PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Marcolongo-Pereira C., Adrien M.L., Ladeira S.R.L., Soares M.P., Assis-Brasil N.D & Schild A.L. 2012. [Equine abortion in Southern Brazil: study of 72 cases.] Abortos em equinos a região Sul do Rio Grande do Sul: estudo de 72 casos. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(1):22-26. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: alschild@terra.com.br A retrospective study of the causes of equine abortion occurred in southern Rio Grande do Sul, Brazil, diagnosed from January 2000 to June 2011 by the Regional Diagnostic Laboratory (LRD) of the Veterinary School, Federal University of Pelotas (UFPel), is reported. Necropsy protocols were reviewed, and from 1.154 horses or equine materials received 72 (6.2%) were abortions. The main cause of abortion in this study was bacterial infection on 36.1% of the cases. Non-infectious causes accounted for 8.3% of the cases, viral abortions for 4.2%, parasitic for 1.4% and inflammatory for 2.8%. In 47.2%, it was not possible to determine the cause/etiology of abortions. Characteristic macroscopic and histological lesions were observed in abortion by Leptospira sp. and equine herpesvirus-1. No lesions were observed in the other cases. It was demonstrated that the analyses of whole fetus with the placenta under refrigeration increases the efficiency of diagnosis. The high number of abortions of undetermined cause was attributed in part to inadequate delivery of fetus material for diagnoses.

• Abortion feto-placental infection aborto infecção feto-placentária

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Marcolongo-Pereira C., Adrien M.L., Ladeira S.R.L., Soares M.P., Assis-Brasil N.D & Schild A.L. 2012. [Equine abortion in Southern Brazil: study of 72 cases.] Abortos em equinos a região Sul do Rio Grande do Sul: estudo de 72 casos. Pesquisa Veterinária Brasileira 32(1):22-26. Laboratório Regional de Diagnóstico, Faculdade de Veterinária, Universidade Federal de Pelotas, Campus Universitário s/n, Pelotas, RS 96010-900, Brazil. E-mail: alschild@terra.com.br Foi realizado um estudo retrospectivo das causas de aborto ocorridas em equinos na área de influência do Laboratório Regional de Diagnóstico (LRD), da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas (UFPel), no período entre janeiro de 2000 e junho de 2011. Foram revisados os protocolos de necropsia e de 1.154 equinos ou materiais de equinos recebidos 72 (6,2%) eram casos de abortos. A infecção bacteriana foi a principal causa de aborto neste estudo com 36,1% dos casos. As causas não infecciosas corresponderam a 8,3% dos casos, os abortos virais a 4,2%, os parasitários a 1,4% e os inflamatórios a 2,8%. Em 47,2% dos casos não foi possível determinar a causa/etiologia do aborto. Lesões macroscópicas e histológicas características foram observadas em casos de aborto por Leptospira sp. e por herpesvirus equino-1 sendo que nos demais casos as lesões foram inespecíficas. Ficou demonstrado que o envio do feto inteiro junto com a placenta, sob refrigeração, aumenta consideravelmente a eficiência do diagnóstico e o elevado número de abortos de causa não determinada foi atribuído em parte ao envio de material não adequado.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Meça K.K.O.L., Del Puerto H.L., Rodrigues L.V., Rachid M.A., Pereira N.B., Cândido M.G.L. & Vasconcelos A.C. 2011. [Apoptosis in placental maturation of cows in different stages of pregnancy: Immunohistochemical and biochemical evidences.] Apoptose na maturação placentária de vacas em diferentes estágios de gestação: evidenciação imuno-histoquímica e bioquímica. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(8):718-722. Departamento de Patologia Geral, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antonio Carlos 6627, Campus Pampulha, BeloHorizonte, MG 31270-010, Brazil. E-mail: karinameca@yahoo.com.br Apoptosis is important for placental homeostasis maintenance, and a misbalance in this process may compromise the success of pregnancy. The aim of this study is to evaluate apoptosis in bovine placental samples at different stages of pregnancy. Placentome samples from 15 healthy cows, at gestational ages of 4 (n=5), 6 (n=5) and 9 (n=5) months were collected and routinely processed for histological and immunohistochemical analysis, and for DNA isolation. Histopathology sections were stained with HE. Others were submitted to immunohistochemistry, using pro-apoptotic caspase-3 and Bax protein, and anti-apoptotic Bcl-2 specific antibodies. Isolated DNAs were processed for electrophoresis in agarose gel, for detection of internucleosomal fragmentation. Histomorphometry results demonstrated that apoptotic cells gradually increase with the advance of the gestation. Also, the DNA ladder pattern was observed in all groups. In addition, caspase-3, Bax and Bcl-2 were all expressed in the three different gestation periods. However, caspase-3 presented a higher expression in all groups, in comparison to Bcl-2 and Bax. These results confirm the importance of the apoptosis in the placental maturation. Also, these results indicated that caspase-3, Bcl-2 and Bax are involved in apoptotic activation mechanisms by mitochondrial intrinsic pathway during placental maturation, contributing for physiological cellularity and cellular turn over balance in bovine placenta.

