected. Counts of psychrotrophic bacteria and Pseudomonas spp., evaluation of the proteolytic and lipolytic potential of the isolates, and identification of potential producers of alkaline metalloprotease (AprX) were assessed. The mean total psychrotrophic counts were 1.07 (±2.18) × 109CFU/g in the inspected samples and 4.5 (±5.86) × 108CFU/g in the non-inspected, with no significant difference (p=0.37). The average score of Pseudomonas spp. was 6.86 (±18.6) × 105 and 2.08 (±3.65) × 106 CFU/g for the inspected and non-inspected MFC samples, respectively, with no significant difference (p=0.1). Pseudomonas spp. represented 0.06% and 0.004% of psychrotrophic bacteria found in inspected and non-inspected MFC samples, respectively. Collectively, 694 psychrotrophic strains and 47 Pseudomonas spp. were isolated, of which 59.9% and 68.1% were simultaneously proteolytic and lipolytic, respectively. Of the 470 psychrotrophs isolated from inspected and 224 from non-inspected cheese samples, 5.74% and 2.23% contained aprX, respectively, while 100 and 86.96% of the Pseudomonas spp. isolates in inspected and non-inspected cheese samples contained the gene. The production potential of AprX did not, however, determine the proteolytic activity on plates of these isolates under the conditions evaluated in this study. Of total, 65.63% of the psychrotrophs that contained aprX gene were confirmed as Pseudomonas spp., using genus-specific PCR. Phylogenetic analysis of the 16S rRNA gene of the other psychrotrophs that were potential producers of AprX identified them as Serratia spp. (n=7), Raoultella ornithinolytica (n=1), and Acinetobacter schindleri (n=1) in the inspected samples and Psychrobacter sanguinis (n=1) and Leuconostoc mesenteroides (n=1) in the non-inspected samples. The production conditions of Brazilian MFC of these samples, while meeting the legal determinations, are not sufficient to control Pseudomonas and other spoilage-related psychrotrophs. Thus, stricter hygienic measures are required during the formal production of this type of cheese.

• Pseudomonas spp. psychrotrophic microorganisms Minas Frescal cheese cheese AprX production alkaline metalloprotease proteolysis lipolysis

Abstract in Portuguese:

O mais consumido no Brasil, o queijo Minas Frescal (QMF) é altamente suscetível à contaminação microbiana e a produção e comercialização clandestina podem representar um risco para a saúde do consumidor. O armazenamento deste produto fresco sob refrigeração, embora mais apropriado, pode favorecer a multiplicação de bactérias psicrotróficas deteriorantes. O objetivo deste estudo foi quantificar e comparar Pseudomonas spp. e outras bactérias psicrotróficas em amostras de QMF inspecionadas e não inspecionadas, avaliar o potencial lipolítico, proteolítico e de produção de metaloprotease alcalina. Vinte amostras de QMF foram avaliadas: 10 inspecionadas e 10 não inspecionadas. Foram avaliadas as contagens de bactérias psicrotróficas e Pseudomonas spp., o potencial proteolítico e lipolítico dos isolados e a identificação de potenciais produtores de metaloprotease alcalina (AprX). A média total das contagens de bactérias psicrotróficas foi de 1,07 (±2,18) × 109UFC/g nas amostras inspecionadas e 4,5 (±5,86) × 108UFC/g nas não inspecionadas, sem diferença significativa (p=0,37). A média de Pseudomonas spp. foi de 6,86 (±18,6) × 105 e 2,08 (±3,65) × 106UFC/g para as amostras QMF inspecionadas e não‑inspecionadas, respectivamente, sem diferença significativa (p=0,1). Pseudomonas spp. representaram 0,06% e 0,004% de bactérias psicrotróficas encontradas em amostras QMF inspecionadas e não‑inspecionadas, respectivamente. Das amostras inspecionadas e não inspecionadas, foram isoladas 694 colônias psicrotróficas e 47 Pseudomonas spp., dos quais 59,9% e 68,1% foram simultaneamente proteolíticos e lipolíticos, respectivamente. Dos 470 isolados de psicrotróficos das amostras de queijo inspecionados e dos 224 isolados das não inspecionadas, 5,74% e 2,23% continham o gene aprX, respectivamente, enquanto 100 e 86,96% das Pseudomonas spp. isoladas em amostras de queijo inspecionadas e não inspecionadas continham o potencial de expressão de AprX. Esse potencial, no entanto, não determinou a atividade proteolítica em placas desses isolados nas condições avaliadas neste estudo. Do total, 65,63% dos psicrotróficos que continham o gene aprX foram confirmados como Pseudomonas spp., utilizando PCR gênero-específico. A análise filogenética do gene 16S rRNA dos outros psicrotróficos que foram produtores potenciais de AprX os identificou como Serratia spp. (n=7), Raoultella ornithinolytica (n=1) e Acinetobacter schindleri (n=1) nas amostras inspecionadas e Psychrobacter sanguinis (n=1) e Leuconostoc mesenteroides (n=1) nas amostras não inspecionadas. As condições de produção do QMF dessas amostras, atendendo às determinações legais, não são suficientes para controlar a Pseudomonas e outros psicrotróficos relacionados à deterioração. Assim, medidas higiênicas mais rígidas são necessárias durante a produção formal deste tipo de queijo.

