PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

Leishmaniasis is a parasitic disease with a worldwide distribution, transmitted to animals and humans through the blood meal of sand flies, caused by protozoa of the genus Leishmania. This report aims to describe the clinical, pathological, and molecular findings of mucocutaneous leishmaniasis caused by Leishmania enriettii in a guinea pig (Cavia porcellus). The animal presented ulcerated skin lesions in the right pinna. Samples from the lesion were evaluated by cytology, revealing the presence of amastigote forms of Leishmania spp. Histopathology showed a dermal inflammatory infiltrate consisting of macrophages, multinucleated giant cells, lymphocytes, plasma cells, and heterophils. The foam cells contained parasitophorous vacuoles filled with amastigotes. Molecular characterization identified the species as L. enriettii. The diagnosis of mucocutaneous leishmaniasis was based on morphological findings (macroscopic and microscopic) associated with molecular biology tests that allowed defining the etiological agent of the disease.

• Histopathology leishmaniasis rodent Leishmania enriettii protozoan

Abstract in Portuguese:

A leishmaniose é uma doença parasitária com distribuição mundial, transmitida a animais e humanos através do repasto sanguíneo de flebotomíneos, causada por protozoários do gênero Leishmania. Este relato tem como objetivo descrever os achados clínicos, patológicos e moleculares da leishmaniose mucocutânea causada por Leishmania enriettii em cobaias (Cavia porcellus). O animal apresentava lesões cutâneas ulceradas no pavilhão auricular direito. Amostras da lesão foram avaliadas por citologia, revelando a presença de formas amastigotas de Leishmania spp. A histopatologia mostrou um infiltrado inflamatório dérmico composto por macrófagos, células gigantes multinucleadas, linfócitos, plasmócitos e heterófilos. As células espumosas continham vacúolos parasitóforos cheios de amastigotas. A caracterização molecular identificou a espécie como L. enriettii. O diagnóstico da leishmaniose mucocutânea foi baseado em achados morfológicos (macroscópicos e microscópicos) associados a testes de biologia molecular que permitiram definir o agente etiológico da doença.

• Histopatologia leishmaniose roedor Leishmania enriettii protozoário

Abstract in English:

Three domestic guinea pigs (Cavia porcellus) from Ampére, Paraná State, Brazil, presenting crusted nodular lesions on the pinnae, snout, and digits of all limbs were examined at the University Veterinary Hospital of the Federal University of the Southern Border in February 2023. Cytological evaluation by fine-needle aspiration revealed Leishmania amastigotes within macrophages. Two animals were euthanized for further histopathological, immunohistochemical, parasitological, and molecular investigations. Skin samples exhibited a diffuse mixed inflammatory infiltrate, predominantly histiocytic, with macrophages densely parasitized by amastigotes. Immunohistochemistry (IHC) using an anti-mTXNPx monoclonal antibody confirmed the abundant presence of amastigotes in the skin, providing key diagnostic support. Liver sections showed mild lymphocytic infiltrates, with specific IHC labeling in pericentral hepatocytes indicating antigenic presence despite the absence of visible parasites. Kidneys, lungs, and spleen exhibited mild architectural changes with no detectable amastigotes on microscopy. Promastigote forms were successfully isolated in NNN/LIT medium from one liver sample. Molecular analysis using hsp70-targeted PCR and sequencing confirmed the presence of Leishmania DNA in the skin, spleen, and liver, identifying the species as Leishmania (Mundinia) enriettii. The absence of microscopically visible amastigotes in tissues, despite molecular and immunohistochemical evidence, underscores the value of a multimodal diagnostic approach. This study expands the known geographic distribution of L. enriettii in Paraná State and reinforces the guinea pig’s role as the only confirmed reservoir of this parasite in Brazil.

• Leishmania enriettii guinea pig Cavia porcellus infection Brazil

Abstract in Portuguese:

