Abstract in English:
Skin and cartilage have been the main source for the recovery of somatic cells to be used in conservation strategies in wild mammals. In this sense, an important step for the cryopreservation of these samples is to recognize the properties of the skin and cartilage. Thus, knowing that the skin may differ among species and aiming to contribute to the establishment of cryobanks, the study examined the differences in the ear skin and cartilage of wild rodents from South America, agouti (Dasyprocta leporina) and spix’s yellow-toothed cavy (Galea spixii). Ultrastructural and quantitative methods were used to measure skin and cartilage thickness, density of collagen and elastic fibers, cell type number and distribution, and proliferative activity. Although ultrastructural analysis revealed a similar pattern between species, morphometric analysis of the skin and cartilage showed differences between agoutis and cavies regarding thickness of epidermis layers (corneum: 5.3±2.5µm vs. 3.9±0.6µm; intermediate: 16.4±6.2µm vs. 23.4±8.1µm; basal: 9.9±2.1µm vs. 4.8±0.5µm), dermis (183.1±44.0µm vs. 258.2±22.9µm), total skin (211.8±46.0µm vs. 290.3±23.7µm) and perichondrium (27.6±6.1µm vs. 10.5±1.8µm). A greater number of epidermal cells (61.7±15.2 vs. 24.8±7.6) and chondrocytes (32.7±9.0 vs. 27.5±4.7) were observed in agouti, while the cavy presented a greater number of melanocytes (12.6±4.7 vs. 29.9±6.2), keratinocytes (14.7±4.2 vs. 29.8±7.6), and fibroblasts (103.6±24.7 vs. 112.2±11.3). Moreover, a higher percentage of collagen fibers and proliferative activity was observed in the skin of cavies, when compared to the skin of agoutis. Therefore, there are differences between agouti and cavy for ear skin and cartilage, requiring the establishment of species-specific cryopreservation protocols.
Abstract in Portuguese:
A pele e cartilagem têm sido uma importante fonte de recuperação de células somáticas a serem utilizadas em estratégias de conservação em mamíferos silvestres. Nesse contexto, uma importante etapa para criopreservação é conhecer, inicialmente, as propriedades que compõem a pele e cartilagem. Sabendo, então, que a pele pode diferir-se entre espécies e com o objetivo de contribuir para o estabelecimento de criobancos, o estudo evidenciou as diferenças da pele e da cartilagem do pavilhão auricular apical de cutias (Dasyprocta leporina) e preás (Galea spixii) que são roedores silvestres presentes na América do Sul. Para tanto, métodos ultraestruturais e quantitativos foram utilizados para mensurar a espessura da pele e da cartilagem, densidade de fibras colágenas e elásticas, número e distribuição dos tipos celulares e atividade proliferativa. Embora as propriedades ultraestruturais em cutias e preás tenham se mostrado semelhantes, avaliações acerca da morfometria da pele e da cartilagem demonstrou diferenças, especialmente nas camadas epidérmicas (córnea: 5,3±2,5µm vs. 3,9±0,6µm; espinhosa: 16,4±6,2µm vs. 23,4±8,1µm; basal: 9,9±2,1µm vs. 4,8±0,5µm), derme (183,1±44,0µm vs. 258,2±22,9µm), pele total (211,8±46,0µm vs. 290,3±23,7µm) e pericôndrio (27,6±6,1µm vs. 10,5±1,8µm). Além disso, um número maior de células epidérmicas (61,7±15,2 vs. 24,8±7,6) e condrócitos (32,7±9,0 vs. 27,5±4,7) foram observados em cutias, enquanto em preás um maior número de melanócitos (12,6±4,7 vs. 29,9±6,2), queratinócitos (14,7±4,2 vs. 29,8±7,6) e fibroblastos (103,6±24,7 vs. 112,2±11,3) foram evidenciados. Ainda, em preás, uma maior porcentagem de fibras colágenas e da atividade proliferativa foram observadas quando comparadas a pele de cutias. Portanto, existem diferenças entre cutias e preás para pele e cartilagem do pavilhão auricular, exigindo desta forma um estabelecimento de protocolos de criopreservação específica para cada uma destas espécies.