• Apoptosis placenta apoptose

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Meça K.K.O.L., Del Puerto H.L., Rodrigues L.V., Rachid M.A., Pereira N.B., Cândido M.G.L. & Vasconcelos A.C. 2011. [Apoptosis in placental maturation of cows in different stages of pregnancy: Immunohistochemical and biochemical evidences.] Apoptose na maturação placentária de vacas em diferentes estágios de gestação: evidenciação imuno-histoquímica e bioquímica. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(8):718-722. Departamento de Patologia Geral, Instituto de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Minas Gerais, Av. Antonio Carlos 6627, Campus Pampulha, BeloHorizonte, MG 31270-010, Brazil. E-mail: karinameca@yahoo.com.br Apoptose tem um papel importante na manutenção da homeostase placentária, e o desequilíbrio desse processo pode comprometer a gestação. O objetivo do presente estudo foi avaliar a ocorrencia de apoptose em amostras de placenta de vacas em diferentes fases de gestação. Amostras de placentomos de 15 vacas saudáveis com 4 (n=5), 6 (n=5) e 9 (n=5) meses de gestação foram colhidas e processadas rotineiramente para a histologia, imuno-histoquímica e isolamento de DNA. As lâminas obtidas foram coradas em HE, ou submetidas à análise imuno-histoquímica das proteínas pró-apoptóticas caspase-3 e Bax, e da proteína anti-apoptótica Bcl-2. O DNA isolado foi submetido à eletroforese em gel de agarose para detecção da fragmentação internucleossômica do genoma. Os resultados de histomorfometria revelaram que as células apoptóticas aumentaram progressivamente com o avanço da gestação. Confirmou-se a apoptose pela fragmentação característica do DNA genômico, visualizada pelo clássico “padrão em escada” na eletroforese em gel de agarose. Adcionalmente, a imunoexpressão de caspase-3, Bax e Bcl-2 foram observadas em todas as amostras. Entretanto, a proteína caspase-3 apresentou marcação mais intensa em todos os tempos gestacionais, quando comparada com a marcação das proteínas Bcl-2 e Bax. Esses resultados confirmam e reforçam a importância da apoptose na maturação placentária. Além disto, indica que caspase-3, Bax e Bcl-2 estão envolvidas nos mecanismos de ativação da apoptose pela via intrínseca mitocondrial ao longo da gestação, contribuindo para o equilíbrio fisiológico da celularidade e renovação celular na placenta bovina.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Ferreira A.O., Morini A.C., Favaron P.O., Passos C.C., Campos D.B., Miglino M.A. & Guerra R.R. 2011. [Morphological evaluation of fetal membranes and placenta of wild life Mazama gouazoubira deer in the first third of pregnancy.] Avaliação morfológica das membranas fetais e da placenta de Mazama gouazoubira (veado-catingueiro) de vida livre no terço inicial da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(7):631-635. Setor de Anatomia, Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo 05508-270, Brazil. E-mail: ricardo@cca.ufpb.br Mazama gouazoubira is a small-sized deer, which can be found in South America, from southern Uruguay to the north of Mato Grosso, Brazil. This study aimed to describe the fetal membranes and placenta of M. gouazoubira in the first third of pregnancy. Samples collected were macroscopically and microscopically analyzed. Uterus examination demonstrated univitelinic gestation with an embryo measuring a crown-rump length of 13mm. In the embryo analysis we could identify the pigmented eye, auricular hillocks, mesonephron and early metanephron, liver and its external prominence, stomach, thoracic members and buds of pelvic members. Placenta was oligocotyledonary and nine caruncles were found in the uterus. Gestational sac measured 15cm in length, and, as observed in the early gestation of domestic ruminants, cotyledons could not be identified macroscopically. A weak adhesion was found between caruncles and chorioallantoic membrane (cotyledons) forming the placentomes. The chorioallantoic membrane showed a well-vascularized allantoid composed by a thin layer of cells with stretched nucleus and cytoplasm. On the other side of the membrane, the chorion was composed by cubic cells with scant cytoplasm and large-rounded nuclei, features of trophoblast cells. Involving the embryo we identified a two-layered amniotic sac. Layers could be mechanically separated and had similar morphology, showing a non-vascularized squamous epithelium. There was no yolk sac in the gestational stage of this specimen. We concluded that the placenta of M. gouazoubira is an oligocotyledonary placenta, as observed in others cervids, and that the fetal membranes showed similarities with those from other domestic ruminants, including cytological characteristics. Further studies are required in order to determine the presence of the yolk sac and its regression time.

