PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Madruga C.R., Marques A.P.C., Leal C.R.B., Carvalho C.M.E., Araújo F.R. & Kessler R.H. 2000. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay to detect antibodies against Anaplasma marginale. [Avaliação de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):109-112. Embrapa Gado de Corte, Rodovia BR 262 Km 4, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. A rapid indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was developed for measuring antibodies against Anaplasma marginale using a partially soluble antigen prepared from semipurified initial bodies from erythrocytes with 80.0% of rickettsiaemia. This technique utilized alkaline phosphatase and p-nitrophenyl phosphate as reaction indicators. The high sensitivity (100.0%) was confirmed with sera from 100 calves experimentally-infected with A. marginale. All of these animals showed seroconversion before or at the same time of the first rickettsiaemia or even when it was not detected. Also the elevated specificity (94.0%) was confirmed by the low percentage of cross-reactions with sera from animals experimentally-infected with Babesia bigemina and Babesia bovis (1.4 and 6.6%, respectively). Performances of ELISA and indirect fluorescent antibody test (IFAT) with 324 sera from enzootically stable area did not show statistical difference (P>0.05), since the former showed 96.9% and the latter 97.2% of positive reactions. The advantage of this ELISA is a shorter execution time than others developed until now, allowing more samples to be analyzed.

• Anaplasma marginale ELISA serological tests cattle testes sorológicos bovino.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Madruga C.R., Marques A.P.C., Leal C.R.B., Carvalho C.M.E., Araújo F.R. & Kessler R.H. 2000. Evaluation of an enzyme-linked immunosorbent assay to detect antibodies against Anaplasma marginale. [Avaliação de uma prova de imunoadsorção enzimática para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale.] Pesquisa Veterinária Brasileira 20(3):109-112. Embrapa Gado de Corte, Rodovia BR 262 Km 4, Cx. Postal 154, Campo Grande, MS 79002-970, Brazil. Um ensaio de imunoadsorção enzimática (ELISA) indireto, foi desenvolvido para detecção de anticorpos contra Anaplasma marginale, utilizando um antígeno parcialmente solúvel preparado a partir de corpúsculos iniciais semipurificados de eritrócitos com 80,0% de parasitemia. Esta técnica utilizou a fosfatase alcalina e o p-nitrofenil fosfato como indicadores de reação. A alta sensibilidade (100,0%) foi comprovada com soros ele 100 bezerros experimentalmente infectados com A. marginale. Todos estes animais soroconverteram antes ou ao mesmo tempo que a primeira parasitemia foi detectada, ou mesmo quando não se obteve parasitemia. A elevada especificidade (94,0%) foi confirmada pela baixa percentagem ele reações cruzadas com soros de animais infectados experimentalmente com Babesia bigemina e Babesia bovis (1,4 e 6,6%, respectivamente). Os desempenhos do ELISA e da imunofluorescência indireta (IFI) com 324 soros de uma área de estabilidade enzoótica não diferiram estatisticamente (P>0,05), uma vez que o primeiro teste detectou 96,9% de reações positivas, enquanto o segundo, 97,2%. A vantagem deste ELISA foi um menor tempo ele execução do que outros desenvolvidos até o momento, permitindo a análise de um maior·número de soros.

Abstract in English:

The evolution of colostral antibodies to bovine leukemia virus (BLV) was examined by testing serum samples of female calves collected from birth to 270 days of age. To observe the levels of BLV-specific antibodies in dams in the peri-natal period, sérum samples were collected between days 35 pre-partum and days 28 post-partum. The presence of antibodies was examined by agar gel immunodiffusion tests (AGID). One week after ingestion of colostrum 100% (49/49) of the heifers gave positive results for BLV antibodies. The number of antibodiy-positive heifers decreased progressively until animais became sem-negative by day 180 of age. From the 41 sem-positive dams tested during the peri-natal period, three (7.3%) became sem-negative at that time. These data suggest that serologic diagnostic of BLV infectious with AGID should be performed after the 6th month of age in calves in order to avoid false-positive results due to passively acquired maternal antibodies. Moreover, serologic diagnosis in pregnant cows between 2 weeks pre and 4 weeks "post-partum" may give rise to false-negative results.