• Pseudomonas spp. micro-organismos psicrotróficos queijo Minas Frescal produção de AprX metaloprotease alcalina proteólise lipólise

Abstract in English:

According to experimental studies with healthy dogs, omeprazole might decrease the CSF production by about 26%; therefore, book texts have been suggested the usage of omeprazole in medical protocols for hydrocephalus treatment. However, to the best knowledge of the authors, the usage and medical response of the omeprazole with substantial group of illness dogs, such as hydrocephalic animals, was lacking. This report describes clinical, diagnostic, and therapeutic findings in 12 dogs with hydrocephalus in which omeprazole were used for medical treatment. The diagnosis of hydrocephalus was accomplished by transcranial sonography (TCS) and/or computed tomography. The ventricular measurement was assessed periodically by TCS during medical treatment. Six dogs were diagnosed with non-obstrutive hydrocephalus and in the other 6 cases hydrocephalus occurred with other concomitant anomalous encephalic disease often related with obstructive hysdrocephalus, such as quadrigeminal cist, arachnoid cyst, chiary-like malformation, and syringomyelia. All of them had medical improvement after the use of omeprazole and the most of the cases had ventricular size reduction. In 10 dogs, the omeprazole was used as single drug, and in 2 dogs medical treatment with steroids and/or diuretics was previously being performed, and omeprazole was added because conventional treatment was resulting in mild to unsatisfactory medical control of the neurological status. The results of this paper shown that omeprazole may be used to ameliorate the neurological status in symptomatic hydrocephalic dogs. This work may represent the first description about the use of omeprazole in order to treat a substantial group of affected dogs with suspected increased intracranial pressure by hydrocephalus, probably due to limitation of CSF production.

• Medical therapy omeprazole hydrocephalus dogs clinic diagnostic therapeutic findings

Abstract in Portuguese:

O omeprazol diminui a produção do fluido cerebrospinal (FCE) por cerca de 26% de acordo com estudos experimentais em cães saudáveis. Segundo o conhecimento dos autores, embora utilizado na prática clínica e recomendado em livros textos, não há até o momento estudos clínicos em um grupo substancial de animais avaliando a resposta terapêutica ao uso do omeprazol em pacientes enfermos, tais como cães hidrocefálicos sintomáticos. Este trabalho descreve os achados clínicos, diagnósticos e terapêuticos em 12 cães com hidrocefalia que foram submetidos ao tratamento com omeprazol para o manejo médico de hidrocefalia. O diagnóstico de hidrocefalia e doenças neurológicas concomitantes foi realizado por ultrassonografia transcraniana (USTC) e/ou tomografia computadorizada. A mensuração do tamanho ventricular foi realizada pela USTC durante o tratamento médico. Seis cães foram diagnosticados com hidrocefalia não obstrutiva e os outros 6 casos apresentaram hidrofalia concomitante com outras afecções encefálicas anômalas comumente associada à hidrocefalia obstrutiva, tal como cisto quadrigêmio, cisto aracnóide, síndrome de chiari-like e seringomegalia. Em 10 cães o omeprazol foi utilizado como droga única e em 2 cães a terapia inicial foi a convencional utilizando esteroides e diuréticos, e o omeprazol foi adicionado, pois a resposta clínica a terapia convencional foi insatisfatória. Todos os animais obtiveram melhora dos parâmetros neurológicos e a maioria teve uma redução do tamanho ventricular após o uso do omeprazol. Os resultados deste estudo demonstram que o omeprazol pode ser utilizado para melhorar o estado neurológico em cães com hidrocefalia. Este estudo representa a primeira descrição clínica usando o omeprazol para tratar uma série de cães com suspeita de aumento da pressão intracraniana devido à hidrocefalia, provavelmente pela capacidade do fármaco em limitar a produção do FCE.