• Yolk sac chorioallantoic membrane oligocotyledonary placenta placentome Mazama gouazoubira veado-catingueiro saco vitelino membrana corioalantóica palacenta placenta oligocotiledonária

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Ferreira A.O., Morini A.C., Favaron P.O., Passos C.C., Campos D.B., Miglino M.A. & Guerra R.R. 2011. [Morphological evaluation of fetal membranes and placenta of wild life Mazama gouazoubira deer in the first third of pregnancy.] Avaliação morfológica das membranas fetais e da placenta de Mazama gouazoubira (veado-catingueiro) de vida livre no terço inicial da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(7):631-635. Setor de Anatomia, Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo 05508-270, Brazil. E-mail: ricardo@cca.ufpb.br Mazama gouazoubira, o veado-catingueiro, é uma espécie de cervídeo de porte pequeno, que pode ser encontrado na América do Sul, desde o sul do Uruguai até o norte de Mato Grosso, no Brasil. Este estudo teve como objetivo descrever as membranas fetais e a placenta de M. gouazoubira no terço inicial de gestação. As amostras coletadas foram analisadas macroscopicamente e microscopicamente. O exame do útero demonstrou uma gestação univitelina e um embrião com crown-rump de 13mm. Na análise do embrião pode ser observado o olho pigmentado, as saliências auriculares, o mesonefro e e metanefro em desenvolvimento, o fígado e sua proeminência externa, o estômago, os membros torácicos e os brotos dos membros pélvicos. A placenta apresentou-se oligocotiledonária e no útero puderam ser observadas nove carúnculas. O saco gestacional mediu 15cm de comprimento e, como observado no início da gestação dos ruminantes domésticos, os cotilédones não puderam ser identificados macroscopicamente. Uma fraca adesão foi observada entre as carúnculas e a membrana corioalantóica (cotilédones) que formavam os placentônios. A membrana corioalantóica demonstrou um alantóide bem vascularizado composto por uma fina camada de células de núcleos e citoplasmas alongados. Na outra face da membrana, o cório foi composto por células cúbicas, de citoplasmas escassos e núcleos grandes e arredondados, características de células trofoblásticas. Envolvendo o embrião visualizou-se o saco amniótico constituído de duas camadas passíveis de separação mecânica, que apresentaram morfologia similar, sendo formadas por um epitélio pavimentoso avascular. Não foi observado saco vitelino no estágio gestacional do espécime estudado. Conclui-se que a placenta de M. gouazoubira é oligocotiledonária, como observado em outros cervídeos, e que as membranas fetais apresentam semelhanças com a de outros ruminantes, incluindo as características citológicas. Estudos adicionais são necessários para determinar a presença do saco vitelino e quando ocorre sua regressão.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Cadore G.C., Vogel F.S.F., Sangioni L.A., Pena H.F.J. & Gennari S.M. 2010. [IgM and IgG as markers of infection transplacentary Neospora caninum in bovine fetuses.] IgM e IgG como marcadores da infecção transplacentária por Neospora caninum em fetos bovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 30(7):551-553. Setor de Medicina Veterinária Preventiva (Doenças Parasitárias), Universidade Federal de Santa Maria, Camobi, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: fervogel@smail.com The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Neospora caninum antibodies in serum samples collected from 260 bovine fetuses, between July 2007 and March 2008, in an abattoir in the municipality of Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brazil. An indirect fluorescent antibody test was used to detect anti-N. caninum immunoglobulins G (IgG) and M (IgM), using a cut-off of 1:25. Considering IgG or IgM detection, 15% (39/260) of the samples tested were found positive. Among the positive samples, 38 (97.4%) were positive for IgG and 6 (15.4%) for IgM. However 5 (12.8%) of it were positive for both IgG and IgM. These results are in agreement with the proven ability of N. caninum to fetal infection. IgM testing was few relevant to detect N. caninum transplacental infection through fetal bovine serum analisys.