• Bovine leukemia vírus colostral immunity

Abstract in Portuguese:

A presença de anticorpos colostrais contra o vírus da leucose bovina (BLV), foi examinada através de análise de amostras de soro de terneiras coletadas desde o nascimento até 270 dias de idade. Também foram coletadas amostras de soro de vacas entre 35 dias antes do parto até 28 dias após o parto. As amostras foram examinadas pelo teste de imunodifusão em gel de ágar (IDGA). Uma semana após a ingestão de colostro, 100% (49/49) das terneiras apresentaram anticorpos para o BLV. Posteriormente, houve uma queda progressiva do número de animais soropositivos, com o desaparecimento de níveis detectáveis de anticorpos até que todas as terneiras se tornassem soronegativas aos 180 dias de idade. De 41 vacas analisadas durante o período peri-parto, 3 (7,3%) apresentaram- se sorologicamente negativas neste período. Nas terneiras, os testes deverão ser realizados após o 6 mês de idade a fim de evitar resultados falso-positivos devido a anticorpos maternos passivamente adquiridos. Sugere-se também que para diagnóstico de infecções pelo BLV, a prova de IDGA seja realizada, nas vacas prenhes, somente até duas semanas antes do parto ou após 1 mês do parto.

• Vírus da leucose bovina imunidade colostral

Abstract in English:

Three strains of A/equi 2 virus isolated during outbreaks of equine influenza observed in Brazil during 1969, 1985 and 1987 were compared antigenically, performing hemagglutination inhibition (HI) and serum neutralization (SN) tests. Hyperimmune rooster sera and post-infeccion 21-day-old chicken sera were used. The results of the tests showed minor differences among the strains studied. The two more recent strains (1985 and 1987) are elosely related and both equally different from the 1969 one. This strain showed essentially no difference with the prototype strain (A/equi 2/Miami/1/63). The results suggest that a slight antigenic variation occurred in the hemagglutinin of A/equi 2 virus over the years 1969 to 1985.

• Equine influenza hemagglutination inhibition serum neutralization brazilian strains

Abstract in Portuguese:

Descreve-se um estudo comparativo das características antigênicas de três amostras de vírus de influenza equina (IE) A/equi 2, isoladas no Brasil em 1969, 1985 e 1987, utilizando-se as provas de inibição de hemoaglutinação (IHA) e soroneutralização (SN) em ovos embrionados. Soros de galos imunizados conforme técnica preconizada pela OMS e soros de pintos que sofreram infecção virai foram empregados. Os resultados dessas provas indicaram existir uma ligeira variação antigênica entre as amostras estudadas. As dilas amostras mais recentes (1985 e 1987) estão estreitamente relacionadas e ambas igualmente distanciadas da amostra de 1969 que por sua vez se apresentou mais próxima da cepa protótipo do vírus - A/equi 2/Miami/l/63. Os resultados das provas de IHA são melhor evidenciados com os soros de pintos, sangrados 21 dias pós infecção, que apresentam títulos inibidores mais elevados. As provas de SN confirmaram os achados obtidos com IHA e como seus resultados são expressos em valores maiores, sua análise e interpretação ficam mais fácil de serem demonstradas. Em ambos os tipos de prova, os resultados obtidos sugerem que uma ligeira variação antigênica da hemaglutinina do vírus A/equi 2 ocorreu entre os anos de 1969 e 1985.

• Influenza eqüina inibição de hemoaglutinação soroneutralização amostras de vírus autóctones

Abstract in English:

In order to evaluate the immune response of goats against Corynebacterium pseudotuberculosis, 23 groups, comprising 196 animals, were immunized with several antigenic preparations obtained from the bacteriae, at different time intervals, and using various kinds of adjuvants. The results indicated that the rate of immunoprotection in the immunized animals challenged after 120 days was below 60%. The animals challenged between 8 and 10 months showed protection levels ranging from 44.5 to 22.3%. The lowest rate of incidence of the disease appeared in the anima1s challenged between 30 and 60 days after the last immunization.