• Terapia omeprazol hidrocefalia cão clínica diagnóstico

Abstract in English:

Bovine mastitis has a negative impact on milk production and can pose risks to public health. The present study aimed to evaluate the quality of bovine milk from small farms in the Botucatu/SP region. Somatic cell counts (SCC), identification of pathogens involved in mastitis, and sensitivity antimicrobial profile of staphylococci isolated were performed. The presence of enterotoxin encoding genes in isolates of staphylococci obtained from milk was investigated. Milk samples from individual mammary quarters of cows were submitted to the California mastitis test (CMT) and SCC. Of the 239 dairy cows from 21 dairy herds evaluated (mean = 11.4 animals/property), two cows (0.8%) presented clinical mastitis and 86 (35.9%) subclinical mastitis. Bacterial culture was performed in 177 quarter milk samples. Staphylococci were identified in 55 (31.1%), corynebacteria in 45 (25.4%), streptococci in 25 (14.1%) and coliforms in four (2.3%) milk samples. Average SCC from culture-positive samples was 1598x103 cells/mL, in case of staphylococci was 1362x103 cells/ml, streptococci was 2857x103 cells/mL, corynebacteria was 976x103 cells/mL and in the cases of coliforms 1161x103 cells/mL were obtained. Staphylococci showed a high sensitivity (>95%) to cephalothin, cotrimoxazole, enrofloxacin, and gentamicin, with a 41.2% resistance to penicillin and 11.8% to oxacillin. Both coagulase positive (CPS) and negative staphylococci (CNS) carried genes encoding enterotoxins in 21.6% of the first group and 41.9% in the second. The sea gene was the most detected 45.8% (n=24) between them, followed by seb with 29.2% and sec with 25.0%. The sed gene was not identified. We highlight the potential risk to public health in the possibility of strains of Staphylococcus spp. enterotoxin-producing genes that can cause staphylococcal food poisoning.

• Bacterial identification somatic cell count antimicrobial profile toxigenic Staphylococcus mastitis cow milk farms enterotoxins public health gene sea seb sec

Abstract in Portuguese:

A mastite bovina impacta negativamente a produção leiteira e pode acarretar riscos à saúde pública. O presente estudo teve como objetivo a avaliação da qualidade do leite bovino proveniente de pequenas propriedades na região de Botucatu/SP. Foi realizada a contagem de células somáticas (CCS), identificação dos patógenos envolvidos nas mastites, e realizado o perfil de sensibilidade aos antimicrobianos dos estafilococos isolados. Pesquisou se a presença de genes codificadores de enterotoxinas em isolados de estafilococos obtidos a partir do leite mastítico. Amostras de leite de quartos mamários individuais de vacas foram submetidas ao “California mastitis test” (CMT) e à CCS. Das 239 vacas em lactação provenientes de 21 rebanhos leiteiros avaliados (média = 11,4 animais/propriedade), dois (0,8%) animais apresentaram mastite clínica e, 86 (35,9%) mastite subclínica. 177 amostras de leite foram cultivadas em ágar sangue bovino 5% e ágar MacConckey e obteve-se 55 (31,1%) Staphylococcus spp., 25 (14,1%) Streptococcus spp., 45 (25,4%) Corynebacterium spp. e quatro (2,3%) coliformes. A média da CCS das amostras procedentes de todos os quartos mamários infectados avaliados foi de 1598x103 células/mL, enquanto que nos casos que foram isolados Staphylococcus spp. foi de 1362x103 células/mL, Streptococcus spp. 2857x103 células/mL, Corynebacterium spp. de 976x103 células/mL e nos casos de coliformes 1161x103 células/mL. Os estafilococos revelaram grande sensibilidade (>95%) à cefalotina, cotrimoxazol, enrofloxacina e gentamicina, com resistência de 41,2% à penicilina e 11,8% à oxacilina. Tanto estafilococos coagulase positivos (ECP) como negativos (ECN) revelaram genes codificadores de enterotoxinas em 21,6% do primeiro grupo e 41,9% no segundo. O gene sea foi o mais detectado 45,8% (n=24), seguido pelo seb com 29,2% e sec com 25,0%. O gene codificador da sed não foi identificado. Frente aos resultados, destaca-se o risco potencial à saúde pública pela possibilidade de veiculação de linhagens de Staphylococcus spp. carreadores de genes produtores de enterotoxinas, podendo ocasionar toxi-infecções alimentares.

