PESQUISA VETERINÁRIA BRASILEIRA

Abstract in English:

ABSTRACT.- Schaefer R., Rech R.R., Silva M.C., Gava D. & Ciacci-Zanella J.R. 2013. [Guidelines for diagnosis of swine influenza.] Orientações para o diagnóstico de influenza em suínos. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(1):61-73.Embrapa Suínos e Aves, BR 153 Km 110, Concórdia, SC 89700-000, Brazil. E-mail: rejane.schaefer@embrapa.br This article is intended to describe the adequate sample collection, the laboratory procedures/techniques, the expected results and their interpretation for diagnosis of influenza infection in swine, serving as a support for field veterinarians. In live pigs, the samples to be taken are nasal secretions, oral fluids and blood. For dead pigs, preference should be given to samples of cranioventral lung consolidation. Nasal discharge and chilled lung fragments are used for detection of virus (virus isolation - VI) or viral nucleic acids (conventional RT-PCR and real-time RT-PCR). Samples should not be frozen, because the virus is inactivated at -20°C. Molecular characterization of isolates is performed by phylogenetic analysis of gene sequences obtained by DNA sequencing. Serum is used for the detection of antibodies using hemagglutination inhibition (HI) test and ELISA. Oral fluid may be used for either antibody (ELISA) or viral detection. Fragments of lung fixed in 10% formaldehyde are used for histopathological analysis to identify bronchointerstitial pneumonia, and for immunohistochemistry (IHC) for antigens. For a successful diagnosis, sampling should be preferably performed in the acute phase of the disease to improve chances of virus detection. The best options to perform the diagnosis of influenza A in a swine herd are RT-PCR and VI from nasal swabs or oral fluid in live pigs and/or lung tissue for RT-PCR, VI or IHC in dead pigs. Serological tests are of very limited diagnostic value and are useful only to determine the immune status of the herd, not indicating clinical disease, because antibodies are detected after 7-10 days post infection (subacute phase). The diagnosis of influenza is important to evaluate the involvement of this agent in the complex of respiratory diseases in pigs. Furthermore, the isolation of influenza virus is essential for monitoring the main subtypes circulating in a given region or country, as well as for the detection of potential new viral reassortants, because influenza is considered a zoonosis.

• Influenza A virus sampling respiratory diseases vírus influenza A colheita de amostras doenças respiratórias

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Schaefer R., Rech R.R., Silva M.C., Gava D. & Ciacci-Zanella J.R. 2013. [Guidelines for diagnosis of swine influenza.] Orientações para o diagnóstico de influenza em suínos. Pesquisa Veterinária Brasileira 33(1):61-73.Embrapa Suínos e Aves, BR 153 Km 110, Concórdia, SC 89700-000, Brazil. E-mail: rejane.schaefer@embrapa.br Este trabalho descreve a colheita adequada de amostras, as técnicas/procedimentos disponíveis para o diagnóstico de influenza A em suínos, assim como os resultados e suas respectivas interpretações, para auxiliar médicos veterinários de campo na identificação dessa doença. Em suínos vivos, as amostras adequadas são: secreção nasal, fluido oral e sangue (soro). Para suínos mortos, colher preferencialmente amostras de pulmão com consolidação cranioventral. Secreção nasal e fragmentos de pulmão refrigerado são utilizados para detectar partícula viral viável (isolamento viral - IV) ou ácido nucleico viral (RT-PCR convencional e RT-PCR em tempo real). As amostras não devem ser congeladas, pois o vírus é inativado a -20°C. A caracterização molecular dos isolados é feita pela análise filogenética obtida pelo sequenciamento de DNA. O soro é utilizado para a detecção de anticorpos (Acs) por meio do teste da inibição da hemaglutinação e ELISA. O fluido oral pode ser utilizado para detecção de anticorpo (ELISA) ou de vírus. Fragmentos de pulmão fixados em formol a 10% são examinados microscopicamente para identificar pneumonia broncointersticial e para detecção de antígeno viral pela imuno-histoquímica (IHQ). Para o sucesso do diagnóstico, as amostras devem ser colhidas de suínos que estão preferencialmente na fase aguda da doença, para aumentar as chances de detecção viral. As melhores opções para o diagnóstico de influenza A em suínos vivos são RT-PCR e isolamento viral de amostras de swab nasal ou fluido oral. Pulmão para análise por RT-PCR, isolamento viral ou IHQ é a amostra de escolha em suínos mortos. Testes sorológicos têm valor diagnóstico limitado e são utilizados apenas para determinar o estado imune do rebanho, não indicando doença clínica, pois os Acs são detectados 7-10 dias pós-infecção (fase subaguda). O diagnóstico de influenza é importante para avaliar o envolvimento desse agente no complexo de doença respiratória suína. Além disso, o isolamento do vírus influenza é essencial para o monitoramento dos principais subtipos circulantes em uma determinada região ou país, assim como para a detecção de novos rearranjos virais, já que influenza é considerada uma zoonose.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Marcondes J.S., Martins M.T.A., Silva A.A., Rodrigues M.M.P., Ferreira D.O.L., Amorim R.L., Dias A. & Gonçalves R.C. 2011. [Tracheobronchial lavage by nasotracheal via to collect cells of respiratory tract of health and broncopneumonic ovines.] Lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal como metodologia de colheita de células do trato respiratório de ovinos sadios e portadores de afecções pulmonares. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(4):281-286. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18618-000, Brazil. E-mail: calderon@fmvz.unesp.br Exams of tracheobronchial secretions are widely used in research of lung diseases in several animal species, including men. The objective of this paper was to investigate feasibility of the technique for harvesting trachea-bronchial lavage in sheep and to verify its clinic-cytological relationship in healthy sheep and others suffering from pneumonia. In this study 33 sheep were used, 18 healthy and 15 sheep with clinical signs of respiratory disease, divided into groups GS and GD. Clinic examination was performed by obtaining tracheobronchial lavage through the nasal route. The crop was washed with the addition and aspiration of sterile saline. The samples were processed by cytospin and staining with Wright-Giemsa and Shorr. The total cell count and the number of red blood cells per milliliter was higher in the group of sheep with bronchopneumonia. In healthy animals predominance of macrophages was noted, followed by the number of epithelial cells, neutrophils and lymphocytes. In the group of sick animals fewer macrophages and predominance of the neutrophil population were noted. Because of its easy performance to obtain representative material, the technique studied was considered effective to obtain tracheobronchial fluid and therefore is a good method to harvest cells for research of the airways.