Três porquinhos-da-índia domésticos (Cavia porcellus), provenientes de Ampére, no estado do Paraná, Brasil, apresentando lesões nodulares crostosas no pavilhão auricular, focinho e dígitos de todos os membros, foram examinados na Unidade Hospitalar Veterinária da Universidade Federal da Fronteira Sul em fevereiro de 2023. A avaliação citológica por punção aspirativa com agulha fina revelou formas amastigotas de Leishmania no interior de macrófagos. Dois animais foram eutanasiados para realização de exames histopatológicos, imuno-histoquímicos, parasitológicos e moleculares. As amostras de pele apresentaram infiltrado inflamatório misto difuso, predominantemente histiocítico, com macrófagos densamente parasitados por amastigotas. A imuno-histoquímica (IHQ), utilizando anticorpo monoclonal anti-mTXNPx, confirmou a presença abundante de amastigotas na pele, contribuindo significativamente para o diagnóstico. As seções hepáticas revelaram infiltrado linfocitário discreto, com marcação IHQ específica em hepatócitos pericentrais, indicando presença antigênica mesmo na ausência de parasitos visíveis. Rins, pulmões e baço apresentaram alterações arquiteturais leves, sem detecção de amastigotas à microscopia. Formas promastigotas foram isoladas com sucesso em meio bifásico NNN/LIT a partir de uma amostra de fígado. A análise molecular por PCR direcionada ao gene hsp70, seguida de sequenciamento, confirmou a presença de DNA de Leishmania em amostras de pele, baço e fígado, com identificação da espécie como Leishmania (Mundinia) enriettii. A ausência de amastigotas nos tecidos viscerais, apesar da imuno-histoquímica e positividade molecular, reforça o valor de uma abordagem diagnóstica multimodal. Este estudo amplia a distribuição geográfica conhecida de L. enriettii no estado do Paraná e reforça o papel do porquinho-da-índia como único reservatório confirmado desse parasito no Brasil.

• Leishmania enriettii porquinho-da-índia Cavia porcellus infecção Brasil

Abstract in English:

We describe an outbreak of leishmaniasis in seven guinea pigs (Cavia porcellus) in which nodular ulcerated skin lesions of varying sizes were observed in the nasal cavity, upper lip, pinnae, vulva, and periarticular region of the limbs. Cytologic exam of collected samples of the lesions in the auricle of one of the animals revealed macrophages containing parasitophorous vacuoles of approximately 4.0μm in diameter in their cytoplasm with morphology suggestive of Leishmania sp. Although skin lesions spontaneously regressed in two of the Guinea pigs, only one survived. All six animals that died were necropsied. Grossly, all animals showed bloody nodular cutaneous lesions with crusts. One of the guinea pigs had distended dark red and firm lungs. Histopathology of the skin lesions revealed histiocytic interstitial acanthotic dermatitis associated with a myriad of Leishmania organisms within macrophages cytoplasm. In the lung, the lesions were characteristic of broncho-interstitial pneumonia with focal infiltrates of neutrophils, epithelioid macrophages, and multinucleated giant cells containing 2µm basophilic amastigotes with morphology compatible with Leishmania spp. A focal granulomatous lesion ,associated with the causal agent in the lung is a novel description of leishmaniasis in guinea pigs caused by L. enriettii. The polymerase chain reaction (PCR) technique with mini-exon primer performed in samples of lesions from two affected guinea pigs was positive and equal to the reference strain, identifying Leishmania enriettii. The cytological, macroscopic, and histological lesions associated with the PCR technique allowed the diagnosis of leishmaniasis and the identification of the specie L. enriettii.

• Leishmania enriettii guinea pig Cavia porcellus leishmaniasis

Abstract in Portuguese:

Descrevemos um surto de leishmaniose em sete cobaias (Cavia porcellus), com lesões cutâneas nodulares ulceradas de tamanhos variados observadas na cavidade nasal, lábio superior, pavilhões auriculares, vulva e região periarticular dos membros. No exame citológico foram encontrados macrófagos contendo vacúolos parasitóforos no citoplasma de aproximadamente 4.0μm em diâmetro com morfologia sugestiva de Leishmania sp. Apesar de regressão espontânea das lesões cutâneas terem ocorrido em duas das sete cobaias, apenas um sobreviveu. Seis dos sete animais afetados morreram e foram necropsiados. Macroscopicamente, todos os animais apresentaram lesões cutâneas nodulares, crostosas e sanguinolentas. Uma das cobaias tinha pulmões vermelho-escuros, distendidos e firmes. A histopatologia das lesões cutâneas revelou dermatite acantótica intersticial histiocítica associada a miríades de organismos de Leishmania no citoplasma de macrófagos. Nos pulmões as lesões eram características de pneumonia bronco-intersticial com infiltrado focal de neutrófilos, eosinófilos, macrófagos epitelioides e células gigantes multinucleadas contendo amastigotas basofílicos de 2µm com morfologia compatível com Leishmania spp. Lesões granulomatosas focais associadas ao agente no pulmão são um achado inédito na leishmaniose causada por L. enriettii em cobaias. A técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) com primer mini-exon realizada em amostras de lesões de duas cobaias afetadas foi positiva, identificando Leishmania enriettii. Os aspectos macroscópicos, citológicos, e histológicos associados à técnica da (PCR), permitiram o diagnóstico da leishmaniose e a identificação da espécie L. enriettii.

