PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Meneghel M., Dall’Acqua P.C., Ambrogi M., Leão B.C.S., Rocha-Frigoni N.A.S. & Mingoti G.Z. 2017. Lipid content and cryotolerance of in vitro-produced bovine embryos treated with forskolin before vitrification. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):395-400. Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Estadual Paulista, Rua Clóvis Pestana 793, Dona Amélia, Araçatuba, SP 16050-680, Brazil. E-mail: gmingoti@fmva.unesp.br The aim of the present study was to evaluate the intracytoplasmic lipid content, development and cryotolerance of in vitro-produced bovine embryos treated with different concentrations of forskolin before vitrification. Embryos were produced from abattoir-derived ovaries and allocated into four groups. In the treatment groups, forskolin was added to the in vitro culture medium on Day 6 and incubated for 24 hours in one of the following concentrations: 2.5&#956;M (Forsk 2.5 group), 5.0&#956;M (Forsk 5.0 group) or 10.0&#956;M (Forsk 10.0 group). Embryos from the control group were cultured without forskolin. On Day 7 of culture, the expanded blastocysts were stained with the lipophilic dye Sudan Black B for determination of the intracytoplasmic lipid content or were cryopreserved via the Vitri-Ingá® procedure. Although there were no significant differences (P>0.05) in the blastocyst rates between the Control group (44.9%) and the other treatments, the embryo production was lower (P<0.05) in Forsk 10.0 group (38.8%) compared to Forsk 2.5 (50.5%) and Forsk 5.0 (54.7%) groups. The intracytoplasmic lipid content (expressed in arbitrary units of pixels) in blastocysts from the Control group (1.00±0.03) was similar (P>0.05) to that found in Forsk 2.5 (0.92±0.03) and Forsk 10.0 groups (1.06±0.03) groups; however the lipid accumulation in blastocysts from Forsk 5.0 group (0.82±0.04) was lower than in the Control group (P<0.05). Based on these results, Forsk 5.0 treatment was tested for cryotolerance and it was observed that the blastocoel re-expansion rate evaluated 24 hours after warming was greater (P<0.05) in Forsk 5.0 group (72.2%) compared to the Control group (46.2%). In conclusion, pre-treatment with forskolin at a concentration of 5.0 &#956;M for 24 hours before vitrification is effective in reducing the intracytoplasmic lipid content and, consequently, improves cryotolerance of IVP bovine embryos.

• Lipid content cryotolerance forskolin vitrification embryo cryotolerance lipídios intracitoplasmáticos criotolerância forskolin vitrificação embrião

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Meneghel M., Dall’Acqua P.C., Ambrogi M., Leão B.C.S., Rocha-Frigoni N.A.S. & Mingoti G.Z. 2017. Lipid content and cryotolerance of in vitro-produced bovine embryos treated with forskolin before vitrification. [Acúmulo de lipídios intracitoplasmáticos, desenvolvimento e criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro e tratados com diferentes concentrações de forskolin antes da vitrificação.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):395-400. Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Faculdade de Medicina Veterinária, Universidade Estadual Paulista, Rua Clóvis Pestana 793, Dona Amélia, Araçatuba, SP 16050-680, Brazil. E-mail: gmingoti@fmva.unesp.br Os embriões foram produzidos a part ir de ovários obtidos em abatedouro e foram alocados em quatro grupos experimentais. Nos grupos tratados, o forskolin foi adicionado ao meio de cultivo in vitro no dia 6 do cultivo e os embriões foram incubados durante 24 horas com uma das seguintes concentrações: 2,5&#956;M (grupo Forsk 2,5), 5,0&#956;M (grupo Forsk 5,0) ou 10,0&#956;M (grupo Forsk 10,0). Os embriões do grupo controle foram cultivados na ausência de forskolin. No dia 7 do cultivo, os blastocistos expandidos foram corados com o corante lipofílico Sudan Black B para a determinação do teor de lípidos intracitoplasmáticos ou foram criopreservados através do protocolo Vitri-Ingá®. Não foi observada diferença significativa (P>0,05) na taxa de produção de blastocistos entre o grupo Controle (44,9%) e os demais tratamentos, todavia observou-se menor produção de embriões (P<0,05) no grupo Forsk 10,0 (38,8%) em comparação com os grupos Forsk 2,5 (50,5%) e Forsk 5,0 (54,7%). A quantidade de lipídeos intracitoplasmáticos do grupo Controle (1,00±0,03) foi semelhante (P>0,05) a dos grupos Forsk 2,5 (0,92±0,03) e Forsk 10,0 (1,06±0,03); no entanto, o acúmulo de lípidos nos blastocistos do grupo Forsk 5.0 (0,82 ± 0,04) foi menor do que no grupo controle (P<0,05). A partir destes resultados, o grupo Forsk 5,0 foi testado quanto à criotolerância e foi observado que a taxa de re-expansão da blastocele 24 horas após o aquecimento foi maior (P<0,05) no grupo Forsk 5,0 (72,2%) quando comparado ao grupo Controle (46,2%). Em conclusão, o pré-tratamento com forskolin na concentração de 5,0 &#956;M durante 24 horas antes da vitrificação foi eficiente para promover a redução da quantidade de lipídeos intracitoplasmáticos e, consequentemente, melhorou a criotolerância de embriões bovinos produzidos in vitro.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Bezerra L.R., Oliveira W.D.C., Silva T.P.D., Torreão J.N.C., Marques C.A.T., Araújo M.J. & Oliveira R.L. 2017. Comparative hematological analysis of Morada Nova and Santa Inês ewes in all reproductive stages. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):408-414. Departamento de Zootecnia, Universidade Federal do Piauí, Bom Jesus, PI 64 900-000, Brazil. E-mail: tairon.mvet@gmail.com Hematologic analysis provides reliable information on the health status of animals. It is an important variable in the assessment of adaptive and productive capacity of breeds under unfavorable environmental conditions. It is an assessment that combined with other genetic and environmental factors and management can become useful for the future sustainability of mainstream agriculture in a hot environment. Adaptive capacity is affected by some factors such as breed, pregnancy and lactation. Therefore, hematological profile is an important indicator of animal health and production. The objective of this study was to perform the comparative hematological analysis of Santa Inês and Morada Nova breeds (native ewes from Brazil) in all different reproductive stages. Twenty Santa Ines and 20 Morada Nova sheep distributed in a completely randomized design in a split-plot arrangement over time were used. To obtain blood counts, blood samples were collected by jugular venipuncture every 14 days, always in the morning, before the animals were released into the pasture. The Morada Nova breed had higher hemoglobin and total leukocyte count than Santa Inês breed. Regarding the influence of pregnancy and puerperium on the eritrogram, there was an increment in red blood cell, hemoglobin and packed cell volume of both breeds in middle pregnancy. However, had a reduction in late pregnancy. There were a reestablishment of the blood cell counts during the puerperium period. It was verified an increase on neutrophil: lymphocyte ratio indicated that ewes in the late pregnancy, postpartum and puerperium were under stress conditions compared to others reproductive stages. The total plasma proteins also increased during this period to compensate for the high nutritional requirements of the fetus, and these levels remained high until the end of the puerperal phase, when the lambs were weaned. The pregnancy and puerperium influenced all erythrocyte indices and changed the total leukocyte count.