• Corynebacterium pseutdotuberculosis C. ovis Caseous lymphadenitis immunoprotection goats

Abstract in Portuguese:

Com o objetivo de observar a imunoproteção desenvolvida em caprinos contra Corynebacterium pseudotuberculosis esses animais foram submetidos a diferentes esquemas de imunização, sendo utilizados inóculos de diferentes preparados antigênicos desta bactéria em intervalos de tempo variados e com diversos adjuvantes. Os resultados revelaram que o percentual de imunoproteção nos animais imunizados e desafiados 180 dias após estava abaixo de 60%. Já os animais desafiados dez meses após a primeira inoculação apresentaram níveis de imunoproteção entre 44,5 e 22,3%. O menor índice da doença foi observado nos animais desafiados entre 30 e 60 dias após a última inoculação do preparado antigênico.

• Corynebacterium pseutdotuberculosis C. ovis linfadenite caseosa imunoproteção caprinos

Abstract in English:

The experiment was carried out during a 2-year period (Oct. 1981 to Oct. 1983), using 163 goats of both sexes with 6 to 12 months of age, The objective was to evaluate the immunogenicity of a vaccine against caseous lymphadenitis, in northeastem Bahia. The vaccine was developed, utilizing the local strain 1002 Curaçá of Corynebacterium pseudotuberculosis isolated from na abscess of a goat. For the preparation, tryptose broth, enriched with yeast extract and lactalbumin, was used. Inactivation was effected with 0.5% formaldehyde, and aluminum gel phosphate was used as an adjuvant. The cell volume varied from 0.65 to 0.7%. The experiment consisted of the following treatments: A1 - animals vaccinated every 6 months; A2-animals vaccinated once a year; and A3 - animals not vaccinated. The goats were vaccinated by subcutaneous inoculation of 3 ml vaccine into each axillar region, and post-mortem examination was made at the end of the experiment. The results showed that 72.1% of the control animals (A3) had moderate to severe lesions in different lymphnodes, and in some cases in the internai organs. Of the vaccinated animals, only 25.9% and 18.9%, at 6 and 12 months interval respectively, showed discrete lesions which were restricted to no more than three lymphnodes per animal. There was a signif cant difference (P<0,05) between the vaccinated and the non-vaccinated animals, but no difference between treatment A1 and A2. It can be estimated that the vaccination gave a protection of 77% against the disease.

• Caseous lymphadenitis vaccine goat

Abstract in Portuguese:

Foram utilizados 163 caprinos de ambos os sexos, de 6 a 12 meses de idade, com o objetivo de avaliar a imunogenicidade de uma vacina contra a linfadenite caseosa, no Nordeste do Estado da Bahia. A vacina foi elaborada com a cepa 1002 Curaçá de C. pseudotuberculosis, isolada de abscesso de caprino, cultivada em caldo tryptose, enriquecida com extrato de levedura mais lactalbumina e inativada com formaldeído a 0,5% durante 7 dias, utilizando-se como adjuvante o gel fosfato de alumínio. O volume celular variou de 0,65 a 0,70%. O experimento constituiu-se dos seguintes tratamentos: A1 - animais vacinados semestralmente; A2 - vacinados anualmente; A3 - animais não vacinados. Os animais vacinados foram inoculados via subcutânea com 3 ml da vacina em cada região axilar e, ao final do experimento, foram necropsiados. Os resultados mostraram que 72,1 % dos caprinos do grupo testemunha A3 se infectaram naturalmente e apresentaram lesão moderada a severa em vários linfonodos e, em alguns casos, nos órgãos internos. Dos vaciandos, apenas 25,9 e 18,9%, respectivamente, para os revacinados com 6 e 12 meses de intervalo, apresentaram lesões discretas que se restringiram a não mais de três linfonodos por animal. Houve diferença significativa (P<0,05) entre os animais vacinados e não vacinados mas não houve diferença entre os tratamentos A1 e A2. Pode-se estimar que a vacina proporcionou 77% de proteção contra a doença.