Abstract in English:
Salmonella is a major cause of foodborne illness worldwide, and poultry and its derived products are the most common food products associated with salmonellosis outbreaks. Some countries, including Brazil, have experienced an increased prevalence of Salmonella Heidelberg among their poultry flocks. Some isolates have also presented high resistance to antimicrobial agents and persist in the poultry farm environment. This study aimed to compare the susceptibility of S. Heidelberg strains isolated in 2006 with those isolated in 2016 against disinfectants and antimicrobial agents. The results showed that all the strains were highly susceptible to sodium hypochlorite, regardless of the conditions and year of isolation. Resistance to benzalkonium chloride varied according to the conditions applied, but not to the year of isolation. Increased antimicrobial resistance from 2006-2016 was observed only for tetracycline. The results suggest that the antimicrobial and disinfectant resistance of S. Heidelberg did not increase for ten years (2006-2016). However, further analysis should include a larger number of S. Heidelberg isolates from poultry origin and additional antimicrobial agents for more precise conclusions about the increasing in antimicrobial resistance in the last years.
Abstract in Portuguese:
Salmonella é uma das principais causas das doenças transmitidas por alimento em todo o mundo, e a carne de frango e produtos derivados são os principais alimentos associados com surtos de salmonelose em humanos. Alguns países, incluindo o Brasil, têm observado um aumento da ocorrência de Salmonella Heidelberg nas suas granjas avícolas. Além disto, alguns isolados têm apresentado alta resistência aos antimicrobianos e têm persistido no ambiente de produção avícola. Neste contexto, o objetivo deste estudo foi comparar a susceptibilidade de cepas de S. Heidelberg isoladas em 2006 com aquelas isoladas em 2016 contra desinfetantes e agentes antimicrobianos. Os resultados demonstraram que as cepas foram altamente resistentes a hipoclorito de sódio, independentemente das condições e do ano de isolamento. A resistência ao cloreto de benzalcônio variou de acordo com as condições testadas, mas não com o ano de isolamento. Um aumento da resistência aos antimicrobianos de 2006 a 2016 foi observado apenas para tetraciclina. Os resultados sugerem que a resistência aos desinfetantes e aos antimicrobianos não aumentou em um período de dez anos (2006-2016). Entretanto, novas análises devem incluir um número maior de cepas de S. Heidelberg isoladas de fontes avícolas e outros agentes antimicrobianos para uma conclusão mais precisa sobre o aumento da resistência antimicrobiana nos últimos anos.
Abstract in English:
ed to evaluate the antibacterial properties of 39 heterocyclic derivatives (1,3-thiazoles and 4-thiazolidinones) against clinical mastitis isolates from dairy cows. Milk samples were collected from cows with clinical mastitis and the bacterial species were identified by PCR. Antibacterial activity was assessed using the broth microdilution method. First, 39 heterocyclic compounds were tested against four bacterial isolates (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis and Escherichia coli) randomly chosen from those recovered from the milk samples (Study 1). Subsequently, the compounds with the strongest antibacterial activity were tested against all the bacterial isolates recovered from the milk samples (Study 2). 1,3-thiazoles showed the strongest antibacterial activity, specially compounds 30 and 38, which also showed bactericidal properties according to their minimal inhibitory concentration (MIC) and minimal bactericidal concentration (MBC) values. Corynebacterium spp. and Enterobacteriaceae isolates were the most susceptible to compounds 30 and 38. Compounds 30 and 38 are promising targets for new antimicrobial agents.
Abstract in Portuguese:
A mastite causa significativas perdas econômicas à indústria leiteira bovina. O presente estudo teve como objetivo avaliar as propriedades antibacterianas de 39 derivados heterocíclicos (1,3-tiazóis e 4-tiazolidinonas) contra isolados clínicos de mastite em vacas leiteiras. Amostras de leite foram coletadas de vacas com mastite clínica e as espécies bacterianas isoladas foram identificadas por PCR. A atividade antibacteriana foi avaliada pelo método de microdiluição em caldo. Primeiramente, os 39 compostos heterocíclicos foram testados contra quatro isolados bacterianos (Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Corynebacterium bovis e Escherichia coli) escolhidos aleatoriamente dentre os recuperados das amostras de leite (Estudo 1). Posteriormente, compostos com atividade antibacteriana mais forte foram testados contra todos os isolados bacterianos recuperados das amostras de leite (Estudo 2). Os compostos 1,3-tiazóis apresentaram a maior atividade antibacteriana, principalmente os compostos 30 e 38, que também apresentaram propriedades bactericidas de acordo com seus valores de concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Os isolados Corynebacterium spp. e Enterobacteriaceae foram os mais suscetíveis aos compostos 30 e 38. Os compostos 30 e 38 mostraram-se promissores como novos agentes antimicrobianos.