• Hematological analysis Morada Nova ewes Santa Inês ewes reproductive stages hemoglobin leukocyte count parturition análise hematológica comparativa Morada Nova Santa Inês leucócitos hemoglobina parto

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Bezerra L.R., Oliveira W.D.C., Silva T.P.D., Torreão J.N.C., Marques C.A.T., Araújo M.J. & Oliveira R.L. 2017. Comparative hematological analysis of Morada Nova and Santa Inês ewes in all reproductive stages. [Análise hematológica comparativa de ovelhas Morada Nova e Santa Inês em todos os estágios reprodutivos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(4):408-414. Departamento de Zootecnia, Universidade Federal do Piauí, Bom Jesus, PI 64 900-000, Brazil. E-mail: tairon.mvet@gmail.com A análise hematológica fornece informação confiável sobre a saúde dos animais. É uma variável importante na avaliação da capacidade adaptativa e produtiva das raças sob condições ambientais desfavoráveis. É uma avaliação que aliada a outros fatores genéticos, ambientais e de manejo pode se tornar cada vez mais útil para a sustentabilidade futura da agricultura convencional em um ambiente quente. A capacidade adaptativa é afetada por alguns fatores como raça, gestação e lactação. Portanto, o perfil hematológico é um indicador importante da saúde e produção animal. O objetivo deste estudo foi realizar a análise hematológica comparativa de ovelhas Morada Nova e Santa Inês (ovelhas nativas do Brasil) em todos os estágios reprodutivos. Foram utilizadas 20 ovelhas Santa Inês e 20 Morada Nova distribuídas em um delineamento inteiramente casualizado, em parcelas subdivididas e medidas repetidas no tempo. Para a análise do sangue, foram coletadas amostras por venopunção jugular a cada 14 dias, sempre colhidas pela manhã, antes que os animais fossem soltos no pasto. A raça Morada Nova apresentou maior teor de hemoglobina e contagem total de leucócitos que a raça Santa Inês. Em relação à influência da gestação e do puerpério sobre o eritrograma, observou-se que houve um incremento dos valores da contagem dos eritrócitos, hematócrito e hemoglobina até o terço médio da gestação, reduzindo no final da gestação e restabelecendo novamente no período puerperal. Foi verificado um aumento na relação neutrófilo/linfócito indicando que ovelhas no final da gestação, no pós-parto e puerpério estavam sob condição de estresse comparado com os outros estágios reprodutivos. As proteínas plasmáticas totais também aumentaram durante o período gestacional para compensar os altos requisitos nutricionais do feto, e estes níveis permaneceram elevados até ao final da fase de puerpério quando os cordeiros foram desmamados. A gestação e o puerpério influenciaram todos os índices eritrocitários com alteração da contagem total de leucócitos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Magalhães F.C., Santos T.M., Assis D.C., Ornellas C.D., Pinto P.A. & Santos W.M. 2017. [Diagnosis and risk factors of bovine taeniasis-cysticercosis complex in Salinas, Minas Gerais, Brazil.] Diagnóstico e fatores de risco do complexo teníase-cisticercose bovina no município de Salinas, Minas Gerais. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):205-209. Departamento de Tecnologia e Inspeção de Produtos de Origem Animal, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: wagnerlmds@ufmg.br In order to diagnose the situation of bovine taeniasis-cysticercosis complex in the municipality of Salinas, Minas Gerais, Brazil, blood samples were collected from 355 cattle in 18 randomly selected farms. A socioeconomic questionnaire was filled in each farm for the analysis of factors which favor the maintenance of the taeniasis-cysticercosis complex. An epidemiological survey of human taeniasis was performed through analyses of the Municipal Health Department in the 2007-2010 period. A prevalence of 4.7% for bovine cysticercosis and the frequency of 0.29, 0.36, 0.24 and 0.24% for human taeniasis, during the evaluated period, was found. Among the risk factors, a statistically significant correlation was found between the occurrence of bovine cysticercosis and the ingestion of undercooked meat. It was concluded that bovine cysticercosis is present in the municipality of Salinas, due to inefficient heat treatment of the meat as the main risk factor for maintenance of the taeniasis-cysticercosis complex, reinforcing the need to adopt control measures with continuous epidemiological and health surveillance.

