PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Santos M.A.M., Gradela A., Moraes E.A., Souza W.L., Alves N.G., Costa e Silva J.M. & Matos W.C.G. 2015. [Sperm characteristics in fresh and cryopreserved semen of Nordestino stallions breed.] Características do sêmen a fresco e descongelado de garanhões da raça Nordestina. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(11):925-932. Colegiado de Medicina Veterinária, Fundação Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia 407 Km 12, Lote 543, Projeto Nilo Coelho C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: agradela@hotmail.com This paper describes the seminal characteristics of the plasma membrane of frozen-thawed sperm. Nineteen ejaculates of Nordestino horse breed. The aspects analyzed in the physical parameters of fresh semen were total and progressive motility and your longevity after dilution or thawed; sperm morphology, functional and structural integrity of the plasma membrane of the sperm and the sperm-binding ability to the perivitelline membrane of the yolk (MPV) after thawed. The variables were assessed by ANOVA with post hoc test of Student Newman-Keuls test (P<0.05). The total and progressive motility were higher in diluted semen than thawed (P<0.05). The average percentage of the major, minor and total defects was lower than the limit recommended by the CBRA. The percentage of reactive to hypo-osmotic swelling test was 14.21±1.12%, the intact membrane detected by supravitally test was 62.22±9.06% and the SYBR-14 was 81.47±26.9. The ability of sperm to bind to the MPV after thawing semen was 230.39±57.09. The total and progressive motility at time 0 min of termo resistance test was higher than to 150 minutes (P<0.05), and no difference was observed in the times 10 and 30 minutes. The results demonstrate that the use of additional laboratory tests help in the process of evaluation of samples, making possible to obtain more reliable and accurate information. Although cryopreservation has caused decrease in sperm motility and was used diluents with amides to diluted and cryopreservation protocol and this minimized the osmotic damage to sperm cells and maintained the morphological, functional and structural integrity of the plasma membrane of the sperm. These results are a reference for future studies since there are no comparative data on this breed.

• Sperm characteristics semen sêmen

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Santos M.A.M., Gradela A., Moraes E.A., Souza W.L., Alves N.G., Costa e Silva J.M. & Matos W.C.G. 2015. [Sperm characteristics in fresh and cryopreserved semen of Nordestino stallions breed.] Características do sêmen a fresco e descongelado de garanhões da raça Nordestina. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(11):925-932. Colegiado de Medicina Veterinária, Fundação Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia 407 Km 12, Lote 543, Projeto Nilo Coelho C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: agradela@hotmail.com ste estudo descreveu as características seminais, da membrana plasmática e do acrossoma de espermatozoide congelado/descongelado de 19 ejaculados de garanhões da raça Nordestina. Os aspectos analisados incluíram os parâmetros físicos do sêmen fresco; a motilidade e a longevidade do sêmen diluído e descongelado; a morfologia espermática, integridade funcional e estrutural da membrana plasmática do espermatozoide e a habilidade de ligação do espermatozoide à membrana perivitelina da gema do ovo de galinha do sêmen descongelado. As variáveis foram avaliadas pela ANOVA com post hoc teste de Student Newman-Keuls (P<0,05). A MT e a MP foram maiores (P<0,05) no sêmen diluído do que no descongelado. A percentagem média de defeitos maiores, menores e totais foi muito inferior ao limite recomendado pelo CBRA. A porcentagem de reativos ao HOST foi de 14,21±1,12% e a porcentagem média de membranas íntegras detectadas pelo teste supravital de 62,22±9,06% e pela sonda SYBR-14 de 81,47±26,90. O número médio de espermatozoides ligados à MPV após a descongelação do sêmen foi de 230,39±57,09. A MT e MP no tempo 0 min do TTR foi superior (P<0,05) em relação a 150 min, não diferindo nos tempos 10 min e 30 min. Os resultados demonstram que a utilização dos testes laboratoriais adicionais ajudam no processo de avaliação das amostras, possibilitando a obtenção de informações mais confiáveis e precisas. Embora a criopreservação tenha provocado queda na motilidade seminal, o uso de diluidor contendo amidas minimizou os danos osmóticos nas células espermáticas e manteve a integridade morfológica, funcional e estrutural da membrana plasmática do espermatozoide. Estes resultados são um referencial em estudos futuros uma vez que, inexistem dados comparativos nesta raça.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Santos J.D.F., Eufrasio R.O., Pinheiro G.F.M., Alves F.R., Carvalho M.A.M. & Machado Júnior A.A.N. 2015. [Influence of the year’s season on the testicular structure in sheep bred in southern Piaui, Brazil.] Influência da estação do ano do ano sobre a estrutura testicular em ovinos criados no sul do Estado do Piauí. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(11):933-939. Curso de Medicina Veterinária, Universidade Federal do Piauí, Rodovia Municipal Bom Jesus-Viana Km 1, Planalto Horizonte, Bom Jesus, PI 64900-000, Brazil. E-mail: machadojunior@gmail.com To evaluate influence of the year season related with the testicular structure of cross bred sheep, the testes of ten 2 to 3-year-old sheep were sectioned and fixed in for 24 hours in bouin’s solution. The fragments were subjected to histological processing, embedded in paraffin and stained with hematoxylin-eosin. The volumetric proportion of testicular compartments, the seminiferous tubules, seminiferous epithelial height and frequency of the seminiferous epithelium stages of the cycle were evaluated. Data were subjected to analysis of variance at 5% probability. The results showed that all values studied were influenced by year’s season. The tubular diameter was 143.98±17.83 and 170.37±26.64&#956;m, the seminiferous epithelium height was 44.92±9.23 and 50.06±13.61&#956;m, and the testicle parenchyma volume density was 78.32±16.68 and 80.13±15.14% in the dry and rainy periods, respectively. The germ cells and Sertoli cells quantification showed that all values were higher in the rainy season compared with the dry season. It can be concluded that the year season interfered in the testicular structure, given that all values showed significant differences between the seasons, as the values were more pronounced during the rainy season.