Abstract in English:
Over the last decade, Brazil registered a 10.56% increase in the number of poultry slaughtered in establishments registered under the “Serviço de Inspeção Federal” (SIF - Federal Inspection Service), as a result of technological advances in management, health and genetics applied to national aviculture. At slaughter, during post-mortem inspection, carcasses can be totally or partially condemned for various reasons, including ascitic syndrome. This syndrome has economic implications for the industry, in addition to being a problem for the health and welfare of poultry. The objective of this work was to evaluate the historical series (2010-2019) of partial and total condemnations of poultry carcasses due to ascitic syndrome in slaughterhouses registered under the SIF and located in the main poultry-producing states. Through official data, the condemnation occurrence index (COI) and the adjusted seasonal index (ASI) were calculated. The condemnation rate was 1,140 carcasses condemned, totally or partially, for ascitic syndrome for every 1,000,000 poultry slaughtered. The smallest and largest COIs were found in São Paulo (February 2010) and in Goiás (January 2017), respectively. The occurrence of condemnations for this syndrome was cyclical throughout the historical series, showing peaks of condemnation in all years evaluated, with the highest ASIs in July, August and September, and with rates varying between 1.24 and 1.54 in these months. Considering the period of pre-slaughter housing, the highest ASIs coincide with the coldest period of the year (May to August) for all analyzed states. The results show that ascitic syndrome is a growing problem in Brazil, with greater occurrence during the coldest months of the year, having a negative impact on animal health and the profitability of producers and industries in the poultry production chain.
Abstract in Portuguese:
O objetivo deste trabalho foi avaliar a série histórica (2010-2019) de condenações parciais e totais de carcaças de aves por síndrome ascítica em abatedouros registrados no SIF localizados nos principais estados produtores de carne de frango. Através de dados oficiais, foram calculados o índice de ocorrência de condenações (IOC) e o índice de sazonalidade ajustado (ISA). A taxa de condenação foi de 1.140 carcaças condenadas total ou parcialmente por síndrome ascítica a cada 1.000.000 de aves abatidas. O menor e maior IOCs foram encontrados em São Paulo (fevereiro/2010) e em Goiás (janeiro/2017), respectivamente. A ocorrência de condenações por esta síndrome teve comportamento cíclico ao longo da série histórica, apresentando picos de condenação em todos os anos avaliados, sendo os maiores ISAs encontrados nos meses de julho, agosto e setembro, com índices variando entre 1,24 e 1,54 nestes meses. Considerando o período de alojamento pré-abate, os maiores valores de ISAs coincidiram com o período mais frio do ano (Maio a Agosto) para todos os estados analisados. Os resultados mostram que síndrome ascítica é um problema crescente no Brasil, com maior ocorrência durante os meses frios do ano, impactando negativamente a saúde dos animais e a lucratividade dos produtores e indústrias da cadeia produtiva de frango de corte.
Abstract in English:
Two outbreaks of cobalt deficiency in beef cattle were diagnosed in Midwestern Brazil. We discuss the clinical, epidemiological, pathological features, therapeutic measures, and impact aspects of the production system associated with these outbreaks occurring outbreaks in two farms of extensive cattle raising-system in the state of Mato Grosso do Sul. Seven affected cattle were euthanized and necropsied. Tissues for histopathology and microelements dosage were secured. At Farm A, 3100 cattle of all ages got sick, and 396 died; at Farm B, 148 were affected, and 110 died. In both farms, cattle were fed the same mineral supplement. The main clinical signs were weight loss and weakness, even though a good supply of forage was available in the paddocks. Many cattle stop grazing and chew at tree barks, wood chips from fence posts, and bones. In addition to the deaths, there was a compromised growth, and the reproductive rates fell sharply. The necropsied cattle were thin, with rough hair coat and pale mucous membranes. The liver was diffusely orange and showed a lobular pattern. The bone marrow was gelatinous and diffusely yellow. Histological changes included hemosiderosis in the liver and spleen, hepatocellular vacuolar degeneration, and myeloid and erythroid hypoplasia of the bone marrow. In the white matter of four cattle’s brains, the myelin sheath was markedly distended (spongy degeneration). Proliferative parasitic abomasitis was observed in three cattle. The presumptive diagnosis was based on the association of the clinical picture, the necropsy findings, and the ruling out of other possible causes. The diagnosis was confirmed by the favorable response to treatment with cobalt and vitamin B12 orally and by mineral supplementation.
