Abstract in English:
Leishmaniasis is a parasitic disease with a worldwide distribution, transmitted to animals and humans through the blood meal of sand flies, caused by protozoa of the genus Leishmania. This report aims to describe the clinical, pathological, and molecular findings of mucocutaneous leishmaniasis caused by Leishmania enriettii in a guinea pig (Cavia porcellus). The animal presented ulcerated skin lesions in the right pinna. Samples from the lesion were evaluated by cytology, revealing the presence of amastigote forms of Leishmania spp. Histopathology showed a dermal inflammatory infiltrate consisting of macrophages, multinucleated giant cells, lymphocytes, plasma cells, and heterophils. The foam cells contained parasitophorous vacuoles filled with amastigotes. Molecular characterization identified the species as L. enriettii. The diagnosis of mucocutaneous leishmaniasis was based on morphological findings (macroscopic and microscopic) associated with molecular biology tests that allowed defining the etiological agent of the disease.
Abstract in Portuguese:
A leishmaniose é uma doença parasitária com distribuição mundial, transmitida a animais e humanos através do repasto sanguíneo de flebotomíneos, causada por protozoários do gênero Leishmania. Este relato tem como objetivo descrever os achados clínicos, patológicos e moleculares da leishmaniose mucocutânea causada por Leishmania enriettii em cobaias (Cavia porcellus). O animal apresentava lesões cutâneas ulceradas no pavilhão auricular direito. Amostras da lesão foram avaliadas por citologia, revelando a presença de formas amastigotas de Leishmania spp. A histopatologia mostrou um infiltrado inflamatório dérmico composto por macrófagos, células gigantes multinucleadas, linfócitos, plasmócitos e heterófilos. As células espumosas continham vacúolos parasitóforos cheios de amastigotas. A caracterização molecular identificou a espécie como L. enriettii. O diagnóstico da leishmaniose mucocutânea foi baseado em achados morfológicos (macroscópicos e microscópicos) associados a testes de biologia molecular que permitiram definir o agente etiológico da doença.
Abstract in English:
Three domestic guinea pigs (Cavia porcellus) from Ampére, Paraná State, Brazil, presenting crusted nodular lesions on the pinnae, snout, and digits of all limbs were examined at the University Veterinary Hospital of the Federal University of the Southern Border in February 2023. Cytological evaluation by fine-needle aspiration revealed Leishmania amastigotes within macrophages. Two animals were euthanized for further histopathological, immunohistochemical, parasitological, and molecular investigations. Skin samples exhibited a diffuse mixed inflammatory infiltrate, predominantly histiocytic, with macrophages densely parasitized by amastigotes. Immunohistochemistry (IHC) using an anti-mTXNPx monoclonal antibody confirmed the abundant presence of amastigotes in the skin, providing key diagnostic support. Liver sections showed mild lymphocytic infiltrates, with specific IHC labeling in pericentral hepatocytes indicating antigenic presence despite the absence of visible parasites. Kidneys, lungs, and spleen exhibited mild architectural changes with no detectable amastigotes on microscopy. Promastigote forms were successfully isolated in NNN/LIT medium from one liver sample. Molecular analysis using hsp70-targeted PCR and sequencing confirmed the presence of Leishmania DNA in the skin, spleen, and liver, identifying the species as Leishmania (Mundinia) enriettii. The absence of microscopically visible amastigotes in tissues, despite molecular and immunohistochemical evidence, underscores the value of a multimodal diagnostic approach. This study expands the known geographic distribution of L. enriettii in Paraná State and reinforces the guinea pig’s role as the only confirmed reservoir of this parasite in Brazil.