• Corynebacterium pseudotuberculosis vacina linfadenite caseosa caprinos

Abstract in English:

Three modified live virus vaccines and one inactivated vaccine against rabies were purchased in the market and applied into cattle, aiming the determination of neutralizing antibody levels induced. Each vaccine was injected as a single dose into groups of 10 animals/vaccine, according to manufacturer's recommendations, plus 10 uninoculated controls. Cattle serum samples were collected on days 0, 30 and 60 post-vaccination. The samples were tested against the strain CVS in the mouse neutralization test, and against CVS and ERA strains in the cell culture virus-neutralization test. All the four vaccines were shown not to be good rabies neutralizing antibody inducers. The results obtained with the two tests, despite the low titers observed in both, were not comparable, probably because of the differences in the amount of virus. used for challenge.

• Rabies neutralizing antibody cattle

Abstract in Portuguese:

Três vacinas antirábicas com vírus modificado e uma vacina inativada foram adquiridas no comércio e aplicadas em bovinos, visando a determinação dos níveis de anticorpos neutralizantes induzidos. Cada vacina foi injetada em dose única em grupos de 10 animais/vacina, de acordo com as recomendações dos fabricantes, além de 10 controles não inoculados. Amostras de soro foram coletadas nos dias 0, 30 e 60 pós-vacinação. As amostras foram testadas contra a cepa CVS no teste de vírus-neutralização em camundongos, e contra as cepas CVS e ERA no teste de vírus-neutralização em cultivos celulares. Todas as quatro vacinas demonstraram não ser boas indutoras de anticorpos neutralizantes. Os resultados obtidos com os dois testes, apesar dos baixos títulos observados em ambos, não foram comparáveis, provavelmente devido à diferença na quantidade de vírus utilizada no desafio.

• Raiva anticorpos neutralizantes bovinos

Abstract in English:

The effectiveness of a bacterin in the prevention of pleuropneumonia of swine was tested. The bacterin was prepared from a strain of H. pleuropneumoniae, serotype 5, and adsorved to aluminum hydroxide. Six sows were vaccinated at 60 and 100 days of gestation (VS) and seven were not vaccinated (NVS). Piglets born to VS were divided into three treatment groups: unvaccinated; vaccinated at 40 days of age; and vaccinated at 25 and 40 days of age. Those born to the NVS were divided into two groups: unvaccinated and vaccinated at 25 and 40 days of age. On third of the piglets from each treatment groups was challenged with a strain of H. pleuropneumoniae, serotype 5, at 70 days of age. In piglets born to VS, respiratory symptoms were observed less frequently, H. pleuropneumoniae was found less often in the nasal cavity after challenge, a lower mortality rate was noted, and less severe lesions characteristic of pleuropneumonia were seen than in piglets born to NVS. Piglet vaccination schedules did not interfere with the above mentioned parameters.

• Vaccination Haemophilus pleuropneumoniae swine pleuropneumoniae

Abstract in Portuguese:

Testou-se a eficiência de uma bacterina preparada com H. pleuropneumoniae, sorotipo 5, e adsorvida em hidróxido de alumínio, na prevenção de pleuropneumonia suína. Vacinou-se seis matrizes (MV) aos 60 e 100 dias de gestação, e sete não foram vacinadas (MNV). Os leitões originados das MV foram divididos em três tratamentos: não vacinados, vacinados aos 40 dias e aos 25 e 40 dias de idade. Os originados das MNV foram divididos em dois grupos: vacinados aos 25 e 40 dias e não vacinados. Um terço dos leitões de cada tratamento foi inoculado com H. pleuropneumoniae, sorotipo 5, aos 70 dias de idade. Leitões originados de MV apresentaram menor ocorrência de sintomas respiratórios, menor presença de H. pleuropneumoniae na cavidade nasal apos a agressão, menor índice de mortalidade e menor ocorrência de severidade de lesões compatíveis com a pleuropneumonia suína do que aqueles originados de MNV. Os esquemas de vacinação aplicados aos leitões no interferiram nos parâmetros acima mencionados.