Abstract in Portuguese:
Dois surtos de deficiência de cobalto em bovinos de corte foram diagnosticados. Os aspectos clínicos, epidemiológicos, anatomopatológicos, terapêuticos e impactos no sistema de produção são descritos e discutidos. Os surtos ocorreram em duas fazendas de criação extensiva estado de Mato Grosso do Sul, Centro-Oeste brasileiro. Sete bovinos afetados foram eutanasiados e necropsiados. Na necropsia foram colhidas amostras para exames histopatológicos e dosagem de microelementos. Na Fazenda A, 3100 bovinos de todas as idades adoeceram e 396 morreram e na Fazenda B, 148 bovinos adoeceram e 110 morreram. Ambas as fazendas utilizavam o mesmo suplemento mineral. Os principais sinais clínicos observados foram emagrecimento e fraqueza, apesar da boa oferta de forragem nos piquetes, muitos bovinos deixaram de pastejar e comiam cascas de árvores, madeira das porteiras e ossos. Além das mortes, tiveram crescimento comprometido e os índices reprodutivos tiveram queda acentuada. Os bovinos necropsiados estavam magros, com os pelos arrepiados e mucosas pálidas. O fígado estava difusamente alaranjado e com evidenciação do padrão lobular. A medula óssea estava de consistência gelatinosa e difusamente amarelada. Alterações histológicas incluíam degeneração vacuolar hemossiderose que era moderada no fígado e marcada no baço. Hipoplasia mieloide e eritoide era vista na medula óssea. Na substância branca do encéfalo de quatro bovinos, a bainha de mielina estava marcadamente distendida (degeneração esponjosa). Abomasite parasitária proliferativa foi observada em três bovinos. O diagnóstico presuntivo baseou-se na associação do quadro clínico, nos achados de necropsia e na eliminação de outras possíveis causas. O diagnóstico foi confirmado pela resposta favorável ao tratamento com cobalto e vitamina B12 por via oral, e a suplementação mineral.
Abstract in English:
The species Bradypus variegatus is known as the common sloth, an endemic mammal from neotropical regions, which has been suffering from devastating anthropogenic activities. Our study aimed to describe the brachial plexus of B. variegates, regarding the origin and distribution of nerves, through the sampling of 10 adult females. Analyses were carried out at the Anatomy Section, “Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal”, “Universidade Federal Rural de Pernambuco”, under license no. 034/2015 of the Ethics Committee on the Use of Animals. The results determined that the brachial plexus of the common sloth starts from the fifth cervical spine segment until the second thoracic segment. This area contains the long and suprascapular thoracic nerves, which originate immediately from the medullary segment 5 and 6, respectively, and from the pectoral, subscapular, axillary, radial, musculocutaneous, medial, forearm and ulnar medial cutaneous nerves, arising from a trunk comprised of cervical spine nerves (C) 7, C8, C9, and thoracic (T) 1 and T2. Regarding other wild and domestic animals, different suggestions were observed about the origin of the plexus in B. variegatus, however, the constituent nerves and their innervation areas did not demonstrate any discrepancies.
Abstract in Portuguese:
A espécie Bradypus variegatus é conhecida como preguiça-comum. Trata-se de um mamífero endêmico de regiões neotropicais que vem sofrendo com a ação antrópica devastadora. Esses Bradipodídeos possuem três dedos nos membros torácicos e pélvicos, são arborícolas consagrados e descem ao solo apenas para excretar e trocar de árvore. O estudo teve como objetivo descrever o plexo braquial de B. variegatus em relação à origem e distribuição dos nervos. Para tal, utilizou-se 10 fêmeas adultas. As análises foram realizadas no Pavilhão de Anatomia do Departamento de Morfologia e Fisiologia Animal da Universidade Federal Rural de Pernambuco, sob a licença nº 034/2015 do Comitê de Ética no Uso de Animais. Os cadáveres foram obtidos após morte natural, fixados em formaldeído a 20%, conservados em solução salina a 30% em tanques e dissecados para a visualização dos nervos destinados a inervar os membros e músculos torácicos. Uma vez feito, constatou-se que o plexo braquial da preguiça-comum se origina do quinto segmento espinal cervical, se estendendo até o segundo segmento torácico. Sendo formado pelos nervos torácico longo e supraescapular, de origem imediatamente do segmento medular 5 e 6, respectivamente, e pelos nervos peitorais, subescapulares, axilar, radial, musculocutâneo, mediano, cutâneo medial do antebraço e ulnar, decorrentes de um tronco formado a partir de nervos espinais cervicais (C) 7, C8, C9, e torácicos (T) 1 e T2. Em comparação a outros animais silvestres e domésticos foram observadas diferentes disposições em relação à origem do plexo de B. variegatus, todavia, os nervos constituintes e suas áreas de inervação não apresentaram discrepâncias.