• Cysticercosis taeniasis cisticercose teníase

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Magalhães F.C., Santos T.M., Assis D.C., Ornellas C.D., Pinto P.A. & Santos W.M. 2017. [Diagnosis and risk factors of bovine taeniasis-cysticercosis complex in Salinas, Minas Gerais, Brazil.] Diagnóstico e fatores de risco do complexo teníase-cisticercose bovina no município de Salinas, Minas Gerais. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):205-209. Departamento de Tecnologia e Inspeção de Produtos de Origem Animal, Escola de Veterinária, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antônio Carlos 6627, Belo Horizonte, MG 30123-970, Brazil. E-mail: wagnerlmds@ufmg.br Com o objetivo de diagnosticar a situação do complexo teníase-cisticercose bovina no município de Salinas, Minas Gerais, foram coletadas amostras de sangue de 355 bovinos distribuídos em 18 propriedades rurais, sorteadas aleatoriamente. Em cada propriedade, foi aplicado um questionário socioeconômico para a análise de fatores que favorecem a manutenção do complexo teníase-cisticercose bovina. Foi realizado também um levantamento epidemiológico dos casos de teníase diagnosticados nos laboratórios credenciados pela Secretaria Municipal de Saúde de Salinas, no período de 2007 a 2010. A prevalência de cisticercose bovina foi de 4,70% enquanto as prevalências de teníase, encontradas durante os quatro períodos avaliados, foram de 0,29%, 0,36%, 0,24% e 0,24%. Entre os fatores de risco para a manutenção do complexo teníase-cisticercose analisados, foi observada uma relação estatisticamente significativa entre a ocorrência de cisticercose bovina e a ingestão de carne malpassada pelos entrevistados. Foi concluído que a cisticercose bovina está presente no município de Salinas, Minas Gerais, sendo o tratamento térmico ineficiente da carne bovina o principal fator de risco para a manutenção do complexo teníase-cisticercose, o que reforça a necessidade da adoção de medidas de controle com contínua vigilância epidemiológica e sanitária.

Abstract in English:

ABSTRACT.- García J.A., Cantón G.J., García B.L., Micheloud J.F., Campero C.M., Späth E.J.A. & Odriozola E.R. 2017. Retrospective analysis of cattle poisoning in Argentina (2000-2013). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):210-214. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA), Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Ruta Nacional 226 Km 73,5, (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina. E-mail: garciajuanagustin@hotmail.com A retrospective analysis (2000 to 2013) of cattle poisoning caused by toxic plants and other compounds was carried out in the Pampas region of Argentina by the Animal Health Group of INTA-EEA, Balcarce. During this period, 1263 reports of diseases of different etiologies (infectious, parasitic, toxic, metabolic and miscellaneous) were recorded in cattle, by collecting anamnestic, clinical and pathological information. A toxic etiology was diagnosed in 21.1% of these reports. Iatrogenic poisoning caused by ionophores was the most frequently recorded etiology. Consumption of toxic plants (Wedelia glauca, Solanum glaucophyllum, among others), mycotoxins (Claviceps purpurea, Claviceps paspali, Epichloë coenophiala, among others), and plants producing cyanide and nitrates/nitrites were also commonly diagnosed. The high frequency of toxic episodes and the difficulties in their diagnosis by practitioners in our livestock production systems emphasizes the importance of this report.