• Leishmania enriettii cobaia Cavia porcellus leishmaniose

Abstract in English:

Guinea pigs are animal models widely used in research related to developmental biology. The objective of this work was to demonstrate the process of formation and differentiation of urinary organs in females of the species in the prenatal period. Four females were used at 25, 30, 45 and >65 DG (days of gestation). The animals were dissected, and then macroscopic and microscopic descriptions of the urinary organs were performed. At 25 DG metanephros were present in the urogenital crest into the abdominal cavity. Collecting ducts and glomerular precursor cells could be visualized. After this period, metanephros underwent microstructural modifications to form the kidneys at the end of the prenatal period. After 30 DG, the renal parenchyma already had a cortex, where the glomerulus and proximal convoluted tubules were present; and the medulla, where distal convoluted tubules, collecting ducts, and pelvis were present. The pelvis of each kidney was drained by the ureters. The ureters also underwent tissue differentiation to be differentiated (mucosa with transitional epithelium and lamina propria of connective tissue, muscular, and adventitia) at the end of the prenatal period. The urinary vesicle also underwent tissue changes to form the tunics similar to those found in the ureters, with emphasis on the greater volume of the muscular tunica and the lamina propria that constituted the submucosa in this organ. The pelvic urethra was evidenced by a mucosa lined by transitional epithelium, submucosa, muscular and adventitia. Finally, a partial clitoral urethra and a urethral meatus in the prepuce of the clitoris were also evidenced. The urethral channel began to form with the emergence of the urethral plate and the urethral groove at 30 DG and thereafter with the fusion of the urethral folds to form a partially channeled urethra in the clitoris. A urethral meatus was observed in the most distal portion of the clitoral tissue, formed by the fusion of the prepuce. It is concluded that the urinary organs of guinea pig have similar development to that described in domestic animals, except for the partial clitoral urethra and evident urethral meatus.

• Urinary system guinea pig Cavia porcellus embryology experimental models metanephros rodents

Abstract in Portuguese:

Os porquinhos‑da‑índia são modelos animais amplamente utilizados em pesquisas relacionadas a biologia do desenvolvimento. O objetivo deste trabalho foi demonstrar o processo de formação e diferenciação dos órgãos urinários em fêmeas da espécie no período pré-natal. Foram utilizadas quatro fêmeas aos 25, 30, 45 e >65 DG (dias de gestação). Os animais foram dissecados e então, realizaram-se descrições macroscópicas e microscópicas dos órgãos urinários. Aos 25 DG os metanefros estavam presentes na crista urogenital da cavidade abdominal. Podiam ser visualizados ductos coletores e células precursoras glomerulares. Após este período, os metanefros sofreram modificações microestruturais para formar os rins ao final do período pré-natal. Após os 30 DG, o parênquima renal já apresentava um córtex, onde estavam presentes os glomérulos e túbulos convolutos proximais, e a medula onde estavam presentes túbulos convolutos distais, ductos coletores e a pelve. A pelve de cada rim era drenada pelos ureteres. Os ureteres também sofreram diferenciação tecidual para estarem com suas túnicas diferenciadas (mucosa com epitélio de transição e lâmina própria de tecido conjuntivo; muscular; e, adventícia) ao final do período pré-natal. A vesícula urinária também passou por modificações teciduais para formar as túnicas semelhantes as dos ureteres, com destaque para o maior volume da túnica muscular e a lâmina própria que constituiu a submucosa neste órgão. Uma uretra pélvica foi evidenciada por uma mucosa revestida por epitélio de transição, submucosa, muscular e adventícia. Por último, uma uretra parcialmente clitoriana e um meato uretral no prepúcio do clitóris também foi evidenciado. O canal uretral começou a se formar com o aparecimento da placa uretral e do sulco uretral aos 30 DG e posteriormente com a fusão das pregas uretrais para formar uma uretra parcialmente canalizada no clitóris. Observou-se um meato uretral na porção mais distal do tecido clitoriano, formado pela fusão do prepúcio. Conclui-se que os órgãos urinários do porquinho-da-índia possuem desenvolvimento semelhante ao descrito em animais domésticos, com exceção da uretra parcialmente clitoriana e do meato uretral evidente.