• Spermatogenesis testis espermatogênese testículo

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Santos J.D.F., Eufrasio R.O., Pinheiro G.F.M., Alves F.R., Carvalho M.A.M. & Machado Júnior A.A.N. 2015. [Influence of the year’s season on the testicular structure in sheep bred in southern Piaui, Brazil.] Influência da estação do ano do ano sobre a estrutura testicular em ovinos criados no sul do Estado do Piauí. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(11):933-939. Curso de Medicina Veterinária, Universidade Federal do Piauí, Rodovia Municipal Bom Jesus-Viana Km 1, Planalto Horizonte, Bom Jesus, PI 64900-000, Brazil. E-mail: machadojunior@gmail.com Objetivou-se avaliar a influência da estação do ano sobre a estrutura testicular de ovinos SRD. Foram utilizados 10 animais com idade entre dois e três anos. Os testículos foram seccionados e fixados em solução de Bouin por 24h. Os fragmentos foram submetidos ao processamento histológico, emblocados em parafina e corados com hematoxilina eosina. Foram avaliadas a proporção volumétrica dos compartimentos testiculares, o diâmetro dos túbulos seminíferos, altura do epitélio seminífero e frequências dos estágios do ciclo do epitélio seminíferos. Os dados foram submetidos à análise de variância a 5% de probabilidade, do programa estatístico SAS 9.0. Os resultados revelaram todos os valores pesquisados sofreram influência da estação do ano. O valor do diâmetro tubular foi de 143,98±17,83 e 170,37±26,64µm, a altura do epitélio seminífero foi de 44,92±9,23 e 50,06±13,61µm e a proporção volumétrica foi de 78,32±13,68 e 80,13±15,14% nos períodos seco e chuvoso, respectivamente. A quantificação das células germinativas e de Sertoli mostrou todos os valores foram maiores no período chuvoso quando comparados com o seco. Concluiu-se que a estação do ano interferiu na estrutura testicular, tendo em vista que todos os valores da proporção volumétrica dos componentes testiculares mostraram diferença significativa entre as estações do ano, pois os valores foram mais acentuados no período chuvoso.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Garcia-Paloma J.A. 2015. A bull breeding soundness evaluation system with greater emphasis on scrotal circumference. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(9):817-821. Centro de Biotecnología Animal, Servicio Regional de Investigación y Desarrollo Agroalimentario, Camino de Rioseco 1225, Deva, Gijón 33394, Asturias, Spain. E-mail: jagarcia@serida.org Bull breeding soundness evaluation (BBSE) is a method applied to reduce the risk of using subfertile bulls in herds. There are currently two BBSE systems, those of the Society for Theriogenology (SFT) and the Western Canadian Association of Bovine Practitioners (WCABP). Scrotal circumference (SC), sperm motility (SM) and normal sperm (NS) of 454 bulls aged between 12 and 15 months of a Spanish beef breed were used to compare both systems, and since there is no agreement on that BBSE system must be applied in Spain, a single one was proposed for its consideration. SC was adjusted to 15 months (SC15) and the mean of the BBSE traits was: SC15 (34.2±2.4cm), SM (76.6±14.6%) and NS (76.8±12.3%). In the PROPOSED system, the SM and NS thresholds were those defined by the WCABP system, while the SC15 thresholds were set by combining the SFT threshold and SC15±1SD in order to establish four classification categories, the three proposed by the WCABP system: unsatisfactory, questionable and satisfactory, and other category, called superior, for bulls with SM&#8805;60%, NS&#8805;70% and SC15&#8805;Mean+1SD. The PROPOSED system scored fewer bulls as unsatisfactory than the SFT and the WCABP systems (8.6%, 23.6% and 22.5%, respectively; P<0.01), while the percentage of bulls from worst to best in the other three categories under the PROPOSED system was: 26.0%, 54.2% and 11.2%, respectively. In conclusion, the PROPOSED system gives more emphasis to SC, sets differences between bulls classified as satisfactory by the other systems and can be considered a good system for Spain and for other countries that have no defined their own system.

• Scrotal circumference sperm motility sperm morphology circunferência escrotal espermatozoide