• Neospora caninum immuno-globulin G and M (IgG and IgM) Imunoglobulinas G e M (IgG e IgM).

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Cadore G.C., Vogel F.S.F., Sangioni L.A., Pena H.F.J. & Gennari S.M. 2010. [IgM and IgG as markers of infection transplacentary Neospora caninum in bovine fetuses.] IgM e IgG como marcadores da infecção transplacentária por Neospora caninum em fetos bovinos. Pesquisa Veterinária Brasileira 30(7):551-553. Setor de Medicina Veterinária Preventiva (Doenças Parasitárias), Universidade Federal de Santa Maria, Camobi, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: fervogel@smail.com O objetivo deste estudo foi determinar a ocorrência de anticorpos anti-Neospora caninum em 260 amostras de soro coletadas de fetos bovinos de julho de 2007 a março de 2008, em abatedouro do município de Santa Maria, Rio Grande do Sul, Brasil. Para detecção de anticorpos anti-N. caninum, a técnica de imunofluorescência indireta foi utilizada tanto para a detecção de imunoglobulinas G e M. Amostras com títulos e” 25 foram consideradas positivas. Das 260 amostras testadas, 15% (39/260) foram positivas para anticorpos anti-N. caninum. Destas, em 38 (97,4%) foi detectada a presença de IgG anti-N. caninum e em seis (15,4%) de IgM. Em cinco amostras (12,8%) detectaram-se ambos, IgG e IgM. Os resultados reafirmam a habilidade do N. caninum em determinar infecção fetal. A pesquisa de IgM foi de limitada importância na detecção da infecção via transplacentária em soro fetal bovino.

Abstract in English:

RESUMO.- Ferreira G.J., Carvalho A.F., Branco E., Cabral R., Gregores G.B., Fioretto E.T., Lima A.R., Sarmento C.A.P. & Miglino M.A. 2009. Chorion biopsy in mongrel dogs. [Biopsia do cório fetal em cães.] Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):793-796. Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Avenida Pte Tancredo Neves 2501, Montese, Belém, PA 66077-530, Brazil. E-mail: erika.branco@ufra.edu.br Com o grande desenvolvimento dos estudos gestacionais em todas as espécies, percebemos a necessidade de adaptarmos técnicas para diagnóstico pré-natal para cães. Assim, buscamos bases nas técnicas já existentes empregadas em humanos, e através destas, conseguimos estabelecer um método para coleta em cães, utilizando PCR para garantirmos a integridade das amostras. O procedimento foi realizado através de punção da cinta placentária com agulha de biopsia guiada por ultra-som. De todas as 14 amostras coletadas, duas apresentaram-se positivas para o cromossomo Y, presente apenas em machos, confirmando assim a viabilidade das amostras demonstrando com isso que através desta técnica podemos coletar material fetal para diagnóstico de alterações gênicas ou cromossômicas presentes nos cães antes mesmo destes virem a termo. A microscopia de material revelou fragmentos de cório fetal, colóide sangüíneo e eritrócitos. Em todo o material encontramos impregnações de hemosiderina devido à hemólise e ao resíduo de sangue dos hematomas marginais placentários. As cadelas submetidas a esta técnica tiveram partos normais sem óbito de nenhum filhote.

• Chorion biopsy placenta dog

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Ferreira G.J., Carvalho A.F., Branco E., Cabral R., Gregores G.B., Fioretto E.T., Lima A.R., Sarmento C.A.P. & Miglino M.A. 2009. Chorion biopsy in mongrel dogs. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):793-796. Universidade Federal Rural da Amazônia (UFRA), Avenida Pte Tancredo Neves 2501, Montese, Belém, PA 66077-530, Brazil. E-mail: erika.branco@ufra.edu.br With the great development of the gestational studies in all of the species, we noticed the necessity of adaptations of these techniques for prenatal diagnosis in dogs. Based on this, we studied the feasibility of chorion biopsy guided by ultrasound. Our results demonstrated accuracy on the sex determination being 2 males and 12 females, as well as it would be possible to identify chromosome alteration due to the quality of samplings. Sex determination was accomplished with the identification of Y gene chromosomes in PCR technique. After the collection, fragments were prepared for light microscopy studies and revealed fetal chorion tissue, blood colloid and erythrocyte. In the whole material we found hemosiderin impregnations due to the hemolysis and to the residue of blood of the placental marginal hematomes. The submitted female dogs to this technique demonstrated normal puppy births without death.

Abstract in English:

RESUMO.- Assis Neto A.C., Morceli J.A.B., Fonseca R., Ambrósio C.E., Pereira F.T.V. & Miglino M.A. 2009. [Biometrics evolution of the embryonic and fetal annexes in cows obtained by natural mating, at 10 to 70 days of gestation.] Evolução morfométrica dos anexos embrionários e fetais bovinos obtidos por monta natural, com 10 a 70 dias da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):859-862. Faculdade de Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unidade Experimental de Dracena, Rodovia Comandante João Ribeiro de Barros Km 651, Dracena, SP 17900-000, Brazil. E-mail: antonioassis@dracena.unesp.br O período inicial da gestação de bovinos é caracterizado por grandes perdas embrionárias. Considerando a importância deste fator no âmbito da reprodução animal foram estudados os anexos embrionários e fetais bovinos fecundados por monta natural de 15-70 dias de gestação, com o objetivo de estabelecer parâmetros morfométricos da placenta na fase inicial da gestação. Com uso de um paquímetro foram realizadas mensurações do comprimento (crânio caudal), largura (latero lateral) e altura (dorso ventral) das membranas corioalantóide e amniótica. O início da formação dos cotilédones foi observado e quantificado, assim como, o peso placentário. O peso médio do saco gestacional aumentou com o evoluir da idade gestacional, entretanto, o crescimento foi acelerado a partir de 20-30 dias de gestação. O comprimento crânio caudal e dorso ventral da membrana corioalantóide e do âmnio apresentaram crescimento lento e gradual com o evoluir dos períodos gestacionais analisados. Com 30-40 dias de gestação, os primeiro cotilédones já eram visualizados e contatos com facilidade na superfície coriônica. Os períodos de crescimento coincidiram com os maiores índices de perdas gestacionais em bovinos. Os parâmetros aqui analisados poderão servir para futuras investigações dos anexos embrionários de organismos manipulados em laboratório.