• Identificação bacteriana contagem de células somáticas Staphylococcus leite bovinos propriedades rurais mastite enterotoxinas saúde pública genes sea seb sec

Abstract in English:

The term “equine asthma syndrome” (EAS) was recently proposed due to the resemblance of the equine disease to human asthma. Leukotrienes cause constriction of the bronchi, especially in the lower airways and increase mucus secretion in the respiratory system. Leukotriene B4 (LTB4) has been discovered as a strong chemotactic factor, which plays a role in neutrophil migration. The immunologic background of EAS remains not fully elucidated despite many studies on the pathogenesis. This study aimed to evaluate the LTB4 concentration in the bronchoalveolar lavage fluid (BALF) of horses with and without pulmonary inflammatory disease. Thirty-five mixed breed horses were studied and LTB4 was determined by using specific ELISA Kit. The horses were grouped by 2 different criteria for statistical analysis of data: 1) according to the values for BALF citology and 2) according to the detection of LTB4 in BALF. There was significant difference of effect of age on the LTB4 detection in equine BALF. Younger animals were the majority where it was possible to detect LTB4 values in LBA. In conclusion, there was an effect of age on the detection of LTB4 in equine BALF, where LTB4 levels were more easily detected in younger animals than older animals and the results of this study raise the possibility of considering future studies with the objective of establishing the real role and the best moment to detect LTB4 in BALF of the equine asthma syndrome.

• Leukotriene B4 equine asthma syndrome BALF horse IAD LTB4 RAO.

Abstract in Portuguese:

Recentemente, o termo “síndrome da asma equina” (SAE) foi proposto devido à semelhança da doença equina à asma humana. Os leucotrienos causam constrição dos brônquios, especialmente nas vias aéreas posteriores e aumentam a secreção de muco no sistema respiratório. O leucotrieno B4 (LTB4) foi descoberto como um forte fator quimiotático, que desempenha um papel na migração de neutrófilos. O fundo imunológico do SAE permanece não completamente elucidado apesar de muitos estudos sobre a patogênese. Este estudo teve como objetivo avaliar a concentração de LTB4 no lavado broncoalveolar (LBA) de equinos com e sem doença inflamatória pulmonar. Trinta e cinco cavalos de raças mistas foram estudados e o LTB4 foi determinado usando o kit ELISA específico. Os animais foram agrupados por dois critérios diferentes para análise estatística dos dados: 1) de acordo com os valores para citologia do LBA e 2) de acordo com a detecção do LTB4 no LBA. Houve diferença significativa do efeito da idade na detecção do LTB4 no LBA equino. Os animais mais jovens foram a maioria onde foi possível detectar os valores de LTB4 no LBA. Em conclusão, houve um efeito da idade na detecção de LTB4 em LBA equino, onde os níveis de LTB4 foram mais facilmente detectados em animais jovens do que em animais mais velhos e foi possível detectar a concentração de LTB4 no LBA equino e os resultados deste estudo levantam a possibilidade de considerar futuros estudos com o objetivo de estabelecer o real papel e o melhor momento para detectar LTB4 no LBA da síndrome asmática equina.

• Leucotrieno B4 síndrome asmática equina equinos cavalos LBA LTB4.