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Garcia-Paloma J.A. 2015. A bull breeding soundness evaluation system with greater emphasis on scrotal circumference. Pesquisa Veterinária Brasileira 35(9):817-821. Centro de Biotecnología Animal, Servicio Regional de Investigación y Desarrollo Agroalimentario, Camino de Rioseco 1225, Deva, Gijón 33394, Asturias, Spain. E-mail: jagarcia@serida.org Bull breeding soundness evaluation (BBSE) is a method applied to reduce the risk of using subfertile bulls in herds. There are currently two BBSE systems, those of the Society for Theriogenology (SFT) and the Western Canadian Association of Bovine Practitioners (WCABP). Scrotal circumference (SC), sperm motility (SM) and normal sperm (NS) of 454 bulls aged between 12 and 15 months of a Spanish beef breed were used to compare both systems, and since there is no agreement on that BBSE system must be applied in Spain, a single one was proposed for its consideration. SC was adjusted to 15 months (SC15) and the mean of the BBSE traits was: SC15 (34.2±2.4cm), SM (76.6±14.6%) and NS (76.8±12.3%). In the PROPOSED system, the SM and NS thresholds were those defined by the WCABP system, while the SC15 thresholds were set by combining the SFT threshold and SC15±1SD in order to establish four classification categories, the three proposed by the WCABP system: unsatisfactory, questionable and satisfactory, and other category, called superior, for bulls with SM&#8805;60%, NS&#8805;70% and SC15&#8805;Mean+1SD. The PROPOSED system scored fewer bulls as unsatisfactory than the SFT and the WCABP systems (8.6%, 23.6% and 22.5%, respectively; P<0.01), while the percentage of bulls from worst to best in the other three categories under the PROPOSED system was: 26.0%, 54.2% and 11.2%, respectively. In conclusion, the PROPOSED system gives more emphasis to SC, sets differences between bulls classified as satisfactory by the other systems and can be considered a good system for Spain and for other countries that have no defined their own system.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Elías F.G. 2015. Histochemical study of the oviducal gland and analysis of the sperm storage tubules of Mustelus schmitti Springer, 1939 (Chondrichthyes, Triakidae). Pesquisa Veterinária Brasileira 35(8):741-748. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional del Sur, San Juan 670, Bahía Blanca, Buenos Aires, Argentina. E-mail: ferelias@criba.edu.ar The paired oviducal glands of immature and mature females of Mustelus schmitti were examined macro and microscopically. Findings indicate that these glands possessed the same zonation as in most chondrichthyans from anterior to posterior: club, papillary, baffle and terminal zones. The whole gland is composed by simple tubular glands that connect with transverse grooves all along the organ. The club zone presents a typical indian club shape with a simple columnar and ciliated epithelium including secretory cells PAS (+) and AB (+). The papillary zone is characterized by lamella forming small and long cones in numbers of three. The epithelium of this zone contains ciliated cells with apical nuclei and secretory cells with basal nuclei that stain AB (+)The baffle zone consists of apically flattened lamellae alternating with spinnerets which are small projections disposed by both sides of the plateau. This whole structure is present in number of 8 or 9 units. A simple columnar ciliated epithelium covers the plateau and spinnerets and no AB or PAS staining is observed. The epithelium of the terminal zone is PAS (-) and AB (+), and elongated tubules, that run adjacent to the baffle zone are the site where groups of spermatozoa are clearly observed in the lumen. The epithelium of the sperm storage tubules do not stain with any of the dyes tested. Sperm was also observed in the baffle zone, presumably in its way to the fecundation in the oviduct because it displays no aggregation pattern and was between the folds of the epithelium. By scanning electron microscopy sperm was observed in the club and baffle zones in a gland which belonged to a pregnant female.

• Oviductal gland sperm storage Mustelus schmitti Chondrichthyes oviduto

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Elías F.G. 2015. Histochemical study of the oviducal gland and analysis of the sperm storage tubules of Mustelus schmitti Springer, 1939 (Chondrichthyes, Triakidae). Pesquisa Veterinária Brasileira 35(8):741-748. Departamento de Biología, Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional del Sur, San Juan 670, Bahía Blanca, Buenos Aires, Argentina. E-mail: ferelias@criba.edu.ar The paired oviducal glands of immature and mature females of Mustelus schmitti were examined macro and microscopically. Findings indicate that these glands possessed the same zonation as in most chondrichthyans from anterior to posterior: club, papillary, baffle and terminal zones. The whole gland is composed by simple tubular glands that connect with transverse grooves all along the organ. The club zone presents a typical indian club shape with a simple columnar and ciliated epithelium including secretory cells PAS (+) and AB (+). The papillary zone is characterized by lamella forming small and long cones in numbers of three. The epithelium of this zone contains ciliated cells with apical nuclei and secretory cells with basal nuclei that stain AB (+)The baffle zone consists of apically flattened lamellae alternating with spinnerets which are small projections disposed by both sides of the plateau. This whole structure is present in number of 8 or 9 units. A simple columnar ciliated epithelium covers the plateau and spinnerets and no AB or PAS staining is observed. The epithelium of the terminal zone is PAS (-) and AB (+), and elongated tubules, that run adjacent to the baffle zone are the site where groups of spermatozoa are clearly observed in the lumen. The epithelium of the sperm storage tubules do not stain with any of the dyes tested. Sperm was also observed in the baffle zone, presumably in its way to the fecundation in the oviduct because it displays no aggregation pattern and was between the folds of the epithelium. By scanning electron microscopy sperm was observed in the club and baffle zones in a gland which belonged to a pregnant female.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Tolentino M.L.D.L., Oliveira L.H., Sousa O.B., Machado Júnior A.A.N., Assis Neto A.C., Carvalho M.A.M. & Menezes D.J.A. 2014 [Anatomical and structural parameters of reproductive organs of crossbred rams native from the state of Paraíba, Brazil, with and without scrotal bipartition: study of the scrotal skin and spermatic cord.] Parâmetros anátomo-estruturais de órgãos reprodutivos de ovinos sem raça definida (SRD) nativos do estado da Paraíba, com e sem bipartição escrotal: estudo de pele escrotal e funículo espermático. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):709-715. Área de Morfofisiología, Unidade Acadêmica de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Campina Grande, Av. Universitária s/n, Patos, PB 58700-970, Brazil. E-mail: mikaeltolentino@gmail.com Forty-two crossbred rams were used, divided according to their scrotal configuration. Twelve of these animals were used to investigate the testicular biometry and scrotal skin histology. The other animals were used to study the spermatic cord. The animals were placed in a group of 21 animals without scrotal bipartition (GEI) and another with scrotal bipartition (GEII) which did not reach 50% of the length of the scrotum’s longitudinal axis. In each group, scrotal skin fragments from six rams and spermatic cord fragments from 5 others were collected, processed by routine histological tests and analyzed with a microscope. In 10 rams latex was injected into the testicular artery to obtain vascular molds and the artery length. Comparison of groups GEI and GEII showed no significant statistical differences (p<0.05) between scrotal thickness (epidermis and dermis), histological constituency of the scrotal skin, number of sudoriferous glands per area, scrotal bipartition length or testicular biometric parameters. However, the total length of the testicular arteries of GEI was greater than of GEII (p<0.05). It was concluded from the morphological parameters analyzed that scrotal bipartition in rams did not influence the skin structure, scrotal bipartition or testicular biometry when compared with animals that did not present this characteristic. Further studies should be carried out to elucidate the appearance of this characteristic in rams and whether it is desirable or not for improved production of these animals in warm climate regions.