Abstract in English:
The aim of this study was to investigate the main causes of death in growing-finishing pigs in southern Brazil. During a one-year period (from 2018 to 2019), two industrial pig herds (18 and 20 thousand pigs each farm) in southern Brazil were monitored along the four seasons of the year (12 days per season on each farm), in order to perform necropsies of all pigs that died in that period. The two farms had an average monthly mortality rate ranging from 0.94 to 3.93% in the evaluated months. At necropsy, tissues were collected, fixed in 10% formalin solution and processed routinely for histopathological examination. When necessary, samples were sent for bacterial culture and PCR to identify etiologic agents. A total of 601 necropsies were performed, with 94.9% of conclusive diagnoses. Infectious diseases corresponded to 64.4% of conclusive diagnosis and non-infectious diseases to 35.6%. The most prevalent causes of death were: pneumonia (33%), gastric ulcers (15.4%), circovirosis (9.9%), systemic bacterial embolism (5.4%), polyserositis (4.4%), dilated cardiomyopathy and torsion of abdominal organs (4.3% each), and bacterial pericarditis (3.4%). Regarding pneumonias (199/601), the main agents identified in these cases were Pasteurella multocida, Influenza A virus and Mycoplasma hyopneumoniae, mainly in associations.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente trabalho foi investigar as principais causas de morte de suínos em fase de crescimento e terminação no Sul do Brasil. Durante o período de um ano (entre 2018 e 2019), duas granjas tecnificadas de suínos no Sul do Brasil foram acompanhadas nas quatro estações (12 dias por estação em cada granja), para realização de necropsias dos suínos que morreram nesse período. As duas propriedades apresentavam mortalidade mensal média entre 0,94 e 3,93% nos meses avaliados. Na necropsia, amostras de órgãos foram colhidas, fixadas em formol 10% e processadas rotineiramente para o exame histopatológico. Quando necessário, amostras foram enviadas para o cultivo bacteriano e PCR para identificação de agentes etiológicos. Foram realizadas um total de 601 necropsias, com 94,9% de diagnósticos conclusivos. As doenças infecciosas corresponderam a 64,4% dos diagnósticos conclusivos e as não infecciosas a 35,6%. As principais causas de morte foram: pneumonias (33%), úlcera gástrica (15,4%), circovirose (9,9%), embolia bacteriana sistêmica (5,4%), polisserosite (4,4%), cardiomiopatia dilatada e torção de órgãos abdominais (4,3% cada) e pericardite bacteriana (3,4%). Com relação às pneumonias (199/601), os principais agentes associadas as lesões foram Pasteurella multocida, vírus da Influenza A e Mycoplasma hyopneumoniae, principalmente associados entre si.
Abstract in English:
Two young opossums were necropsied and diagnosed with rickets. This study aims to describe the clinical-pathological aspects of rickets in Didelphis albiventris. Macroscopically, the opossums presented kyphosis and scoliosis, lateral deviation of the limbs in varus, locomotion difficulty, and enlargement with softening of costochondral junctions (rickety rosary). Samples of bones and joints were processed for hematoxylin and eosin staining and Masson’s trichrome. Microscopically, we observed thickening of the epiphyseal plate, characterized by irregular and multifocal proliferation of serialized and hypertrophic cartilage zones, which formed circular groups of large, dysplastic chondrocytes towards the spongy zone, often surrounded by non-mineralized osteoid tissue. In the cortical bone, there were pale eosinophilic zones around the Havers channels consistent with non-mineralized osteoid. The staining of Masson’s trichrome evidenced the accumulation of osteoid tissue in cortical and trabecular bones. It is possible that a mixed cause of absorption deficiency of vitamin D3 associated with an unbalanced Ca:P diet based on lactose-free milk and fruits may have triggered the disease.