• Vacinacan Haemophilus pleuropneu-moniae pleuropneumonia suína

Abstract in English:

The study of a vaccine containing 13 cultures of Campylobacter fetus subsp. venerealis and one intestina/is was carried out. These cultures were isolated in Rio de Janeiro State from animals suffering of reproductive diseases, from an aborted fetus and from the foreskin cavity of infected bulis. Those cultures were inactivated by a 0,5% formalin solution and treated by heating at 37ºC for 24h in oily adjuvant. The immunogenicity of the vaccine was assayed on two groups of eight half-breed virgin Holstein aging over two year old weighing over 300 kg. This was performed by infecting subcutanously 5.0 m1 of the vaccine in both groups. The second group animals received a 5.0 m1 booster 14 days later. lndirect immunofluorescence and serum-agglutination test showed an optimal antibody production at 30th and 36th days, respectively for animals vaccinated with one and two doses. Sixty days after the first vaccination the heifers were infected with 4 x 106 cells (culture RJ 14, Campylobacter fetus subsp. venerealis) at the moment of artificial insemination at the cervicovaginal region. The reproductive efficacy of 100 and 75%, for one and two doses respectively, with three inserninations, showed to be the best way to assay immunity confered by the vaccine. On the other hand, for the eight heifers composing group II, 15 inseminations were necessary for na efficiency of 100%, or 1.8 semen doses, for fertilization. The result was superior to that of group III, in which 16 inseminations were necessary for pregnancy in 7 out of 8 heifers; na efficiency of 7 5%, or 2.2 semen doses, for fertilization. The control group of 8 heifers presented only 4 pregnancies from 19 inserninations, or 4. 7 semen doses, for fertilization. The opsonizating effect of IgG was the responsible by the absence of microorganisms in the cervico mucous of the vaccinated heifers. However the presence of rnicroorganisms in some heifers did not affect the reproductive efficacy in these animals.

• Vibrio fetus vaccination vibriosis control method evaluation

Abstract in Portuguese:

O presente estudo trata de uma vacina contendo 13 culturas de Campylobacter fetus subsp. venerealis e uma cultura do Campylobacter fetus subps. intestinalis, isoladas no Estado do Rio de Janeiro, provenientes de animais com problemas de reprodução, de um feto abortado e da cavidade prepucial de touros infectados, inativada pelo formal a 0,5% e normalizada pelo calor à 37°C por 24h em adjuvante oleoso. Para a pesquisa da ação imunogênica da vacina foram empregados dois grupos compostos por oito novilhas virgens mestiças de holandês, com idades acima de dois anos e pesos acima de 300 kg. A vacinação realizou-se com uma aplicação de 5,0 m1 da vacina na região cervical via subcutânea, sendo que no segundo grupo, houve uma vacinação com mais 5,0 m1 com intervalo de 14 dias entre as doses. Os testes de imunofluorescência indireta e de soroaglutinação, indicavam haver um ótimo pique na média da produção de anticorpos para o grupo vacinado com uma dose ao 309 dia e no 369 dia para o grupo vacinado com duas doses. Após 60 dias da primeira vacinação, os animais foram contaminados com 4 x .106 células da amostra RJ 14 do Campylobacter fetus subsp. venerealis no momento da primeira inseminação artificial na região anterior da vagina. A eficâcia de 100 e 75% para uma dose e duas doses da vacina respectivamente com base no desempenho reprodutivo obtido com no máximo três inseminações, demonstrou ser o melhor método de avaliação da imunidade conferida pela vacina. Por outro lado, para as oito novilhas que compunham o grupo II foram necessárias 15 inseminações para se obter a eficiência de 100%, ou seja, 1,8 dose de sêmen por fecundação. Tal resultado foi superior ao do grupo III, no qual, dentre oito novilhas, sete ficaram gestantes, sendo necessárias 16 inseminações para se obter uma eficiência de 75%, ou seja, 2,2 doses de sêmen por fecundação. O grupo controle apresentou apenas quatro novilhas gestantes e requereu 19 inseminações, ou seja, 4, 7 doses de sêmen por fecundação. A opsonização pelo IgG foi a responsável pela ausência do microrganismo no muco cérvico-vaginal de novilhas vacinadas, porém, a presença de microrganismo no muco cérvico-vaginal de algumas novilhas não afetou a eficiência r*eprodutiva desses animais.