• Scrotal partition bipartição escrotal

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Tolentino M.L.D.L., Oliveira L.H., Sousa O.B., Machado Júnior A.A.N., Assis Neto A.C., Carvalho M.A.M. & Menezes D.J.A. 2014 [Anatomical and structural parameters of reproductive organs of crossbred rams native from the state of Paraíba, Brazil, with and without scrotal bipartition: study of the scrotal skin and spermatic cord.] Parâmetros anátomo-estruturais de órgãos reprodutivos de ovinos sem raça definida (SRD) nativos do estado da Paraíba, com e sem bipartição escrotal: estudo de pele escrotal e funículo espermático. Pesquisa Veterinária Brasileira 34(7):709-715. Área de Morfofisiología, Unidade Acadêmica de Medicina Veterinária, Universidade Federal de Campina Grande, Av. Universitária s/n, Patos, PB 58700-970, Brazil. E-mail: mikaeltolentino@gmail.com Foram utilizados 42 ovinos sem raça definida, divididos segundo a configuração escrotal. Destes animais, 12 foram utilizados na investigação da biometria testicular e histologia da pele escrotal. Os demais foram destinados ao estudo do funículo espermático. Os animais foram agrupados em um grupo de 21 animais sem bipartição escrotal (GEI) e 21 com bipartição escrotal, (GEII), esta não atingindo 50% do comprimento do eixo longitudinal do escroto. Em cada grupo, em 6 animais foram coletados fragmentos da pele do escroto e em 5 do funículo espermáticos, e processados em rotina histológica e analisados em microscopia de luz; e em 10 foram injetados látex na artéria testicular para obtenção de moldes vasculares e obtenção do comprimento da artéria. Quando comparados os grupos GEI e GEII, não foram encontradas diferenças estatísticas significativas (p<0,05) entre a espessura do escroto (epiderme e derme), constituição histológica da pele escrotal, número de glândulas sudoríparas por área, comprimento do funículo espermático ou parâmetros biométricos testiculares. Entretanto, o comprimento total das artérias testiculares do GEI foi maior do que o GEII (p<0,05). Concluiu-se, com base nos parâmetros morfológicos analisados, que a bipartição escrotal em ovinos não influenciou na estrutura da pele, funículo ou biometria testicular quando comparado aos animais que não apresentavam esta característica. Outros estudos merecem atenção para desmistificar o porquê do aparecimento dessa característica em ovinos e se esta característica é ou não desejável para melhoria na produção desses animais em regiões de clima quente.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Nunes A.K.R., Gouveia B.B.., Matos M.H.T., Pires I.C., Franzo V.S., Faria M.D. & Gradela A. 2013. [Morphological and functional analysis of spermatogenesis in guinea pigs (Cavia porcellus) from pre-puberty to post-puberty.] Análise morfológica e funcional do processo espermatogênico em cobaios (Cavia porcellus) da pré-puberdade até a pós-puberdade. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(Supl.1):1-7. Colegiado de Medicina Veterinária, Fundação Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia 407 Km 12, Lote 543, Projeto Nilo Coelho C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: agradela@hotmail.com This study describes the morphological and functional analysis of spermatogenesis in guinea pigs (Cavia porcellus) with five (W5), six (W6), nine (W9) and eleven (W11) weeks of age (n=5/group). The aspects analyzed include counts of cell populations present in stage 1 of seminiferous epithelium cycle (SEC), efficiency of spermatogonial mitosis (EMi), meiotic production (EMe), overall yield of spermatogenesis (EOS), Sertoli cell index (SCI) and carrying capacity of Sertoli cells (CCSC). The results showed that the average number of spermatogonia type A, primary spermatocytes in pré-leptóteno/leptóteno, primary spermatocytes in pachytene, total spermatogenic cells and Sertoli cells showed numerical variations according to age; however they were statistically not detected, while round spermatids increased significantly at puberty and then stabilized. The spermatogenic production of 5 to 11-week-old guinea pigs did not reach the stabilization point, and the RMi, RME, EOS, SCI and CCSC showed significant number variation as a function of age. The results demonstrate that Cavia porcellus in post-pubertal stage 2 are an advantageous experimental model to address studies on the processes of homologous recognition, alignment, and synapsis during meiotic prophase; intrinsic yield of spermatogenesis in guinea pigs is similar to Wistar rats, paca and agouti (Dasyprocta sp.) and lower than in cavies, whereas the functional efficiency of Sertoli cells is higher than in agouti and Wistar rats, and lower than in pacas, spiny rat and collared peccaries. We conclude that in guinea pigs the spermatogenesis is fully established at 6 weeks of age, indicating the pubertal stage of sexual development, and until week 11 they do not reach the maximum daily sperm production and therefore sexual maturity.