• Placenta bovine extraembryonics membranes amnion chorion

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Assis Neto A.C., Morceli J.A.B., Fonseca R., Ambrósio C.E., Pereira F.T.V. & Miglino M.A. 2009. [Biometrics evolution of the embryonic and fetal annexes in cows obtained by natural mating, at 10 to 70 days of gestation.] Evolução morfométrica dos anexos embrionários e fetais bovinos obtidos por monta natural, com 10 a 70 dias da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(10):859-862. Faculdade de Zootecnia, Universidade Estadual Paulista Júlio de Mesquita Filho, Unidade Experimental de Dracena, Rodovia Comandante João Ribeiro de Barros Km 651, Dracena, SP 17900-000, Brazil. E-mail: antonioassis@dracena.unesp.br The main goal of this morphometrical study was to characterize the development of the extra-embryonic membranes of 15 to 70-day-old bovine embryos obtained by natural mating. With a millimeter paquimeter the cranio-caudal, latero-lateral and dorso-ventral measurements of chorion and amnion were determined. The development of the cotyledons and weight of the gestational sac were observed and quantified. The weight of the gestational sac increased during gestation; however, the growth was faster then 20 to 30 days. The cranial-caudal and dorsal-ventral length of the choriallantois and the amnion developed slowly and gradually with progress of the gestational period, and the cranio-caudal length decreased after 50 to 60 days of gestation, increasing in the next period. After 30 to 40 days of gestation, the first cotyledons were visualized and counted easily in the chorionic surface. The growth periods were the same of the main gestational losses in cattle. The parameters analyzed could be useful for investigations of extra-embryonic membranes in organisms manipulated in the laboratory.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Barbosa P.L.G., Melnic R.V., Morini A.C., Martins D.S., Morini-Junior J.C., Pereira F.T.V., Franciolli A.L.R., Favaron P.O., Ambrósio C.E. & Miglino M.A. 2008. [Characterization of the fetal membranes in buffalo cows in the first three months of gestation.] Caracterização das membranas fetais em búfalas no terço inicial da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 28(9):437-445. Setor de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres, Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-900, Brazil. E-mail: drimorini@usp.br The aim of the study was to characterize the fetal membranes in buffalo cows (Bubalus bubalis, Linnaeus 1758) in the first 3 months of the gestation. The fetal membranes were analyzed gross and microscopically (light and ultrastructural analysis). The corion is a simple layer of circle cells, with spherical nucleus, named trofoblastics; there is another cellular type, named trophoblastic giant cells, with two or more nucleus. Both of them have many cytoplasmic and reticule endoplasmic vesicles on transmission electron microscopy. The allantoic has many vessels filled with eritrocytes, elongated cells which form a stratified simple epithelium. The amnion is transparent or sometimes whitish, consisting of a stratified simple epithelium. The main difference between the allantoic and amnion is that the latter is avascular. The yolk sac is an opaque membrane that disappears during gestation, and is the only membrane that is not in contact with the others; it presents three different types of cells which form three distinct layers (endoderm, mesothelium and mesenquimal).

• Buffaloes fetal membranes morphology placenta

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Barbosa P.L.G., Melnic R.V., Morini A.C., Martins D.S., Morini-Junior J.C., Pereira F.T.V., Franciolli A.L.R., Favaron P.O., Ambrósio C.E. & Miglino M.A. 2008. [Characterization of the fetal membranes in buffalo cows in the first three months of gestation.] Caracterização das membranas fetais em búfalas no terço inicial da gestação. Pesquisa Veterinária Brasileira 28(9):437-445. Setor de Anatomia dos Animais Domésticos e Silvestres, Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, Cidade Universitária, São Paulo, SP 05508-900, Brazil. E-mail: drimorini@usp.br The aim of the study was to characterize the fetal membranes in buffalo cows (Bubalus bubalis, Linnaeus 1758) in the first 3 months of the gestation. The fetal membranes were analyzed gross and microscopically (light and ultrastructural analysis). The corion is a simple layer of circle cells, with spherical nucleus, named trofoblastics; there is another cellular type, named trophoblastic giant cells, with two or more nucleus. Both of them have many cytoplasmic and reticule endoplasmic vesicles on transmission electron microscopy. The allantoic has many vessels filled with eritrocytes, elongated cells which form a stratified simple epithelium. The amnion is transparent or sometimes whitish, consisting of a stratified simple epithelium. The main difference between the allantoic and amnion is that the latter is avascular. The yolk sac is an opaque membrane that disappears during gestation, and is the only membrane that is not in contact with the others; it presents three different types of cells which form three distinct layers (endoderm, mesothelium and mesenquimal).