• Poisoning

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- García J.A., Cantón G.J., García B.L., Micheloud J.F., Campero C.M., Späth E.J.A. & Odriozola E.R. 2017. Retrospective analysis of cattle poisoning in Argentina (2000-2013). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):210-214. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce (EEA), Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA), Ruta Nacional 226 Km 73,5, (7620) Balcarce, Buenos Aires, Argentina. E-mail: garciajuanagustin@hotmail.com A retrospective analysis (2000 to 2013) of cattle poisoning caused by toxic plants and other compounds was carried out in the Pampas region of Argentina by the Animal Health Group of INTA-EEA, Balcarce. During this period, 1263 reports of diseases of different etiologies (infectious, parasitic, toxic, metabolic and miscellaneous) were recorded in cattle, by collecting anamnestic, clinical and pathological information. A toxic etiology was diagnosed in 21.1% of these reports. Iatrogenic poisoning caused by ionophores was the most frequently recorded etiology. Consumption of toxic plants (Wedelia glauca, Solanum glaucophyllum, among others), mycotoxins (Claviceps purpurea, Claviceps paspali, Epichloë coenophiala, among others), and plants producing cyanide and nitrates/nitrites were also commonly diagnosed. The high frequency of toxic episodes and the difficulties in their diagnosis by practitioners in our livestock production systems emphasizes the importance of this report.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com Sustainable control of gastrointestinal nematodes (GIN) in small ruminants has been based on the use of alternative methods, including targeted selective treatment, such as FAMACHA. Another GIN control alternative is the use of herbal medicines, although in many cases their use is based on empirical knowledge. Biopolymer nanoformulations has been investigated to maximize the essential oil effects against sheep gastrointestinal nematodes. The aim of the present study was to combine a Eucalyptus staigeriana essential oil nanoemulsion (EsNano) with FAMACHA as an alternative control for sheep haemonchosis. The study was performed over six months at a commercial sheep farm located in a semiarid region of Northeast Brazil. Initially, a fecal egg count reduction test (FECRT) in sheep with levamisole, ivermectin and oxfendazole in sheep was performed used to determine the most effective anthelmintic to use as the positive control. Levamisole has been selected because it showed efficacy superior to 95%. EsNano was obtained and then its physicochemical properties were characterized. The average (±SE) size of the particles in the nanoemulsion was 276.8 (±12.3) nm with bimodal distribution and polydispersity. Nine visits were performed, from April to September 2013, with an interval of 17 days. One hundred sixty-two male and female sheep were divided into three groups (n=54 each) and were treated when FAMACHA score was 3, 4, or 5: G-EsNano 250mg kg-1 EsNano; G-Lev 7.5mg kg-1 levamisole (positive control), and G-Neg was not treated (negative control). Feces from sheep were collected to quantify the number of eggs per gram of feces (epg) and to identify nematode genera. Sheep weight gain was monitored. The epg data for each group and the average sheep weight gains were analyzed by variance analysis and compared with the Tukey’s test (P<0.05). Significant difference between the number of animals treated with EsNano and levamisole was not observed in any visit (P>0.05). The epg variation was similar in the G-EsNano and G-Lev groups on visits (P>0.05), except the second and fifth evaluation in the epg groups were significantly different (P<0.05). Haemonchus spp. was the most prevalent nematode. There was no significant weight gain in any of the treated groups (P<0.05). The combination of phytotherapy and FAMACHA can be an alternative to minimize the use of synthetic anthelmintics to control resistant GIN populations of small ruminants.