• Sistema urinário fêmeas porquinhos-daíndia Cavia porcellus embriologia metanefros modelos experimentais roedores

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fonseca E.T., Galindo L.T., Porcionatto M.A. & Miglino M.A. 2016. Culture, characterization and differentiation of neural precursors from the central nervous system of guinea pigs (Cavia porcellus Linnaeus, 1758). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):71-78. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal do Tocantins, BR-153 Km 112, Rural, Araguaína, Tocantins, TO 77804-970, Brazil. E-mail: erikafonseca@uft.edu.br Potentially neurogenic areas were initially identified by incorporation of bromodeoxyuridine (BrdU) in cells underlying the subventricular zone (SVZ) of the lateral ventricles wall, hippocampus and olfactory bulbs of newborn guinea pigs. Neural precursors from the SVZ were cultured in suspension, generating neurospheres (NSFs), which, upon dissociation were able to generate new NSFs. Upon culture in the absence of growth factors, cells dissociated from NSFs displayed evidence for neural differentiation, giving rise to cells from neural lineage. Flow cytometry analysis for of NSFs-derived cells after differentiation revealed approximately 13.3% nestin positive, 5.5% Beta-III-tubulin positive, 9% GFAP positive and 7.8% mGalC positive. Functional assays by measurement of calcium influx upon gamma butiric amino acid (GABA) and glutamate stimuli, revealed stimulation in differentiated cells, an indicator of neuronal differentiation. The ability of guinea pig SVZ cells to originate functional neurons in vitro is promising for research and towards a future use of neural stem cells in the therapy of neurological disorders.

• Central nervous system Cavia porcellus Guinea pigs stem cells sistema nervoso central guineas pig

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fonseca E.T., Galindo L.T., Porcionatto M.A. & Miglino M.A. 2016. Culture, characterization and differentiation of neural precursors from the central nervous system of guinea pigs (Cavia porcellus Linnaeus, 1758). [Cultura, caracterização e diferenciação de precursores neurais do sistema nervoso central de guineas pig (Cavia porcellus Linnaeus, 1758).] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):71-78. Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Federal do Tocantins, BR-153 Km 112, Rural, Araguaína, Tocantins, TO 77804-970, Brazil. E-mail: erikafonseca@uft.edu.br Áreas potencialmente neurogênicas foram identificadas por incorporação de bromodeoxiuridina (BrdU) na zona subventricular (SVZ) dos ventrículos laterais, hipocampo e bulbos olfatórios de cobaias neonatos. Precursores neurais provenientes da SVZ foram cultivados em suspensão, resultando na geração de neuroesferas (NSFs), que quando dissociadas foram capazes de proliferar e gerar novas NSFs. Quando cultivadas na ausência de fatores de crescimento, as células provenientes de NSFs dissociadas apresentaram evidências de diferenciação neuronal, dando origem a células da linhagem neural. Citometria de fluxo em células das NSFs após a diferenciação revelou aproximadamente 13,3% positivas para nestina, 5,5% positivas para Beta-III-tubulina, 9% positivas para GFAP e 7,8% positivas para mGalC. Testes de funcionalidade pela mensuração de influxo de cálcio após estímulo com ácido gama amino butírico (GABA) e glutamato revelaram a estimulação de células diferenciadas, um indicador de função neuronal. A capacidade de células da SVZ de fetos de cobaias originarem células neurais funcionais in vitro é promissora para a pesquisa e eventual uso terapêutico de células tronco em disordens do sistema nervoso.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Simões L.S., Rici R.E.G., Favaron P.O., Sasahara T.H.C., Barreto R.S.N., Borghesi J. & Miglino M.A. 2016. Ultrastructural analysis of the spermatogenesis in the guinea pig (Cavia porcellus). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):89-94. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: phelipe.favaron@yahoo.com.br Understanding of the reproductive function is essential for both, the establishment of appropriate management systems, and for the use of new species as animal models. In this study, we used light and electron microscopy to characterize the sexual development stages of the guinea pig (Cavia porcellus) in specimens of 30, 45 and 90 days of age. We observed the differentiation of spermatocytes only through transmission electron microscopy in the leptotene, zygotene and pachytene phases of meiosis, in 30-day-old animals. During puberty, there was differentiation of the germinative epithelium and formation of the acrosome. Spermatozoa, however, were not detected. Thus, we could infer that puberty happens after 45 days of age. Sexual maturity was evident in 90-day-old specimens. Our results showed that changes in the testicular germinative epithelium during the postnatal sexual development in guinea pig led to morphological changes, including the ones related to the development of Leydig and Sertoli cells, which are directly related to puberty. In this work, we provide new morphological subsidies for a better understanding of reproductive parameters of this species, enabling its use as an animal model in the field of the reproductive biology.