• Vibrio fetus vacinação vibriose método de controle avaliação

Abstract in English:

Subcutimeous inoculation of 30-day old SPF chickens with a·commercial oilaemulsfon Mycoplasma gallisepticum bacterin (MG-Bac, lot 23009, Salsbury Lab., Inc., Charles City,·Iowa 50616, USA) protected them against chronic respiratory disease. The·birds were challenged 30 days after vaccination with the R strain of M. gallisepticum injected into the left thoracic air·sac. The vaccinated birds presented, before and after the challenge, geometric mean titers higher than the nonvaccinated ones. Air sacculitis lesions bccurred with lower frequency and intensity among the vaccinated birds than among the nonvaccinated, showing a positive relationship between the protection and the serological response.

• Mycoplasma gallisepticum chronic respiratory disease chicken vaccination oil-emultion bacterin

Abstract in Portuguese:

A inoculação subcutânea de galinhas "SPF" de 30 dias de idade com uma vacina oleosa comercial de Mycoplasma gallisepticum (MG-Bac, partida 23009, Salsbury Lab., Inc., Charles City, Iowa 50616, EUA) protegeu-as contra a doença respiratória crônica. As aves foram desafiadas 30 dias após a vacinação pela injeção no saco aéreo torácico esquerdo com a amostra R de M gallisepticum. As aves vacinadas apresentaram, antes e após o desafio, médias geométricas dos títulos de inibição da hemaglutinação maiores do que as aves não vacinadas. As lesões de aerossaculite ocorreram com frequência e intensidade menores entre as aves vacinadas, relacionando-se positivamente proteção obtida com a resposta sorológica observada.

• Mycoplasma gallisepticum doença respiratória crônica galinhas-vacinação bacterina oleosa

Abstract in English:

The effectiveness of a bacterin in the prevention of swine atrophic rhinitis (AR) was tested. The bacterin was prepared with Bordetella bronchiseptica and adsorved to aluminum hydroxide. Six sows were vaccinated at 60 and 100 days of gestation and their litters at seven and 28 days of age. Five sows and their litters were used as an invaccinated control group. All piglets were challenged with B. bronchiseptica at three, four and five days of age. The vaccination significantly reduced the clinical signs (P < 0.001), occurrence and severity (P < 0.01) of nasal turbinate atrophy, but it did not reduce the rate of infection at 70 days of age.

• Swine atrophic rhinitis Bordetella bronchiseptica vaccination immunoprophylaxis

Abstract in Portuguese:

Testou-se a eficiência de uma bacterina preparada com B. bronchiseptica e adsorvida a hidróxido de alumínio, na prevenção da rinite atrófica dos suínos. Seis porcas foram vacinadas, aos 60 e 100 dias de gestação, e suas leitegadas, aos sete e 28 dias de idade. Cinco leitegadas não vacinadas, nascidas de porcas não vacinadas, serviram de controle. Todos os leitões foram inoculados com B. bronchiseptica aos três, quatro e cinco dias de idade. A vacinação contribuiu para reduzir significativamente os sintomas clínicos da doença (P < 0,001) e a ocorrência e gravidade das lesões dos cornetos nasais (P < 0,01), mas não eliminou a infecção aos setenta dias de idade.

• Rinite atrófica dos suínos Bordetella bronchiseptica vacinação imunoprofilaxia