• Haemonchus contortus essential oil chitosan óleo essencial quitosana

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ribeiro W.L.C., Camurça-Vasconcelos A.L.F., Santos J.M.L., Macedo I.T.F., Ribeiro J.C., Oliveira E.F., Paula H.C.B. & Bevilaqua C.M.L. 2017. The use of Eucalyptus staigeriana nanoemulsion for control of sheep haemonchosis. [Uso da nanoemulsão de Eucalyptus staigeriana no controle da hemoncose em ovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):221-226. Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias, Faculdade de Veterinária, Universidade Estadual do Ceará, Avenida Dr. Silas Munguba 1700, Fortaleza, CE 60714-903, Brazil. E-mail: bevilaqua.uece@gmail.com O controle sustentável de nematoides gastrintestinais (NGI) em pequenos ruminantes tem sido baseado na utilização de métodos alternativos, incluindo o tratamento alvo-seletivo, tal como o FAMACHA. Outra alternativa de controle de NGI é o uso de plantas medicinais, embora, em muitos casos, a sua utilização seja baseada no conhecimento empírico. Nanoformulações biopoliméricas tem sido investigadas para maximizar os efeitos de óleos essenciais sobre nematoides gastrointestinais em ovinos. O objetivo do presente estudo foi combinar a nanoemulsão do óleo essencial de Eucalyptus staigeriana (EsNano) com o método FAMACHA como uma alternativa para o controle da hemoncose em ovinos. Este estudo foi realizado ao longo de seis meses em uma fazenda comercial de ovinos localizada em uma região semiárida do Nordeste do Brasil. Inicialmente, um teste de redução da contagem de ovos nas fezes (FECRT) em ovinos com levamisol, ivermectina e oxfendazole foi realizado para determinar o anti-helmíntico mais eficaz, para posterior uso como controle positivo. Levamisol foi selecionado porque mostrou eficácia superior a 95%. EsNano foi obtido e, em seguida, as suas propriedades físico-químicas foram caracterizadas. O tamanho médio (±SE) das partículas na nanoemulsão foi 276,8 (±12,3) nm, com distribuição bimodal e polidispersividade. Foram realizadas nove visitas, de abril a setembro de 2013, com um intervalo de 17 dias. Cento e sessenta e dois ovinos machos e fêmeas foram divididos em três grupos (n=54 cada) e foram tratados quando o FAMACHA foi 3, 4 ou 5: G-EsNano 250 mg kg-1 EsNano; G-Lev 7,5mg kg-1 de levamisol (controlo positivo), e G-Neg não foi tratado (controle negativo). As fezes dos ovinos foram coletadas para quantificar o número de ovos por grama de fezes (opg) e identificar os gêneros de nematóides. O ganho de peso de ovinos foi monitorado. Os dados do opg de cada grupo e os ganhos de peso médio dos ovinos foram analisados por análise de variância e comparadas com o teste de Tukey (P<0,05). Diferença significativa entre o número de animais tratados com EsNano e levamisol não foi observada em nenhuma visita (P>0,05). A variação opg foi semelhante para os grupos G-EsNano e G-Lev nas vistas (P>0,05), excetuando a segunda e quinta avaliação em que os opg dos grupos foram significativamente diferentes (P>0,05). O nematoide Haemonchus spp. foi o mais prevalente. Não houve aumento significativo de peso em qualquer um dos grupos tratados (P>0,05). Assim, a combinação de fitoterapia e FAMACHA pode ser uma alternativa para minimizar o uso anti-helmínticos sintéticos para controlar populações resistentes NGI em pequenos ruminantes.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br Stem cells are undifferentiated cells with a high proliferation potential. These cells can be characterized by their in vivo ability to self-renew and to differentiate into specialized cell lines. The most used stem cell types, in both human and veterinary fields, are the mesenchymal stem cells (MSC) derived from bone marrow and adipose tissue. Nowadays, there is a great interest in using stem cells derived from fetal tissues, such as amniotic membrane (AM) and umbilical cord tissue (UCT), which can be obtained non-invasively at delivery time. Due to the scarcity of studies in bovine species, the aim of this study was to isolate, characterize, differentiate and cryopreserve MSC derived from the mesenchymal layer of amniotic membrane (AM), for the first time, and umbilical cord tissue (UCT) of dairy cow neonates after assisted delivery (AD) and from fetus at initial third of pregnancy (IT) obtained in slaughterhouse. Cells were isolated by enzymatic digestion of the tissue fragments with 0.1% collagenase solution. Six samples of AM and UCT at delivery time and six samples of AM and UCT at first trimester of pregnancy were subjected to morphology evaluation, imunophenotype characterization, in vitro osteogenic, adipogenic and chondrogenic differentiation and viability analysis after cryopreservation. All samples showed adherence to plastic and fibroblast-like morphology. Immunocytochemistry revealed expression of CD 44, NANOG and OCT-4 and lack of expression of MHC II in MSC from all samples. Flow cytometry demonstrated that cells from all samples expressed CD 44, did not or low expressed CD 34 (AM: IT-0.3%a, AD-3.4%b; UCT: 0.4%, 1.4%) and MHC II (AM: IT-1.05%a, AD-9.7%b; UCT: IT-0.7%a, AD-5.7%b). They were also capable of trilineage mesenchymal differentiation and showed 80% viability after cryopreservation. According to the results, bovine AM and UCT-derived cells, either obtained at delivery time or from slaughterhouse, are a painless and non-invasive source of MSC and can be used for stem cell banking.

• Cryopreservation stem cells amniotic mesenchymal layer umbilical cord fetuses cell banking criopreservação células tronco cordão umbilical