• Reproduction guinea pig reprodução porquinho-da-índia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Simões L.S., Rici R.E.G., Favaron P.O., Sasahara T.H.C., Barreto R.S.N., Borghesi J. & Miglino M.A. 2016. Ultrastructural analysis of the spermatogenesis in the guinea pig (Cavia porcellus). [Análise ultraestrutural da espermatogênese do porquinho-da-Índia (Cavia porcellus).] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(Supl.1):89-94. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: phelipe.favaron@yahoo.com.br A função reprodutiva é um fator de vital compreensão tanto para o estabelecimento de sistemas apropriados de manejo, quanto para o uso de novas espécies como modelos animais. Neste estudo através da microscopia de luz e eletrônica caracterizou-se a fase de desenvolvimento sexual do porquinho-da-Índia (Cavia porcellus) em espécimes de 30, 45 e 90 dias de desenvolvimento. Nos animais de 30 dias, a diferenciação dos espermatócitos foi visualizada somente na microscopia eletrônica de transmissão em leptóteno, zigóteno e paquíteno. Durante a puberdade, houve diferenciação do epitélio germinativo, formação do acrossoma, porém não foram evidenciados espermatozóides, assim, infere-se que a puberdade acontece a partir dos 45 dias de idade. A maturidade sexual foi evidente aos 90 dias de idade. Nossos resultados mostraram que ao longo do desenvolvimento sexual pós-natal do porquinho-da-Índia, mudanças no epitélio germinativo testicular levam há alterações morfológicas, inclusive com relação ao desenvolvimento das células de Sertoli e de Leydig, as quais estão diretamente relacionadas com a puberdade. Assim, novos subsídios morfológicos são fornecidos para um melhor entendimento dos parâmetros reprodutivos desta espécie, a fim de viabilizar sua utilização como modelo animal no campo da biologia reprodutiva.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Botelho A.F.M., Oliveira M.S., Soto-Blanco B. & Melo M.M. 2016. Computerized electrocardiography in healthy conscious guinea pigs (Cavia porcellus). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(12):1203-1208. Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Presidente Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 31275-013, Brazil. E-mail: anaflaviamabo@gmail.com The purpose of this study is to evaluate healthy conscious guinea pigs as a model for electrophysiology assessment and to describe normal electrocardiographic patterns in controlled laboratory environment, establishing the best QT formula for this method. Electrocardiographic recordings of fifty adult conscious guinea pigs were obtained using a computerized electrocardiography. The electrocardiographic measurements of three different tracings were analyzed. The results obtained established normal mean and range values for the parameters: heart rate, waves and intervals of P-QRS-T deflections, as well as the mean cardiac axis. Groups were separated by body weight: group 1 gathered animals with 500-699g and group 2 with animals 700-900g. No differences were found when measurements were compared between groups, showing no significant difference between weight/body sizes to the electrocardiographic parameters (P<0.05). The mean corrected QT values (QTc) obtained using diverse formulae were significantly different (P<0.05), were the most consistent was Van der Water (QTcV). QTcV values were strongly correlated (r=98) and 95% confidence interval 185.7 to 195.2ms.Considering its simplicity and reliability, the QTcV was deemed the most appropriate to be used for the correction of QT interval in conscious guinea pigs.The results of this study also suggest that the values found can be used as reference for the species.