Abstract in English:

Fowls are the main reservoirs of the highly important food-originating pathogen called Campylobacter spp. and broilers’ meat and byproducts are the main vehicles of this microorganism. Increasing of Campylobacter spp. resistant strains to fluorquinolones, an antimicrobial class often employed in poultry farming and in human medicine has become a great concern to poultry breeders. In fact, several studies evaluated increasing bacterial resistance against these antimicrobial agents. The role of CmeABC efflux system has been underscored among the resistance mechanisms in Campylobacter spp. to fluorquinolones. This study investigated the occurrence of CmeABC efflux pump in 81 and 78 enrofloxacin resistant strains of Campylobacter jejuni and C. coli respectively, isolated from broilers collected from six abattoirs situated at São José do Vale do Rio Preto/RJ poultry center and from two commercial abattoirs situated at Metropolitan Region of Rio de Janeiro, from 2013 to 2016. The resistance to enrofloxacin was assessed by agar dilution to determine minimum inhibitory concentration (MIC). The CmeABC efflux system was investigated through the detection of genes genes cmeA, cmeB and cmeC by PCR. The activity of CmeABC efflux pump was investigated in 20 strains by using the efflux pump inhibitor Phenylalanine-Arginine β-Naphthylamide (PAβN). The three genes cmeA, cmeB and cmeC were detected in 94.3% of the strains (C. jejuni = 80 and C. coli = 70), whereas the system was absent or incomplete in 5.7% of strains (C. jejuni = 1 and C. coli = 8). MIC varied between 0.5μg/ml and 64μg/ml, and 88.7% of strains were enrofloxacin resistant and 11.3% featuring intermediate resistance. The inhibition of the efflux pump by PAβN reduced the MIC to enrofloxacin up to eight times in fifteen strains (75%). These results indicate that this system is frequent and active in Campylobacter spp. Resistant strains in the presence of enrofloxacin.

• Efflux pump CmeABC enrofloxacin Campylobacter spp. broiler chickens Gallus gallus domesticus Rio de Janeiro Brazil resistance chickens

Abstract in Portuguese:

As aves são os principais reservatórios de Campylobacter spp., importante patógeno de origem alimentar e a carne de frango e produtos derivados são os principais veículos desse microrganismo. O aumento de cepas de Campylobacter spp. resistentes às fluorquinolonas, uma classe antimicrobiana frequentemente empregada na avicultura e na medicina humana, tornou-se uma grande preocupação para os produtores de aves e vários estudos avaliaram o aumento da resistência bacteriana a esses antimicrobianos. O papel do sistema de efluxo CmeABC tem sido enfatizado entre os mecanismos de resistência em Campylobacter spp. à fluorquinolonas. O presente estudo investigou a ocorrência da bomba de efluxo CmeABC em 81 cepas de Campylobacter jejuni e 78 cepas de Campylobacter coli resistentes à enrofloxacina, isoladas de frangos de corte coletados em seis abatedouros situados no polo avícola de São José do Rio Preto/RJ e de dois abatedouros comerciais situados na Região Metropolitana do Rio de Janeiro, de 2013 a 2016. A resistência à enrofloxacina foi avaliada pelo método de diluição em ágar para determinar a concentração inibitória mínima (CIM). O sistema de efluxo CmeABC foi investigado através da detecção dos genes cmeA, cmeB e cmeC por PCR. A atividade da bomba de efluxo CmeABC foi investigada em 20 cepas utilizando o inibidor da bomba de efluxo Phenylalanine-Arginine β-Naftilamida (PAβN). Os três genes cmeA, cmeB e cmeC foram detectados em 94,3% das cepas (C. jejuni = 80 e C. coli = 70), enquanto o sistema estava ausente ou incompleto em 5,7% das cepas (C. jejuni = 1 e C coli = 8). A CIM variou entre 0,5μg/ml e 64μg/ml e 88,7% das cepas foram resistentes à enrofloxacina, enquanto 11,3% apresentaram resistência intermediária. A inibição da bomba de efluxo pelo PAβN reduziu a CIM da enrofloxacina até oito vezes em quinze cepas (75%). Estes resultados indicam que este sistema é frequente e ativo em cepas resistentes de Campylobacter spp. na presença de enrofloxacina.

• Bomba de efluxo CmeABC cepas Campylobacter spp. enrofloxacina frangos de corte Gallus gallus domesticus Rio de Janeiro Brasil resistência