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Campos L.L., Landim-Alvarenga F.C., Ikeda T.L., Monteiro B.A., Maia L., Freitas-Dell’Aqua C.P. & De Vita B. 2017. Isolation, culture, characterization and cryopreservation of stem cells derived from amniotic mesenchymal layer and umbilical cord tissue of bovine fetuses. [Isolamento, cultura, caracterização e criopreservação de células tronco derivadas de camada amniótica mesenquimal e de tecido do cordão umbilical de fetuses bovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):278-286. Departamento de Reprodução Animal e Radiologia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618-970, Brazil. E-mail: loreta_campos@yahoo.com.br As células tronco mesenquimais (CTMs) estão presentes na maioria dos tecidos adultos e possuem grande capacidade de multiplicação. Quando cultivadas in vitro são capazes de se auto renovar e dar origem a novos tipos celulares. As células tronco mais utilizadas, tanto na medicina humana como na medicina veterinária são as células tronco mesenquimais derivadas da medula óssea e do tecido adiposo. Atualmente, uma grande tendência para a utilização de CTMs obtidas de tecidos fetais, como a membrana amniótica (MA), matriz extravascular do cordão umbilical (TCU) e sangue do cordão umbilical (SCU) pode ser observada, já que estas fontes podem ser colhidas no momento do parto por uma técnica não invasiva. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi isolar, caracterizar, diferenciar e criopreservar CTMs obtidas de MA e TCU de fetos bovinos colhidos no momento do parto e de fetos do terço inicial da gestação em abatedouro-frigorífico. As células foram recuperadas por meio de digestão enzimática tecidual, realizada com solução de colagenase 0,1%. Foram colhidas amostras de MA e TCU no momento do parto (n=6) e de MA e TCU no terço inicial de gestação (n=6), as quais foram submetidas às análises morfológicas, imunofenotípica por imunocitoquímica e citometria de fluxo, diferenciações in vitro nas linhagens osteogênica, adipogênica e condrogênica e ainda, avaliação da viabilidade após a criopreservação por citometria de fluxo. Todas as amostras dos diferentes grupos demonstraram adesão ao plástico e morfologia fibroblastóide. No ensaio imunocitoquímico todas as amostras foram imunomarcadas para CD44, NANOG e Oct-4, com ausência de marcação para MHC II. Na análise imunofenotipica por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram marcação para CD44, ausência de marcação para ou baixíssima expressão de CD34 (MA: TI-0,3%a, PA-3.4%b; TCU: TI-0,4%, PA-1.4%) e nula ou baixa expressão de MHC II (MA: TI-1.5%a, PA-9.7%b; UCT: TI-0.7%a, PA-5.7%b. Apresentaram também capacidade de diferenciação in vitro nas três linhagens mesodermais e quando analisadas pós criopreservação por citometria de fluxo, todas as amostras apresentaram viabilidade de 80%. Estes resultados indicam que MA e TCU, obtidos tanto no momento de parto como em abatedouro, de fetos bovinos podem ser utilizados como fonte não invasiva e indolor de CTMs e possibilitam a formação de bancos de armazenamento de células.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Lisboa-Neto A.F.S., Mariano-Filho P.G., Carvalho J.R., Araújo M.S., Santos A.C., Machado F.C.F., Silva-Filho M.L. & Machado-Júnior A.A.N. 2017. Effect of racial crossing on the scrotum-testicular biometry in sheep submitted to scrotal insulation. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):291-294. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Avenida Prof. Doutor Orlando Marques de Paiva 87, Butantã, São Paulo, SP 05508-010, Brazil. E-mail: lisboaneto@usp.br The objective of this study was to evaluate the effect of the racial crossing on scrotum-testicular biometric characteristics of four sheep Santa Ines and four crossbred (Santa Ines x Dorper) submitted to scrotal insulation, following the return of these characteristics to values previously reported. For this, two measurements were made regarding the scrotal circumference (SC), length (L) and testicular width (W) before treatments. The testicular volume (V) was calculated by the formula V=2 [(r²) x &#960; x H]. The pouches were made with double-layer plastic, internally lined with cotton, and fixed around the spermatic funiculus and scrotum with adhesive tape and bandage remaining in this position for seven days. Measurements were made every seven days, totaling 15 measurements throughout the experiment. The data were submitted to analysis of variance (ANOVA) to a randomized block design with two blocks, 15 treatments and four replications. The variables analyzed were subjected to Dunnett test at 5% probability, to compare the values obtained before and after insulation. For comparison between the breeds, the variables were submitted to Tukey test at 5% probability. All animals studied suffered significant influence (P<0.05) after scrotal insulation, but Santa Ines returned to the values previously observed in a shorter period than the crossbred. In summary, sheep Santa Ines have a higher resistance than crossbred animals when subjected to thermal stress induced by scrotal insulation.

• Scrotum-testicular biometry thermoregulation biometria escroto-testicular termorregulação

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Lisboa-Neto A.F.S., Mariano-Filho P.G., Carvalho J.R., Araújo M.S., Santos A.C., Machado F.C.F., Silva-Filho M.L. & Machado-Júnior A.A.N. 2017. Effect of racial crossing on the scrotum-testicular biometry in sheep submitted to scrotal insulation. [Efeito do cruzamento racial sobre a biometria escroto-testicular em ovinos submetidos à insulação escrotal.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(3):291-294. Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Avenida Prof. Doutor Orlando Marques de Paiva 87, Butantã, São Paulo, SP 05508-010, Brazil. E-mail: lisboaneto@usp.br Objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito do cruzamento sobre as características biométricas escroto-testiculares de carneiros da raça Santa Inês e mestiços (Santa Inês x Dorper), submetidos à insulação escrotal, acompanhando o retorno dessas características aos valores previamente observados. Para isso, foram realizadas duas mensurações referentes à circunferência escrotal (CE), comprimento (C) e largura testicular (L), antes da insulação. O volume testicular (V) foi calculado pela fórmula V=2 [(r²) x &#960; x h]. As bolsas de insulação foram fixadas ao redor do funículo espermático e escroto com fita adesiva e esparadrapo, permanecendo por sete dias. Após o período de insulação, as mensurações foram realizadas a cada sete dias, totalizando 15 mensurações durante todo o experimento. Os dados obtidos foram submetidos à análise de variância (ANOVA) para um delineamento em blocos casualizados, com dois blocos, 15 tratamentos e quatro repetições. As variáveis analisadas foram submetidas ao teste de Dunnett a 5% de probabilidade, para comparar os valores obtidos antes e após a insulação. Para a comparação entre as raças, as variáveis foram submetidas ao teste de Tukey a 5% de probabilidade. Todos os animais estudados sofreram influência significativa (P<0,05) após a insulação escrotal, porém os carneiros da raça Santa Inês retornaram aos valores anteriormente observados em um espaço de tempo mais curto do que os mestiços. Conclui-se que carneiros da raça Santa Inês apresentam maior resistência do que animais mestiços quando submetidos ao estresse térmico induzido pela insulação escrotal.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Picinin L.C.A., Toaldo I.M., Hoff R.B., Souza F.N., Leite M.O., Fonseca L.M., Diniz S.A., Silva M.X., Cerqueira M.M.O.P. & Bordignon-Luiz M.T. 2017. Survey of pyrethroid, macrocyclic lactone and antibacterial residues in bulk milk tank in Minas Gerais State, Brazil. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):97-104. Departamento de Ciência e Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina, Rodovia Admar Gonzaga 1346, Bairro Itacorubi, Florianópolis, SC 88034-001, Brazil. E-mail: lidia.picinin@gmail.com A survey of veterinary drug residues in bulk milk tank from Minas Gerais State, Brazil, was carried out through a broad scope analysis. Here, 132 raw milk samples were collected at 45 dairy farms in Minas Gerais from August 2009 to February 2010, and analyzed for 42 analytes, comprising pyrethroids, macrocyclic lactones and antibacterials, using liquid chromatography coupled with mass spectrometry in tandem mode and gas chromatography with electron capture detection. Within all milk samples, at least one veterinary drug residue was identified in 40 milk samples (30.30%) by confirmatory tests, whereas 16 samples (12.12%) showed the presence of at least two residues. With regard to the Brazilian maximum residue levels, 11 milk samples (8.33%) were non-compliant according to Brazilian Legislation. The veterinary drugs detected in the non-compliant milk samples include penicillin V (one sample), abamectin (one sample) and cypermethrin (nine samples). Furthermore, the antibacterial screening methods failed to identify most of the positive samples that were detected by confirmatory tests, leading to a large discrepancy between the screening and confirmatory antimicrobial tests. Thus, the present study indicated that the veterinary drugs residues still represents a great concern for the milk production chain.