• Electrocardiogram ECG eletrocardiograma

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Botelho A.F.M., Oliveira M.S., Soto-Blanco B. & Melo M.M. 2016. Computerized electrocardiography in healthy conscious guinea pigs (Cavia porcellus). [Eletrocardiografia computadorizada em cobaios (Cavia porcellus) saudáveis e conscientes.] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(12):1203-1208. Departamento de Clínica e Cirurgia Veterinárias, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Presidente Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 31275-013, Brazil. E-mail: anaflaviamabo@gmail.com O objetivo desse estudo foi avaliar cobaios hígidos e conscientes como modelos para estudos de eletrofisiologia e descrever os padrões eletrocardiográficos normais em ambiente laboratorial controlado, estabelecendo a melhor fórmula QT para esse método. Gravações eletrocardiográficas de cinquenta cobaios adultos conscientes foram obtidas usando eletrocardiografia computadorizada. As medidas eletrocardiográficas de três trechos diferentes foram analisadas. Os resultados estabeleceram média e desvio padrão para os parâmetros: frequência cardíaca, ondas e intervalos P-QRS-T, assim como o eixo cardíaco médio. Grupos foram separados de acordo com o peso: grupo 1 incluiu animais com 500-699g e o grupo 2 animais de 700-900g. Nenhuma diferença foi encontrada quando as medidas foram comparadas entre os grupos, mostrando que não há diferença significativa entre peso/tamanho corporal com os parâmetros eletrocardiográficos (p<0.05). As médias corrigidas dos valores do QT (QTc) obtidas usando diferentes fórmulas foram significativamente diferentes (p<0.05), sendo a mais consistente a de Van der Water (QTcV). Valores de QTcV fortemente correlacionam com o QT (r=98), com intervalo de confiança a 95% de 185.7 a 195.2 ms. Considerando a simplicidade e confiabilidade, o QTcV foi considerado apropriado para correção do intervalo QT em cobaios conscientes. Os resultados do presente estudo também sugerem que os valores encontrados possam ser utilizados como referência para essa espécie.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Silva F.M.O., Alcantara D., Carvalho R.C., Favaron P.O., Santos A.C., Viana D.C. & Miglino M.A. 2016. Development of the central nervous system in guinea pig (Cavia porcellus, Rodentia, Caviidae). Pesquisa Veterinária Brasileira 36(8):753-760. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: fernanda_fmos@hotmail.com This study describes the development of the central nervous system in guinea pigs from 12th day post conception (dpc) until birth. Totally, 41 embryos and fetuses were analyzed macroscopically and by means of light and electron microscopy. The neural tube closure was observed at day 14 and the development of the spinal cord and differentiation of the primitive central nervous system vesicles was on 20th dpc. Histologically, undifferentiated brain tissue was observed as a mass of mesenchymal tissue between 18th and 20th dpc, and at 25th dpc the tissue within the medullary canal had higher density. On day 30 the brain tissue was differentiated on day 30 and the spinal cord filling throughout the spinal canal, period from which it was possible to observe cerebral and cerebellar stratums. At day 45 intumescences were visualized and cerebral hemispheres were divided, with a clear division between white and gray matter in brain and cerebellum. Median sulcus of the dorsal spinal cord and the cauda equina were only evident on day 50. There were no significant structural differences in fetuses of 50 and 60 dpc, and animals at term were all lissencephalic. In conclusion, morphological studies of the nervous system in guinea pig can provide important information for clinical studies in humans, due to its high degree of neurological maturity in relation to its short gestation period, what can provide a good tool for neurological studies.

• Nervous system embryology guinea pig avia porcellus sistema nervoso embriologia