• Respiratory disease pneumonic tracheobronchial lavage Doenças respiratórias pneumonia lavado traqueobrônquico

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Marcondes J.S., Martins M.T.A., Silva A.A., Rodrigues M.M.P., Ferreira D.O.L., Amorim R.L., Dias A. & Gonçalves R.C. 2011. [Tracheobronchial lavage by nasotracheal via to collect cells of respiratory tract of health and broncopneumonic ovines.] Lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal como metodologia de colheita de células do trato respiratório de ovinos sadios e portadores de afecções pulmonares. Pesquisa Veterinária Brasileira 31(4):281-286. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Distrito de Rubião Junior s/n, Botucatu, SP 18618-000, Brazil. E-mail: calderon@fmvz.unesp.br Os estudos das secreções traqueobrônquicas são amplamente utilizados nas pesquisas de doenças pulmonares nas diversas espécies animais, inclusive no homem. Os objetivos desta pesquisa foram a viabilização da técnica de colheita de lavado traqueobrônquico na espécie ovina e o estudo da relação clínico-citológica do lavado de ovinos portadores de broncopneumonia e sadios. Foram utilizados 33 ovinos, 18 sadios e 15 portadores de enfermidade respiratória com sinais clínicos de envolvimento das vias aéreas, divididos nos respectivos grupos, GS e GD. Após o exame físico foi realizado o lavado traqueobrônquico por via nasotraqueal. A colheita do lavado foi feita com a inoculação e aspiração de solução fisiológica estéril. As amostras foram processadas citologicamente através de citocentrifugação e coradas pelos métodos Wright-Giemsa e Shorr. Tanto a contagem total de células epiteliais quanto o número de hemácias por mililitro foi maior no grupo de animais com broncopneumonia. Nos animais sadios notou-se predomínio de macrófagos, seguido por células epiteliais cilíndricas, neutrófilos e linfócitos. No grupo de animais doentes havia menor número de macrófagos, e predomínio da população de neutrófilos. Por ser de fácil realização, pouco dispendiosa e pela obtenção representativa de material, a técnica estudada mostrou-se eficaz na obtenção de fluidos traqueobrônquicos e, portanto um bom método de colheita de células para uso nas pesquisas de vias aéreas.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Coutinho A.S., Oliveira Filho J.P., Silva D.P.G.S., Oliveira A.P., Marcondes J.S., Chiacchio S.B., Paes A.C., Amorim R.M. & Gonçalves R.C. 2009. [Experimental pneumonic mannheimiosis in calves: Nasal and nasopharingeal swabs for diagnostic.] Mannheimiose pulmonar experimental em bezerros: swab nasal e nasofaringeano como auxílio diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(1):83-88. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618000, Brazil. E-mail: zep.filho@hotmail.com An experimental model of bovine pneumonic mannheimiosis (BPM) was used to evaluate the nasal and nasopharynx bacterial species of calves during the course of the disease and for checking the diagnostic efficiency of nasal swab (NS) and nasopharingeal swab (NPS) microbiological exams. A total of 28 calves were randomized into four experimental groups (G1-G4). NS and NPS were obtained 7 days before and 12 (G1), 24 (G2), 48 (G3) e 72 (G4) hours after intrabronchial inoculation of Mannheimia haemolytica. After the induction of BPM, M. haemolytica biotype A was the predominant isolated bacterium in NS and NPS in all evaluated sampling times, except for one NS (harvested 24 hours). There were no significant statistical differences for the rates of Pasteurella multocida isolation in NS and NPS, harvested before and after the induction of BPM. However, this bacterium was isolated more frequently after the induction of BPM, mainly in NPS. Therefore, the microbiological NS and NPS exams were important auxiliary tests for diagnosing BPM.