• Pesticide anthelmintic antibiotic raw milk pesticidas antelmínticos antibióticos leite cru

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Picinin L.C.A., Toaldo I.M., Hoff R.B., Souza F.N., Leite M.O., Fonseca L.M., Diniz S.A., Silva M.X., Cerqueira M.M.O.P. & Bordignon-Luiz M.T. 2017. Survey of pyrethroid, macrocyclic lactone and antibacterial residues in bulk milk tank in Minas Gerais State, Brazil. [Resíduos de piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em amostras de leite de tanque no estado de Minas Gerais.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):97-104. Departamento de Ciência e Tecnologia de Alimentos, Universidade Federal de Santa Catarina, Rodovia Admar Gonzaga 1346, Bairro Itacorubi, Florianópolis, SC 88034-001, Brazil. E-mail: lidia.picinin@gmail.com Avaliou-se a presença de 42 analitos, incluindo piretróides, lactonas macrocíclicas e antimicrobianos em 132 amostras de leite de tanque proveniente de 45 propriedades leiteiras localizadas no Estado de Minas Gerais. Para tal, utilizou-se a cromatografia líquida acoplada a espectrofotometria de massas tandem e cromatografia gasosa com detector com captura de elétrons. Dentre todas as amostras de leite, 40 (30,30%) amostras de leite de tanque apresentaram a presença de pelo menos um analito, enquanto 16 amostras (12,12%) de leite demonstraram a presença de pelo menos dois analitos. Considerando os limites estabelecidos pela legislação brasileira, 11 amostras de leite (8,33%) seriam consideradas como não conforme. Ademais, os testes de triagem para detecção de antimicrobianos no leite não conseguiram identificar a maioria das amostras positivas nos testes confirmatórios, levando a grande discrepância entre estes testes. Desta forma, os resultados do presente estudo indicam que os períodos de descarte do leite, especialmente para piretróides, não foram plenamente respeitados por todos os produtores de leite. Além disto, uma discrepância entre os resultados dos testes confirmatórios e os testes de triagem foi observada.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Reis M.O., Slaviero M., Lorenzett M.P., Cruz R.A.S., Guimarães L.L.B., Pavarini S.P., Driemeier D. & Sonne L. 2017. [Bovine neoplasms diagnosed in the Sector of Veterinary Pathology of UFRGS, Porto Alegre, Brazil (2005-2014).] Neoplasmas bovinos diagnosticados no Setor de Patologia Veterinária da UFRGS, Porto Alegre (2005-2014). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):105-109. Setor de Patologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Prédio 42505, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: luciana.sonne@ufrgs.br A retrospective study has been conducted with the objective of determining the types of bovine neoplasms and their frequency. Necropsy and biopsy cases with diagnosis of neoplasm in cattle submitted to the Setor de Patologia Veterinária of Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS) from January 2005 to December 2014 were analyzed. A total of 4,188 exams were performed in cattle, and 154 were diagnosed as neoplasm. From these 154 occurrences, 100 cases of neoplasm were the cause of death, 41 were collected from cattle in slaughter house and 13 were biopsies sent by field veterinarians. Neoplasms occurred more frequently in adult cattle (96/154), females (125/154) and the most affected breed was Holstein-Friesian (79/154). The most common neoplasms were lymphoma (73/154), squamous cell carcinoma (28/154), papilloma (9/154), melanoma (6/154) and pheochromocytoma (6/154). The most affected systems were hemopoietic (75/154) and integumentary (25/154). We concluded that lymphoma and squamous cell carcinoma are the most common neoplasms in cattle diagnosed in SPV-UFRGS, Brazil.