• Guinea pig Cavia porcellus spermatogenesis testicle seminiferous tubule cobaios espermatogênese testículo túbulo seminífer

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Nunes A.K.R., Gouveia B.B.., Matos M.H.T., Pires I.C., Franzo V.S., Faria M.D. & Gradela A. 2013. [Morphological and functional analysis of spermatogenesis in guinea pigs (Cavia porcellus) from pre-puberty to post-puberty.] Análise morfológica e funcional do processo espermatogênico em cobaios (Cavia porcellus) da pré-puberdade até a pós-puberdade. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(Supl.1):1-7. Colegiado de Medicina Veterinária, Fundação Universidade Federal do Vale do São Francisco, Rodovia 407 Km 12, Lote 543, Projeto Nilo Coelho C1, Petrolina, PE 56300-000, Brazil. E-mail: agradela@hotmail.com Este estudo descreveu as análises morfológica e funcional do processo espermatogênico em cobaios (Cavia porcellus) de cinco (S5); seis (S6); nove (S9) e onze (S11) semanas de idade (N=5/grupo). Os aspectos analisados incluíram a contagem das populações celulares presentes no estádio 1 do ciclo do epitélio seminífero (CES), eficiência das mitoses espermatogoniais (RMi), produção meiótica (RMe), rendimento geral da espermatogênese (RGE), índice de células de Sertoli (ICS) e capacidade de suporte das células de Sertoli (CSCS). Os resultados mostraram que número médio de espermatogônias A, espermatócitos primários em pré-leptóteno/leptóteno, espermatócitos primários em paquíteno, células espermatogênicas totais e células de Sertoli mostraram variações numéricas em função da idade, entretanto, não detectadas estatisticamente, enquanto espermátides arredondadas aumentaram significativamente na puberdade e depois se estabilizaram. A produção espermatogênica de cobaios de 5 a 11 semanas não atingiu o ponto de estabilização e o RMi, RMe, RGE, ICS e CSCS mostraram variação numérica significativa em função da idade. Os resultados demonstraram que Cavia porcellus na pós-puberdade 2 são um modelo experimental vantajoso para estudos de processos de reconhecimento homólogos, alinhamento, e sinapses durante a prófase meiótica; o rendimento intrínseco da espermatogênese em cobaios é semelhante ao relatado para ratos Wistar, pacas e cutias (Dasyprocta sp.) e menor do que em preás, enquanto que a eficiência funcional das células de Sertoli é superior a de cutias e ratos Wistar e inferior à de pacas, rato espinhoso e catetos. Concluiu-se que em cobaios a espermatogênese está completamente estabelecida na semana 6 de idade, indicando a fase púbere do desenvolvimento sexual, e até a semana 11 eles não atingiram a produção espermática diária máxima e, portanto, a maturidade sexual.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Mota Filho A.C., Silva H.V.R., Freitas L.A., Nunes T.G.P., Araújo A.A. & Silva L.D.M. 2013. [Cooling of the canine epididymis at 4°C and recovery of epididymal sperm using ACP-106c.] Refrigeração do epidídimo canino a 4°C e recuperação dos espermatozoides epididimários utilizando ACP-106c. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1155-1160. Laboratório de Reprodução de Carnívoros, Universidade Estadual do Ceará, Campus do Itaperi, Avenida Paranjana 1700, Fortaleza, CE 60740-903, Brazil. E-mail: acmfmedvet@hotmail.com The study aimed to assess the quality of sperm recovered from the epididymal cauda after cooling the complex testis-epididymis (CTE) of dogs using ACP-106c extender. Sixty adult male dogs, weighing 10-20 kg were used. After euthanasia, CTE was removed and it was immersed in 0.9% saline and transported to the laboratory in cooler at 30°C. For cooling and recovery of epididymal spermatozoa, the 60 pairs of CTE were divided into four groups, according to the refrigeration time of the CTE and subsequent sperm recovery: G0h, G6h, G12h and G18h, wherein each pair of CTE remained zero, six, 12 or 18 hours at 4°C respectively. The recovery of sperm epididymal tail was conducted by flotation technique using ACP-106c or Tris extender. For each epididymis, it was added 1.0 mL of either extenders, preheated to 37°C for 5 minutes. They were then centrifuged at 800g/5 minutes to remove the cell debris. Morphology, functionality and total and progressive motility, and parameters obtained by CASA were evaluated. Data were analyzed by ANOVA followed by Turkey test (P <0.05). In all parameters assessed, there was no difference between the extenders used (P>0.05). The values of total motility groups G0h, G6H, G12H, and G18h for ACP-106c were 84.4±7.7, 81.6±11.6, 88.3±6.5 and 69.5±16.9 respectively, and for Tris 85.2±8.7, 77.4±14.3, 79.0±17.8 and 65.4±17.9 respectively. A decrease in sperm quality was observed after 18 hours of cooling in both extenders. Thus it can be concluded that the ACP-106c may be used to recover the epididymal spermatozoa chilled and may be viable for up to 12h cooling.