• Bacterial flora upper airway respiratory diseases bovine Mannheimia haemolytica

Abstract in Portuguese:

ABSTRACT.- Coutinho A.S., Oliveira Filho J.P., Silva D.P.G.S., Oliveira A.P., Marcondes J.S., Chiacchio S.B., Paes A.C., Amorim R.M. & Gonçalves R.C. 2009. [Experimental pneumonic mannheimiosis in calves: Nasal and nasopharingeal swabs for diagnostic.] Mannheimiose pulmonar experimental em bezerros: swab nasal e nasofaringeano como auxílio diagnóstico. Pesquisa Veterinária Brasileira 29(1):83-88. Departamento de Clínica Veterinária, Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia, Universidade Estadual Paulista, Campus de Botucatu, Distrito de Rubião Júnior s/n, Botucatu, SP 18618000, Brazil. E-mail: zep.filho@hotmail.com An experimental model of bovine pneumonic mannheimiosis (BPM) was used to evaluate the nasal and nasopharynx bacterial species of calves during the course of the disease and for checking the diagnostic efficiency of nasal swab (NS) and nasopharingeal swab (NPS) microbiological exams. A total of 28 calves were randomized into four experimental groups (G1-G4). NS and NPS were obtained 7 days before and 12 (G1), 24 (G2), 48 (G3) e 72 (G4) hours after intrabronchial inoculation of Mannheimia haemolytica. After the induction of BPM, M. haemolytica biotype A was the predominant isolated bacterium in NS and NPS in all evaluated sampling times, except for one NS (harvested 24 hours). There were no significant statistical differences for the rates of Pasteurella multocida isolation in NS and NPS, harvested before and after the induction of BPM. However, this bacterium was isolated more frequently after the induction of BPM, mainly in NPS. Therefore, the microbiological NS and NPS exams were important auxiliary tests for diagnosing BPM.

Abstract in English:

ABSTRACT.- Fighera R.A., Rozza D.B., Piazer J.V., Copetti M.V., lrigoyen L.F. & Barros C.S.L. 2003. [Interstitial pneumonia in cattle fed moldy sweet potatoes (Ipomoea batatas).] Pneumonia intersticial em bovinos associada à ingestão de batata-doce (lpomoea batatas) mofada. Pesquisa Veterinária Brasileira 23(4):161-166. Depto Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, 97105- 900 Santa Maria, RS, Brasil. E-mail: claudioslbarros@uol.com.br Cases of respiratory disease were diagnosed in five out of 23 cattle (21. 7%) after they wete fed moldy damaged sweet potatoes (lpomoea batatas) on a small farm in the county of São Vicente do Sul, state of Rio Grande do Sul, Brazil. Of those five cattle, three died spontaneously and another one was euthanatized for necropsy while showing advanced respiratory clinicai signs. The disease manifested itself approximately 24 hours after the ingestion of the sweet potatoes and lasted from 1 to 4 days. Clinicai signs included dyspnea (labored breathing and abdominal respiration), tachypnea, extended neck with Iow carriage of the head and rhythmical flaring of the nostrils. Two cows were necropsied. Necropsy findings included distended pale and rubbery lungs which failed to collapse when the thorax was open, and marked pulmonar interstitial emphysema and edema. Lymphoid hyperplasia was observed in the hilar nodes and spleen. Histologically, the lesions were those of interstitial pneumonia. Alveolar septa were thickened by fibroblasts and inflammatory cells, and there was hypertrophy and hyperplasia of type li pneumocytes; the interlobular septa were distended by edema and emphysema. The culture of the moldy sweet potatoes yielded Fusarium solani and Fusarium oxysporum.