• Neoplasms carcinoma lymphoma papillomatosis tumors neoplasias carcinoma linfoma papilomatose tumores

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Reis M.O., Slaviero M., Lorenzett M.P., Cruz R.A.S., Guimarães L.L.B., Pavarini S.P., Driemeier D. & Sonne L. 2017. [Bovine neoplasms diagnosed in the Sector of Veterinary Pathology of UFRGS, Porto Alegre, Brazil (2005-2014).] Neoplasmas bovinos diagnosticados no Setor de Patologia Veterinária da UFRGS, Porto Alegre (2005-2014). Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):105-109. Setor de Patologia Veterinária, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal do Rio Grande do Sul, Av. Bento Gonçalves 9090, Prédio 42505, Porto Alegre, RS 91540-000, Brazil. E-mail: luciana.sonne@ufrgs.br Realizou-se um estudo retrospectivo com o objetivo de determinar os tipos de neoplasmas em bovinos e a sua frequência. Foram analisados os casos de necropsias e biopsias de bovinos com diagnóstico de neoplasia, submetidos ao Setor de Patologia Veterinária da Universidade Federal do Rio Grande do Sul (SPV-UFRGS), entre janeiro de 2005 e dezembro de 2014. De um total de 4.188 exames realizados em bovinos, 154 foram diagnosticados como neoplasmas. Destes, 100 casos foram a causa da morte, 41 foram achados de frigorífico e 13 casos eram biopsias de cirurgias realizadas por veterinários de campo. Os neoplasmas ocorreram com maior frequência em bovinos adultos (96/154), fêmeas (125/154) e a raça mais acometida foi a Holandesa (79/154). Os neoplasmas mais frequentes foram linfoma (73/154), carcinoma de células escamosas (28/154), papiloma (9/154), melanoma (6/154) e feocromocitoma (6/154). Os sistemas mais acometidos foram o hemopoiético (75/154) e tegumentar (25/154). Conclui-se que o linfoma e o carcinoma de células escamosas são os neoplasmas mais frequentes em bovinos diagnosticados no SPV-UFRGS, Brasil.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Almeida V.M., Rocha B.P., Pfister J.A., Medeiros R.M.T., Riet-Correa F., Chaves H.A.S., Silva Filho G.B. & Mendonça F.S. 2017. Spontaneous poisoning by Prosopis juliflora (Leguminosae) in sheep. Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):110-114. Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: fabio.mendonca@pq.cnpq.br The aim of this paper is to describe the first report of spontaneous poisoning by Prosopis juliflora in sheep. From flock of 500 sheep at risk, four adult male sheep were affected. One died spontaneously and three other were examined, euthanized and necropsied. Neurologic examination focused particularly on motor and sensory-cranial nerve function, complete blood counts, serum biochemistry and urinalysis were done. The evolution of the disease was chronic and to present signs of poisoning, sheep had to ingest a diet containing at least 80% of P. juliflora pods during 21 months. The biochemistry revealed a substantial increase in creatine phosphokinase levels. Clinical signs included drooling of saliva, dropped jaw, tongue protrusion and loss of food from the mouth. Gross and histological lesions were similar to those previously reported in cattle and goats. Sheep are more resistant to poisoning by P. juliflora considering that it took 21 months of pod consumption to show clinical signs. There is no specific treatment for P. juliflora poisoning in ruminants.

• Poisonous plants Prosopis juliflora Leguminosae mesquite beans plant poisoning vacuolation plantas tóxicas algaroba intoxicação por planta vacuolização neuronal

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Almeida V.M., Rocha B.P., Pfister J.A., Medeiros R.M.T., Riet-Correa F., Chaves H.A.S., Silva Filho G.B. & Mendonça F.S. 2017. Spontaneous poisoning by Prosopis juliflora (Leguminosae) in sheep. [Intoxicação espontânea por Prosopis juliflora (Leguminosae) em ovinos.] Pesquisa Veterinária Brasileira 37(2):110-114. Universidade Federal Rural de Pernambuco, Rua Dom Manoel de Medeiros s/n, Dois Irmãos, Recife, PE 52171-900, Brazil. E-mail: fabio.mendonca@pq.cnpq.br O objetivo deste trabalho é descrever o primeiro caso de intoxicação espontânea por Prosopis juliflora em ovinos. De um total de 500 ovinos sob risco, quatro ovinos machos adultos foram afetados. Um ovino morreu espontaneamente e os outros foram examinados, eutanasiados e necropsiados. Realizaram-se exames clínicos direcionados particularmente para funções de nervos motores e sensoriais-craniais. Avaliou-se hemograma, perfil bioquímico sérico e urinálise. A evolução da doença foi crônica e para apresentar sinais de intoxicação os ovinos tiveram que ingerir uma dieta contendo 80% das vagens de P. Juliflora durante 21 meses. Os níveis de creatinofosfoquinase estavam significativamente elevados. Os sinais clínicos consistiram em sialorreia, mandíbula pendulosa, protusão da língua e perda de alimento pela boca. As lesões macroscópicas e microscópicas foram similares àquelas reportadas previamente em bovinos e caprinos. Ovinos são mais resistentes à intoxicação por P. Juliflora, tendo em vista que foi necessário 21 meses de consumo das vagens para que os ovinos apresentassem sinais clínicos. Não há tratamento específico para a intoxicação por P. Juliflora em ruminantes.