• Epididymis epidídimo

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Mota Filho A.C., Silva H.V.R., Freitas L.A., Nunes T.G.P., Araújo A.A. & Silva L.D.M. 2013. [Cooling of the canine epididymis at 4°C and recovery of epididymal sperm using ACP-106c.] Refrigeração do epidídimo canino a 4°C e recuperação dos espermatozoides epididimários utilizando ACP-106c. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(9):1155-1160. Laboratório de Reprodução de Carnívoros, Universidade Estadual do Ceará, Campus do Itaperi, Avenida Paranjana 1700, Fortaleza, CE 60740-903, Brazil. E-mail: acmfmedvet@hotmail.com Mota Filho A.C., Silva H.V.R., Freitas L.A., Nunes T.G.P., Araújo A.A. & Silva L.D.M. 2013. Objetivou-se avaliar a qualidade dos espermatozoides recuperados da cauda do epidídimo após a refrigeração do complexo testículo-epidídimo (CTE) de cães usando o diluidor ACP-106c. Foram utilizados 60 cães machos adultos, com peso de 10-20 kg. Após a eutanásia, removeu-se o CTE que foi imerso em solução fisiológica 0,9% e transportado em caixa térmica ao laboratório a 30°C. Para a refrigeração e recuperação dos espermatozoides epididimários, os 60 pares do CTE foram divididos em 4 grupos, de acordo com o tempo de refrigeração do CTE e posterior recuperação espermática: G0h, G6h, G12h e G18h, em que cada par do CTE permaneceu por zero, seis, doze ou dezoito horas a 4°C, respectivamente. A recuperação dos espermatozoides da cauda do epidídimo foi realizada pela técnica de flutuação utilizando-se o diluidor ACP-106c ou Tris. Para cada epidídimo foi adicionado 1,0 mL de um dos dois diluidores, pré-aquecidos a 37°C por 5 minutos. Em seguida foram centrifugados a 800g/5 minutos para remoção dos resíduos celulares. Avaliou-se a morfologia, funcionalidade e motilidade espermática total e progressiva, além de parâmetros obtidos pelo CASA. Os dados foram submetidos à ANOVA seguido do teste de Turkey (P < 0,05). Em todos os parâmetros avaliados, não houve diferença entre os diluidores testados (P>0,05). Os valores de motilidade total nos grupos G0h, G6h, G12h, e G18h para o ACP-106c foram 84,4±7,7; 81,6±11,6; 88,3±6,5 e 69,5±16,9, respectivamente, e para o Tris 85,2±8,7; 77,4±14,3; 79,0±17,8 e 65,4±17,9, respectivamente. Um decréscimo na qualidade espermática foi observado após 18 horas de refrigeração em ambos os diluidores. Dessa forma pode-se concluir que o ACP-106c pode ser utilizado para recuperar os espermatozoides epididimários refrigerados e podem ser viáveis por até 12h de refrigeração.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Sousa P.C., Santos E.A.A., Souza A.L.P., Lima G.L., Barros F.F.P.C., Oliveira M.F. & Silva A.R. 2013. Sperm morphological and morphometric evaluation in captive collared peccaries (Pecari tajacu). Pesquisa Veterinária Brasileira 33(7):924-930. Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, BR 110 Km 47, Presidente Costa e Silva, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: legio2000@yahoo.com The aim of this study was to compare different staining methods for the evaluation of sperm morphology by light microscopy and also to describe the morphometry of the entire sperm in collared peccaries (Pecari tajacu). Semen from 10 males was obtained by electroejaculation and evaluated for sperm motility, vigor, and concentration. Semen smears were prepared through three different staining methods: Bengal rose, brome-phenol blue, and eosin-nigrosin. Smears were evaluated under light microscopy and sperm morphologic alterations were determined in percentage. In addition, sperm morphometric analysis was conducted by light microscopy coupled to image analyzer software. The smears stained with Bengal Rose provide the best results for the visualization of the sperm tail, midpiece, and head. The use of eosin-nigrosin stain did not allow an adequate impregnation, and some sperm presented a few contrasts with the background. A higher incidence of bent coiled tails was verified in the use of brome-phenol blue staining (P<0.05). Through morphometric evaluation, it was observed that the tail occupies the greatest proportion (89%) of the sperm which presents a discretely elongated head. According to the results, the use of the Bengal Rose stain is recommended for the morphologic evaluation of the collared peccary sperm.