Abstract in Portuguese:
Três porquinhos-da-índia domésticos (Cavia porcellus), provenientes de Ampére, no estado do Paraná, Brasil, apresentando lesões nodulares crostosas no pavilhão auricular, focinho e dígitos de todos os membros, foram examinados na Unidade Hospitalar Veterinária da Universidade Federal da Fronteira Sul em fevereiro de 2023. A avaliação citológica por punção aspirativa com agulha fina revelou formas amastigotas de Leishmania no interior de macrófagos. Dois animais foram eutanasiados para realização de exames histopatológicos, imuno-histoquímicos, parasitológicos e moleculares. As amostras de pele apresentaram infiltrado inflamatório misto difuso, predominantemente histiocítico, com macrófagos densamente parasitados por amastigotas. A imuno-histoquímica (IHQ), utilizando anticorpo monoclonal anti-mTXNPx, confirmou a presença abundante de amastigotas na pele, contribuindo significativamente para o diagnóstico. As seções hepáticas revelaram infiltrado linfocitário discreto, com marcação IHQ específica em hepatócitos pericentrais, indicando presença antigênica mesmo na ausência de parasitos visíveis. Rins, pulmões e baço apresentaram alterações arquiteturais leves, sem detecção de amastigotas à microscopia. Formas promastigotas foram isoladas com sucesso em meio bifásico NNN/LIT a partir de uma amostra de fígado. A análise molecular por PCR direcionada ao gene hsp70, seguida de sequenciamento, confirmou a presença de DNA de Leishmania em amostras de pele, baço e fígado, com identificação da espécie como Leishmania (Mundinia) enriettii. A ausência de amastigotas nos tecidos viscerais, apesar da imuno-histoquímica e positividade molecular, reforça o valor de uma abordagem diagnóstica multimodal. Este estudo amplia a distribuição geográfica conhecida de L. enriettii no estado do Paraná e reforça o papel do porquinho-da-índia como único reservatório confirmado desse parasito no Brasil.
Abstract in English:
We describe an outbreak of leishmaniasis in seven guinea pigs (Cavia porcellus) in which nodular ulcerated skin lesions of varying sizes were observed in the nasal cavity, upper lip, pinnae, vulva, and periarticular region of the limbs. Cytologic exam of collected samples of the lesions in the auricle of one of the animals revealed macrophages containing parasitophorous vacuoles of approximately 4.0μm in diameter in their cytoplasm with morphology suggestive of Leishmania sp. Although skin lesions spontaneously regressed in two of the Guinea pigs, only one survived. All six animals that died were necropsied. Grossly, all animals showed bloody nodular cutaneous lesions with crusts. One of the guinea pigs had distended dark red and firm lungs. Histopathology of the skin lesions revealed histiocytic interstitial acanthotic dermatitis associated with a myriad of Leishmania organisms within macrophages cytoplasm. In the lung, the lesions were characteristic of broncho-interstitial pneumonia with focal infiltrates of neutrophils, epithelioid macrophages, and multinucleated giant cells containing 2µm basophilic amastigotes with morphology compatible with Leishmania spp. A focal granulomatous lesion ,associated with the causal agent in the lung is a novel description of leishmaniasis in guinea pigs caused by L. enriettii. The polymerase chain reaction (PCR) technique with mini-exon primer performed in samples of lesions from two affected guinea pigs was positive and equal to the reference strain, identifying Leishmania enriettii. The cytological, macroscopic, and histological lesions associated with the PCR technique allowed the diagnosis of leishmaniasis and the identification of the specie L. enriettii.
Abstract in Portuguese:
Descrevemos um surto de leishmaniose em sete cobaias (Cavia porcellus), com lesões cutâneas nodulares ulceradas de tamanhos variados observadas na cavidade nasal, lábio superior, pavilhões auriculares, vulva e região periarticular dos membros. No exame citológico foram encontrados macrófagos contendo vacúolos parasitóforos no citoplasma de aproximadamente 4.0μm em diâmetro com morfologia sugestiva de Leishmania sp. Apesar de regressão espontânea das lesões cutâneas terem ocorrido em duas das sete cobaias, apenas um sobreviveu. Seis dos sete animais afetados morreram e foram necropsiados. Macroscopicamente, todos os animais apresentaram lesões cutâneas nodulares, crostosas e sanguinolentas. Uma das cobaias tinha pulmões vermelho-escuros, distendidos e firmes. A histopatologia das lesões cutâneas revelou dermatite acantótica intersticial histiocítica associada a miríades de organismos de Leishmania no citoplasma de macrófagos. Nos pulmões as lesões eram características de pneumonia bronco-intersticial com infiltrado focal de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos epitelioides e células gigantes multinucleadas contendo amastigotas basofílicos de 2µm com morfologia compatível com Leishmania spp. Lesões granulomatosas focais associadas ao agente no pulmão são um achado inédito na leishmaniose causada por L. enriettii em cobaias. A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) com primer mini-exon realizada em amostras de lesões de duas cobaias afetadas foi positiva, identificando Leishmania enriettii. Os aspectos macroscópicos, citológicos, e histológicos associados à técnica da (PCR), permitiram o diagnóstico da leishmaniose e a identificação da espécie L. enriettii.