Abstract in English:

ABSTRACT.- Cazerta S.M.M., Miglino M.A., Marques R.S., Vulcano M. & Pereira F.T.V. 2007. [Characterization of hemophagous areas of the bovine placenta.] Caracterização das áreas hemófagas da placenta bovina. Pesquisa Veterinária Brasileira 26(6):229-235. Faculdade de Zootecnia, Campus Dracena, Unesp, Rod. Com. João Ribeiro de Barros, SP294 Km 651, Dracena, SP 17900-000, Brazil. E-mail: fverechia@dracena.unesp.br The specific region of maternal fetal interface needs to be clarified and corresponds to the “arcade zone” of sheep and goat placentomes. In small ruminants that area is also characterized by macroscopic blood extravasation (hemophagous areas). This occurs possibly because the iron is transferred to the embryo by trophoblastic erytrophagocytosis in these hemophagous placental areas. In order to investigate the hemophagous placental areas in cattle, placentomes of 34 pregnant Bos indicus cows (2-3, 4-6, 7-8 and 9 months of gestation) were analyzed. They were fixed by perfusion with 10% formaldehyde aqueous solution and 4% paraformoldehyde in PBS, pH 7.4, 0.1M, processed and stained for light microscopy and histochemistry. The methodology used allowed to observe placental haematomes between the uterine and trophoblastic epithelium since 3 months of pregnancy. Erythrocytes had been found in the trophoblastic cells, elucidating the erytrophagocytosis. Through Perl’s histochemical reaction it was possible to prove the existence of ferric iron in the trophoblastic cells. The PAS reaction was positive staining mucoid substance in the epithelial cells, especially in the binucleate cells of the fetal epithelium. Based on histology and histochemistry, it can be inferred that the hemophagous areas are important sites for iron transfer in the bovine placenta.