• Pecari tajacu sperm morphology morfologia espermática

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Sousa P.C., Santos E.A.A., Souza A.L.P., Lima G.L., Barros F.F.P.C., Oliveira M.F. & Silva A.R. 2013. Sperm morphological and morphometric evaluation in captive collared peccaries (Pecari tajacu). [Avaliação morfológica e morfométrica de espermatozoides de catetos (Pecari tajacu).] Pesquisa Veterinária Brasileira 33(7):924-930. Laboratório de Conservação de Germoplasma Animal, Universidade Federal Rural do Semi-Árido, BR 110 Km 47, Presidente Costa e Silva, Mossoró, RN 59625-900, Brazil. E-mail: legio2000@yahoo.com O objetivo deste estudo foi comparar diferentes métodos de coloração para avaliação da morfologia espermática por microscopia de luz e também descrever a morfometria completa de espermatozoides de catetos (Pecari tajacu). Sêmen de 10 machos foi obtido por eletroejaculação e avaliado quanto à motilidade espermática, vigor e concentração. Foram preparados por três diferentes métodos de coloração: Rosa de Bengala, Azul de Bromofenol e Eosina-Nigrosina. Os esfregaços foram avaliados por microscopia de luz, e determinado o percentual das alterações morfológicas. Ainda, a análise da morfometria espermática foi realizada por microscópio de luz acoplado a um softwere de análise de imagens. Os esfregaços corados com Rosa de Bengala apresentaram melhores resultados de visualização da cauda, peça intermediária e cabeça dos espermatozoides. O uso do corante Eosina-Nigrosina não permitiu uma adequada impregnação e alguns dos espermatozoides apresentaram pouco contraste com o fundo da lâmina. Uma maior incidência de cauda fortemente enrolada foi verificada com o uso do corante Azul de Bromofenol (P<0.05). Através da avaliação morfométrica foi observada que a cauda ocupa a maior proporção (89%) do espermatozoide, e a cabeça apresenta-se discretamente alongada. De acordo com os resultados, o uso do corante Rosa de Bengala é recomendado para a avaliação morfológica de espermatozoides de catetos.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Santos P.R.S., Carrara T.V.B., Silva L.C.S., Silva A.R., Oliveira M.F. & Assis Neto A.C. 2011. [Morphological characterization and frenquency of stages of the seminiferous epithelium cycle in captive bred Spix’s Yellow-Toothed (Galea spixii Wagler, 1831).] Caracterização morfológica e frequência dos estádios do ciclo do epitélio seminifero em preás (Galea spixii, Wagler 1831) criados em cativeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(Supl.1):18-24. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: pauloramos@usp.br Studies based on the testicular characteristics are strongly associated with the reproductive efficiency of various species. Thus, the developed project aimed to identify the cells of the seminiferous epithelium, histologically characterized their associations, which form stages, and determine the frequency of these. The fragments of testes, 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150 days were collected Multiplication Center of Universidade Federal Rural do Semi-Árido, Mossoró, RN. Through the process of fixing, washing in solutions of increasing concentrations of alcohols (70-100%), dehydration in xylene, inclusion in Histosec ®, preparation of histological slides, stained with hematoxylin and eosin (HE) and their photomicrographs for the characterization of cell nuclei of the germinal epithelium and the definition of the eight stages of the seminiferous epithelium cycle (CES) based on the tubular morphology method. The different age groups all animals at 90 to 150 days of age showed all stages of the CES. Stages I and III showed the highest and lowest frequency, respectively. Animals categorized as prepubertal (30 days), pubertal (45 to 90 days old) and postpubertal (105 to 150 days of age) had stage I, IV and VIII with a higher frequency, respectively.

• Seminiferous epithelium cycle Galea spixii testis spermatogenesis

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Santos P.R.S., Carrara T.V.B., Silva L.C.S., Silva A.R., Oliveira M.F. & Assis Neto A.C. 2011. [Morphological characterization and frenquency of stages of the seminiferous epithelium cycle in captive bred Spix’s Yellow-Toothed (Galea spixii Wagler, 1831).] Caracterização morfológica e frequência dos estádios do ciclo do epitélio seminifero em preás (Galea spixii, Wagler 1831) criados em cativeiro. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(Supl.1):18-24. Departamento de Cirurgia, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade de São Paulo, Av. Prof. Dr. Orlando Marques de Paiva 87, São Paulo, SP 05508-270, Brazil. E-mail: pauloramos@usp.br Estudos baseados nas características testiculares estão altamente relacionados com a eficiência reprodutiva de varias espécies. Assim, o projeto desenvolvido teve como objetivo identificar as células do epitélio seminífero, caracterizar histologicamente suas associações, que formam os estádios, e determinar a frequência destes. Os fragmentos de testículos, com 30, 45, 60, 75, 90, 105, 120, 150 dias foram coletados no Centro de Multiplicação da Universidade Federal Rural do Semi-árido, Mossoró/RN. Passando pelos processos de fixação, lavagens em soluções de concentrações crescentes de álcoois (70-100%), desidratação em xilol, inclusão em Histosec®, preparação das lâminas histológicas, colorações em Hematoxilina e Eosina (HE) e suas fotomicrografias para a caracterização dos núcleos celulares do epitélio germinativo e a definição dos oitos estágios do ciclo do epitélio seminífero (CES) baseados no Método da Morfologia Tubular. Das faixas etárias analisadas todos os animais de 90-150 dias de idade apresentaram todos os estádios do CES. Os estádios I e III foram os que apresentaram maior e menor freqüência, respectivamente. Os animais caracterizados como pré-púberes (30 dias), púberes (45-90 dias de idade) e pós-púberes (105-150 dias de idade) apresentaram os estádios I, VIII e IV com uma maior freqüência, respectivamente.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Severo C.K., Pereira G.R., Pereira A.M., Ilha G.F., Oliveira J.F.C., Soares M., Arruda R.P. & Gonçalves P.B.D. 2011. Cysteine addition on short-term cooled board semen preservation and its relationship with swine field fertility. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(Supl.1):25-32. Laboratório de Biotecnologia e Reprodução Animal, Departamento de Clínica de Grandes Animais, Hospital Veterinário, Prédio 97, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: bayard@biorep.ufsm.br Artificial insemination is routinely used in the swine industry to reduce the costs of production through to increase the efficiency of the refrigerated boar semen process. The objective of this study was to evaluate the effect of different levels of cysteine (CYS) added to the Beltsville Thawing Solution (BTS) extender semen during cooling for up to 72 hours. Ejaculated from three boars were collected with the gloved-hand technique and semen aliquots were diluted in BTS as follow: BTS only (BTS), BTS + 0.1mM cysteine (CYS0.1), BTS + 0.5mM cysteine (CYS0.5), BTS + 1.0mM cysteine (CYS1.0), BTS + 2.5mM cysteine (CYS2.5), BTS + 5.0mM cysteine (CYS5.0), BTS + 10.0mM cysteine (CYS10.0), and BTS + 20.0mM cysteine (CYS20.0). Evaluation of sperm integrity were analyzed using 0.5mg/ml propidium iodide (plasma membrane), 100µg/ml isothiocynate-conjugated Pisum sativun agglutinin (acrosomal membrane) and 153µM 5,5’,6,6’-tetrachloro-1,1’,3,3’-tetraethylbenzimidazolyl carbocyanine iodide (mitochondria potential) after semen dilution at specific times (0, 24, 48 and 72 hours). Additionally, we also evaluated the effects of 5.0 mM CYS addition in the BTS extender on the maintenance of sperm quality and their influence on fertility in the swine production. After artificial insemination, animals were evaluated based on the estrous return and the number of piglet’s born. Cysteine at concentrations of 10.0 and 20.0mM resulted in more pronounced reductions even at the time zero. Semen viability decreased to levels below 10% at these high levels of CYS in the first 24 hour of storage at 17°C. At the end of the storage time, less than 65% of sperm cells had intact plasma membrane in all groups. The sperm viability decreased significantly when the semen was added at high concentrations of CYS (time “0”; CYS10.0 and CYS20.0; p<0.05), when compared to the other CYS concentrations. The BTS (10.20±0.39) treated group showed a lower rate of estrus return when compared to other (BTSCYS; 86.05±039), and it showed also the highest total number of piglets borne per treatment (12.71±3.38 vs. 9.00±3.38, respectively). In conclusion, the addition of CYS in the BTS semen extender did not maintain spermatic viability of boar cooled spermatozoa and it results in a higher percentage of return to estrus and lower number of piglets borne.