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Silva F.M.O., Alcantara D., Carvalho R.C., Favaron P.O., Santos A.C., Viana D.C. & Miglino M.A. 2016. Development of the central nervous system in guinea pig (Cavia porcellus, Rodentia, Caviidae). [Desenvolvimento do sistema nervoso central em guinea pig (Cavia porcellus, Rodentia, Caviidae).] Pesquisa Veterinária Brasileira 36(8):753-760. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: fernanda_fmos@hotmail.com Este estudo descreve o desenvolvimento do sistema nervoso central em guinea pig do 12º dia pós-concepção (dpc) até ao nascimento. No total, 41 embriões e fetos foram analisados macroscopicamente e por microscopia de luz e eletrônica. O fechamento do tubo neural foi observado no dia 14 e o desenvolvimento da medula espinhal e diferenciação das vesículas primitivas do sistema nervoso central foram observados no dia 20. Histologicamente, o tecido cerebral indiferenciado foi observado como uma massa de tecido mesenquimal entre os dias 18 e 20 e no 25º dia o tecido no interior do canal medular apresentou maior densidade. No dia 30 o tecido cerebral apresentou-se diferenciado, período no qual a medula espinhal preenchia todo o canal vertebral e foi possível observar os estratos cerebral e cerebelar. No dia 45 as intumescências cervical e lombar foram visualizadas e os hemisférios cerebrais estavam divididos, com uma clara distinção entre substância branca e cinzenta no cérebro e cerebelo. O sulco mediano dorsal da medula espinhal e a cauda equina foram evidentes apenas no dia 50. Não houve diferenças estruturais significativas em fetos de 50 e 60 dpc e animais a termo eram todos lisencefálicos. Estudos morfológicos do sistema nervoso em guinea pig podem fornecer informações importantes para estudos clínicos em seres humanos devido ao alto grau de maturidade neurológica em relação ao seu período de gestação curto, fato que servir como excelente ferramenta em estudos neurológicos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Vásquez B. & del Sol M. 2014. [Stereology of the bulbourethral gland of the rabbit (Oryctolagus cuniculus) and guinea pig (Cavia porcellus).] Estereologia das glândulas bulbouretrais do coelho (Oryctolagus cuniculus) e cobaia (Cavia porcellus). Pesquisa Veterinária Brasileira 34(12):1245-1248. Universidad de La Frontera, Avenida Francisco Salazar 01145, Casilla 54-D, Temuco, Chile. E-mail: belgica.vasquez@ufrontera.cl The bulbourethral glands (GBU) in the rabbit (Oryctolagus cuniculus) and guinea pig (Cavia porcellus) play an important role in reproductive physiology. However, histological and stereological aspects are scarce. Thus, the objective of this research was to compare stereological characteristics between the rabbit and guinea pig GBU as a first approximation in the understanding of morphometric variables involved in reproductive processes. Five rabbits were used and five adult male guinea pigs, healthy, obtained from the Vivarium of the Universidad de La Frontera, Temuco, Chile. Pelvic region was dissected, isolating the GBU of each animal. Was determined weight and volume of each gland. These were fixed in buffered formalin for 24 hours and embedded in paraplast. Serial sections of 4 microns thick, were stained with HE, for stereological analysis. The average glandular cells in the rabbit’s GBU was 19.50x105mm3 (SD 2.35), and for the guinea pig 10.57x105mm3 (SD 2.07), and the average percentage of glandular tissue was 25.52% (SD 2.20) and 17.20% (SD 3.33) respectively. All stereological parameters were compared statistically significant difference (p<0.0001). These differences could be explained because there is a closer epithelial cell secretory acinar, smaller lumen diameter and nucleus to cytoplasm ratio in the rabbit’s GBU. Thus, the acini of the GBU had a greater number of cells per mm3 in the rabbit’s GBU. These parameters can be influenced by hormonal factors, age, seasonal and environmental among others. Consider the morphological characteristics of the GBU in these animals could affect the successful reproduction by the male.