• Toxic diseases mycotoxicoses respiratory diseases interstitial pneumonia diseases of cattle sweet potatoes lpomoea batatas Intoxicações micotoxicoses doenças respiratórias pneumonia intersticial doenças de bovinos batata-doce.

Abstract in Portuguese:

RESUMO.- Fighera R.A., Rozza D.B., Piazer J.V., Copetti M.V., lrigoyen L.F. & Barros C.S.L. 2003. [Interstitial pneumonia in cattle fed moldy sweet potatoes (Ipomoea batatas).] Pneumonia intersticial em bovinos associada à ingestão de batata-doce (lpomoea batatas) mofada. Pesquisa Veterinária Brasileira 23(4):161-166. Depto Patologia, Universidade Federal de Santa Maria, 97105- 900 Santa Maria, RS, Brasil. E-mail: claudioslbarros@uol.com.br Uma doença respiratória foi diagnosticada em cinco dentre 23 bovinos (21, 7%) após terem sido alimentados com batata-doce (lpomoea batatas) mofada em uma pequena propriedade rural em São Vicente do Sul, Rio Grande do Sul, Brasil. Três dos cinco bovinos afetados morreram espontaneamente, e o quarto foi sacrificado para necropsia quando mostrava sinais clínicos respiratórios avançados. A manifestação clínica iniciara cerca de 24 horas após a ingestão das batatasdoces e a evolução clínica foi de 1 a 4 dias. Os sinais clínicos incluíam dispnéia (respiração laboriosa e abdominal), taquipnéia, pescoço estendido com cabeça baixa e dilatação ritmada das narinas. Dois bovinos foram necropsiados. Os achados de necropsia incluíam pulmões distendidos, pálidos e de consistência borrachenta, que não colapsavam quando o tórax era aberto; enfisema e edema acentuados eram evidentes no pulmão. Os linfonodos e o baço apresentavam alterações características de hiperplasia linfóide. Histologicamente, as lesões eram típicas de pneumonia intersticial. Os septos alveolares estavam espessados por fibroblastos e células inflamatórias, havia hipertrofia e hiperplasia de pneumócitos tipo II; os septos interlobulares estavam distendidos por edema e enfisema. A cultura de amostras das batatas-doces mofadas produziu Fusarium solani e F. oxysporum.

Abstract in English:

Subcutimeous inoculation of 30-day old SPF chickens with a·commercial oilaemulsfon Mycoplasma gallisepticum bacterin (MG-Bac, lot 23009, Salsbury Lab., Inc., Charles City,·Iowa 50616, USA) protected them against chronic respiratory disease. The·birds were challenged 30 days after vaccination with the R strain of M. gallisepticum injected into the left thoracic air·sac. The vaccinated birds presented, before and after the challenge, geometric mean titers higher than the nonvaccinated ones. Air sacculitis lesions bccurred with lower frequency and intensity among the vaccinated birds than among the nonvaccinated, showing a positive relationship between the protection and the serological response.

• Mycoplasma gallisepticum chronic respiratory disease chicken vaccination oil-emultion bacterin

Abstract in Portuguese:

A inoculação subcutânea de galinhas "SPF" de 30 dias de idade com uma vacina oleosa comercial de Mycoplasma gallisepticum (MG-Bac, partida 23009, Salsbury Lab., Inc., Charles City, Iowa 50616, EUA) protegeu-as contra a doença respiratória crônica. As aves foram desafiadas 30 dias após a vacinação pela injeção no saco aéreo torácico esquerdo com a amostra R de M gallisepticum. As aves vacinadas apresentaram, antes e após o desafio, médias geométricas dos títulos de inibição da hemaglutinação maiores do que as aves não vacinadas. As lesões de aerossaculite ocorreram com frequência e intensidade menores entre as aves vacinadas, relacionando-se positivamente proteção obtida com a resposta sorológica observada.

• Mycoplasma gallisepticum doença respiratória crônica galinhas-vacinação bacterina oleosa