• Cysteine semen preservation swine fertility swine spermatozoa cisteína sêmen suíno fertilidade suína

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Severo C.K., Pereira G.R., Pereira A.M., Ilha G.F., Oliveira J.F.C., Soares M., Arruda R.P. & Gonçalves P.B.D. 2011. Cysteine addition on short-term cooled board semen preservation and its relationship with swine field fertility. [Adição de cisteína na preservação de sêmen suíno refrigerado e sua relação com a fertilidade suína.] Pesquisa Veterinária Brasileira 31(Supl.1):25-32. Laboratório de Biotecnologia e Reprodução Animal, Departamento de Clínica de Grandes Animais, Hospital Veterinário, Prédio 97, Universidade Federal de Santa Maria, Av. Roraima 1000, Santa Maria, RS 97105-900, Brazil. E-mail: bayard@biorep.ufsm.br A inseminação artificial é usada rotineiramente na indústria suinícula para reduzir os custos de produção além de obter maior eficiência reprodutiva durante o processo de resfriamento do sêmen. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da adição de diferentes concentrações de cisteína (CIS) ao diluidor de sêmen Beltsville Thawing Solution (BTS) resfriado sobre a qualidade espermática por até 72 horas. Foram coletados ejaculados de três cachaços e as amostras de sêmen foram diluídas em BTS, conforme os seguintes tratamentos: BTS (grupo controle); CIS0,1 (BTS + 0,1mM de cisteína); CIS0,5 (BTS + 0,5mM de cisteína); CIS1,0 (BTS + 1,0mM de cisteína); CIS2,5 (BTS + 2,5mM de cisteína); CIS5,0 (BTS + 5,0mM de cisteína); CIS10,0 (BTS + 10,0mM de cisteína) e CIS20,0 (BTS + 20,0mM de cisteína). A avaliação da integridade espermática foi determinada através de sondas fluorescentes em uma combinação de 100&#956;g/mL FICT-PSA (isotiocinato de lecitina), 0.5mg/ml PI (iodeto de propidio), e 153&#956;M JC-1 (5,5’,6,6’-tetracloro-1,1’,3,3’-tetraetillbenzimidazolil iodeto de carbocianina). As avaliações dos tratamentos foram realizadas 0, 24, 48 e 72 horas após a diluição do sêmen. Adicionalmente, foi avaliado o efeito da adição de 5,0 mM de cisteína ao diluidor BTS na manutenção da qualidade espermática e no efeito na fertilidade em suínos. Após a inseminação artificial, as fêmeas foram avaliadas quanto a taxa de retorno e o tamanho da leitegada. Durante todos os períodos analizados, os grupos CIS10,0 e CIS20,0 apresentaram menor número de espermatozóides viáveis em relação aos demais grupos. A viabilidade espermática diminuiu a níveis abaixo de 10% nos tratamentos CIS10,0 e CIS20,0 nas primeiras 24 horas de armazenamento a 17ºC. Ao final do período de armazenamento todos os grupos apresentavam média inferior a 65% de espermatozóides com a membrana plasmática intacta. A viabilidade espermática diminuiu significativamente quando altas concentrações de CIS (hora “0”; CIS10,0 e CIS20,0; p<0.05) foram adicionadas ao sêmen comparadas com as demais concentrações. O grupo BTS (10,20±0,39) apresentou menor taxa de retorno ao estro comparado com BTSCIS (86,05±0,39), além de apresentar maior número de leitões nascidos (12,71±3,38 vs. 9,00±3,38, respectivamente). Portanto, podemos concluir que a adição de CIS ao diluidor BTS não mantém a qualidade espermática e resulta em maior taxa de retorno ao estro e menor número de leitões nascidos.