• Bulbourethral gland glândula bulbouretral

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Vásquez B. & del Sol M. 2014. [Stereology of the bulbourethral gland of the rabbit (Oryctolagus cuniculus) and guinea pig (Cavia porcellus).] Estereologia das glândulas bulbouretrais do coelho (Oryctolagus cuniculus) e cobaia (Cavia porcellus). Pesquisa Veterinária Brasileira 34(12):1245-1248. Universidad de La Frontera, Avenida Francisco Salazar 01145, Casilla 54-D, Temuco, Chile. E-mail: belgica.vasquez@ufrontera.cl As glândulas bulbouretrais (GBU) no coelho (Oryctolagus cuniculus) e na cobaia (Cavia porcellus) desempenham um papel importante na fisiologia reprodutiva. No entanto, seus aspectos histológico e estereológico são escassos. Assim, o objetivo desta pesquisa foi comparar características estereológicas entre as GBU do coelho e da cobaia como um primeiro passo para a compreensão das variáveis morfométricas que participam nos processos reprodutivos. Foram utilizados 5 coelhos e 5 cobaias adultos machos, saudáveis, obtidos do Biotério da Universidade de La Frontera, Temuco, Chile. A região pélvica foi dissecada isolando-se a GBU de cada animal. Determinou-se o peso e o volume de cada glândula. Estas foram fixadas em formalina tamponada durante 24 horas e incluídas em paraplast. Cortes seriados de 4 &#956;m de espessura foram corados com HE para análise estereológica. A média de células glandulares na GBU do coelho foi 19,50 x 105mm3 (DP 2,35) e da cobaia 10,57 x 105mm3 (DP 2,07) e a porcentagem média de tecido glandular foi de 25,52% (DP 2,20) e 17,20% (DP 3,33), respectivamente. Todos os parâmetros estereológicos comparados tiveram uma diferença estatisticamente significativa (p<0,0001). Estas diferenças poderiam ser explicadas porque há maior proximidade celular do epitélio secretor, menor diâmetro do lúmen dos ácinos e da relação núcleo citoplasma na GBU do coelho. Assim, os ácinos da GBU apresentam maior quantidade de células por mm3 do que na GBU do coelho. Estes parâmetros podem ser influenciados por fatores hormonais, etários, sazonais e ambientais, entre outros. Considerar as características morfológicas da GBU nesses animais poderia condicionar o êxito da reprodução por parte do macho.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Melo E.S.P., Souza I.I.F., Ramos C.A.N., Osório A.L.A.R., Nascimento V.A. & Araújo F.R. 2014. [Skin test with recombinant protein of Mycobacterium bovis as antigen in Cavia porcellus.] Teste intradérmico com proteínas recombinantes de Mycobacterium bovis como antígenos em Cavia porcellus. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(10):957-962. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Av. Senador Filinto Mülller 2443, Cidade Universitária, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: elainespmelo@hotmail.com The intradermal skin test for diagnosis of bovine tuberculosis has been used the purified protein derivative (PPD) of Mycobacterium bovis, that is able to induce a hypersensitivity reaction in infected animals. However, shows low specificity due to the occurrence of cross reactions with other mycobacteria. Thus, the aim of this study was to produce recombinant proteins (ESAT-6, PE13, PE5 and ESX-1) of Mycobacterium bovis and assess them as antigens in skin test using guinea pigs (Cavia porcellus) as a model, and check if the conditions employed in the purification (native or denaturing condition) interfere in the antigenic performance of these proteins. The proteins were tested in guinea pigs previously sensitized with inactivated M. bovis strain AN5, individually (160 µg/µl), or as a mixed cocktail (40 µg each). The cocktail of proteins induced hypersensitivity reactions in sensitized animals significantly (p=0.002) higher than those observed in non-sensitized animals, allowing differentiation. On the other hand, the proteins individually were not able to promote this differentiation. The conditions of solubilization and purification influenced the antigenic performance of the protein ESAT-6, since, when produced in denaturing condition triggered nonspecific reaction in non-sensitized animals. Whereas when produced under native conditions and used at concentrations (6, 12, 24 and 48µg/µl) induced a significant response only in sensitized animals, confirming its potential as antigen.

• Tuberculosis Mycobacterium bovis tuberculose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Melo E.S.P., Souza I.I.F., Ramos C.A.N., Osório A.L.A.R., Nascimento V.A. & Araújo F.R. 2014. [Skin test with recombinant protein of Mycobacterium bovis as antigen in Cavia porcellus.] Teste intradérmico com proteínas recombinantes de Mycobacterium bovis como antígenos em Cavia porcellus. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(10):957-962. Programa de Pós-Graduação em Ciência Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Mato Grosso do Sul, Av. Senador Filinto Mülller 2443, Cidade Universitária, Campo Grande, MS 79070-900, Brazil. E-mail: elainespmelo@hotmail.com O teste intradérmico para o diagnóstico da tuberculose bovina utiliza derivados proteicos purificados (PPD) de Mycobacterium bovis que são capazes de induzir reações de hipersensibilidade em animais infectados. No entanto, apresenta baixa especificidade devido à ocorrência de reações cruzadas com outras micobactérias. Neste sentido, o objetivo desse trabalho foi produzir proteínas recombinantes (ESAT-6, PE13, PE5 e ESX-1) de Mycobacterium bovis e avaliá-las como antígenos em teste intradérmico utilizando Cavia porcellus como modelo, e verificar se as condições empregadas na purificação (nativa ou desnaturante) interferem no desempenho antigênico dessas proteínas. As proteínas foram testadas em Cavia porcellus previamente sensibilizados com cepa M. bovis AN5 inativada, individualmente (160 µg) ou combinadas na forma de um coquetel (40 µg cada). O coquetel de proteínas induziu reações de hipersensibilidade nos animais sensibilizados significativamente superiores (p=0,002) as observadas nos animais não sensibilizados, possibilitando diferenciação. No entanto, as proteínas isoladamente não foram capazes de promover essa diferenciação. As condições de solubilização e purificação influenciaram o desempenho antigênico da proteína ESAT-6, pois, quando produzida em condição desnaturante desencadeou reações inespecíficas nos animais não sensibilizados, enquanto que aquela produzida em condições nativas e aplicada em concentrações de 6, 12, 24 e 48µg induziu reações significativas apenas nos animais sensibilizados, confirmando o seu potencial como antígeno.