• Erythrophagocytosis hemophagous areas bovine placenta reproduction trophoblast

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Cazerta S.M.M., Miglino M.A., Marques R.S., Vulcano M. & Pereira F.T.V. 2007. [Characterization of hemophagous areas of the bovine placenta.] Caracterização das áreas hemófagas da placenta bovina. Pesquisa Veterinária Brasileira 26(6):229-235. Faculdade de Zootecnia, Campus Dracena, Unesp, Rod. Com. João Ribeiro de Barros, SP294 Km 651, Dracena, SP 17900-000, Brazil. E-mail: fverechia@dracena.unesp.br The specific region of maternal fetal interface needs to be clarified and corresponds to the “arcade zone” of sheep and goat placentomes. In small ruminants that area is also characterized by macroscopic blood extravasation (hemophagous areas). This occurs possibly because the iron is transferred to the embryo by trophoblastic erytrophagocytosis in these hemophagous placental areas. In order to investigate the hemophagous placental areas in cattle, placentomes of 34 pregnant Bos indicus cows (2-3, 4-6, 7-8 and 9 months of gestation) were analyzed. They were fixed by perfusion with 10% formaldehyde aqueous solution and 4% paraformoldehyde in PBS, pH 7.4, 0.1M, processed and stained for light microscopy and histochemistry. The methodology used allowed to observe placental haematomes between the uterine and trophoblastic epithelium since 3 months of pregnancy. Erythrocytes had been found in the trophoblastic cells, elucidating the erytrophagocytosis. Through Perl’s histochemical reaction it was possible to prove the existence of ferric iron in the trophoblastic cells. The PAS reaction was positive staining mucoid substance in the epithelial cells, especially in the binucleate cells of the fetal epithelium. Based on histology and histochemistry, it can be inferred that the hemophagous areas are important sites for iron transfer in the bovine placenta.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Iturrizaga D.M., Verechia F.T., Santos T.C., Bombonato P.P., Teixeira D.G. & Miglino M.A. 2007. The materno-fetal interface in llama (Lama guanicoe glama). Pesquisa Veterinária Brasileira 27(6):221-228. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: miglino@usp.br Samples from 9 llamas (28 through 36 weeks of gestation) were collected and fixed in 4% buffered paraformaldehyde (light microscopy) and in 2.5% buffered glutaraldehyde (transmission and scanning electron microscopy). The material was processed in paraplast and slides (5mm) were stained with HE, PAS, Masson-Trichrome, acid phosphatase and Perl´s. The uteroferrin was immunolocalized. The results show that llama placenta is chorioallantoic, diffuse, folded and epitheliochorial, and the fetus is covered with an epidermal membrane. The trophoblast cells have variable morphology: cubic, rounded and triangular cells, with cytoplasm containing PAS-positive granules. Binucleated cells with large cytoplasm and rounded nuclei, as well as giant trophoblastic cells with multiple nuclei were also observed. Numerous blood vessels were observed beneath the cells of the uterine epithelium and around the chorionic subdivided branches. Glandular activity was shown by PAS, Perl´s, and acid phosphatase positive reactions in the cytoplasm and glandular lumen, and by immunolocalization of the uteroferrin in the glandular epithelium. The uterine glands open in spaces formed by the areoles, which are filled by PAS-positive material. The llama fetus was covered by the epidermal membrane, composed of stratified epithelium, with up to seven layers of mono-, bi- or trinucleated cells. The high level of maternal and fetal vascularization surfaces indicates an intense exchange of substances across both surfaces. The metabolic activity shown in the uterine glands suggests an adaptation of the gestation to the high altitudes of the natural habitat of this species.

• Placenta llama trophoblast uteroferrin ephiteliochorial morphology

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Iturrizaga D.M., Verechia F.T., Santos T.C., Bombonato P.P., Teixeira D.G. & Miglino M.A. 2007. The materno-fetal interface in llama (Lama guanicoe glama). Pesquisa Veterinária Brasileira 27(6):221-228. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: miglino@usp.br Samples from 9 llamas (28 through 36 weeks of gestation) were collected and fixed in 4% buffered paraformaldehyde (light microscopy) and in 2.5% buffered glutaraldehyde (transmission and scanning electron microscopy). The material was processed in paraplast and slides (5mm) were stained with HE, PAS, Masson-Trichrome, acid phosphatase and Perl´s. The uteroferrin was immunolocalized. The results show that llama placenta is chorioallantoic, diffuse, folded and epitheliochorial, and the fetus is covered with an epidermal membrane. The trophoblast cells have variable morphology: cubic, rounded and triangular cells, with cytoplasm containing PAS-positive granules. Binucleated cells with large cytoplasm and rounded nuclei, as well as giant trophoblastic cells with multiple nuclei were also observed. Numerous blood vessels were observed beneath the cells of the uterine epithelium and around the chorionic subdivided branches. Glandular activity was shown by PAS, Perl´s, and acid phosphatase positive reactions in the cytoplasm and glandular lumen, and by immunolocalization of the uteroferrin in the glandular epithelium. The uterine glands open in spaces formed by the areoles, which are filled by PAS-positive material. The llama fetus was covered by the epidermal membrane, composed of stratified epithelium, with up to seven layers of mono-, bi- or trinucleated cells. The high level of maternal and fetal vascularization surfaces indicates an intense exchange of substances across both surfaces. The metabolic activity shown in the uterine glands suggests an adaptation of the gestation to the high altitudes of the natural habitat of this species.