Abstract in Portuguese:
Dois gambás jovens foram necropsiados e diagnosticados com raquitismo. O objetivo do trabalho é descrever os aspectos clínico-patológicos de raquitismo em Didelphis albiventris. Macroscopicamente os gambás apresentaram cifose e escoliose, desvio lateral dos membros em varus, dificuldade de locomoção e alargamento com amolecimento das junções costocondrais (rosário raquítico). Amostras dos ossos e articulações foram processadas para coloração de hematoxilina e eosina e Tricrômico de Masson. Microscopicamente havia espessamento da placa epifisária, caracterizada pela proliferação irregular e multifocal das zonas de cartilagem seriada e hipertrófica, que formavam grupos circulares de condrócitos grandes, displásicos em direção a zona esponjosa frequentemente cercados por tecido osteoide não mineralizado. No osso cortical haviam zonas eosinofílicas pálidas ao redor dos canais de Havers consistentes com osteoide não mineralizado. A coloração de Tricrômico de Masson evidenciou o acúmulo de tecido osteoide no nosso cortical e trabecular. Acredita-se que uma causa mista de déficit de absorção de vitamina D3 associada a uma dieta desbalanceada em Ca:P a base de leite sem lactose e frutas tenha desencadeado a doença.
Abstract in English:
Campylobacter spp. is a bacterial agent that causes gastroenteritis in humans and may trigger Guillain-Barré Syndrome (GBS) and is also considered one of the main foodborne diseases in developed countries. Poultry and pigs are considered reservoirs of these microorganisms, as well as raw or undercooked by-products are often incriminated as a source of human infection. Treatment in human cases is with macrolide, such erythromycin, that inhibits the protein synthesis of the microorganism. This study aimed to isolate Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from intestinal content samples of broiler chickens (n=20) and swine (n=30) to characterize the erythromycin resistance profile of the strains and to detect molecular mechanisms involved in this resistance. The minimum inhibitory concentration was determined by agar dilution. The Mismatch Amplification Mutation Assay-Polymerase Chain Reaction (MAMA-PCR) was performed to detect mutations at positions 2074 and 2075 of 23S rRNA region, in addition to PCR test to detect the erm(B) gene. From the intestinal content of broiler chickens, 18 strains of C. jejuni and two strains of C. coli were isolated, whereas, from swine samples, no C. jejuni strain and 14 strains of C. coli were isolated. All C. coli strains were resistant, and three C. jejuni strains from broilers chickens were characterized with intermediate resistance to erythromycin. The MIC of the strains ranged from ≤0.5mg/µL to ≥128mg/µL. All resistant strains had the A2075G mutation, and one strain with intermediate resistance had the A2075G mutation. However, the A2074C mutation and the erm(B) gene were not detected. High resistance levels were detected in C. coli strains isolated from swine. The MAMA-PCR is a practical tool for detecting the erythromycin resistance in Campylobacter strains.
Abstract in Portuguese:
Campylobacter spp. é um agente bacteriano causador de gastroenterite em humanos e associado à síndrome de Guillain–Barré, sendo a campilobacteriose considerada uma das principais enfermidades de origem alimentar. Aves e suínos são importantes reservatórios desses microrganismos e seus produtos derivados crus ou mal cozidos são muitas vezes incriminados como fonte de infecção humana. A primeira escolha para o tratamento em casos humanos são os antimicrobianos da classe dos macrolídeos como à eritromicina. Dentro desse contexto, o objetivo deste estudo foi isolar Campylobacter jejuni e C. coli a partir de 20 amostras de conteúdo intestinal de frangos de corte e de 30 de suínos ao abate e investigar a resistência à eritromicina das estirpes obtidas e os possíveis mecanismos moleculares envolvidos nesta resistência. A concentração inibitória mínima foi determinada pela diluição em ágar e a técnica MAMA-PCR foi utilizada para detecção de mutações nas posições 2074 e 2075 da região 23s rRNA, foi pesquisado também a presença do gene erm(B) pela PCR. A partir do conteúdo intestinal de frangos de corte foram isoladas 18 estirpes de C. jejuni e duas de C. coli, enquanto de suínos foram obtidas 14 estirpes de C. coli e nenhuma estirpe de C. jejuni. Todas as estirpes de C. coli de suínos foram identificadas como resistentes e três estirpes de C. jejuni de frangos foram caracterizadas com resistência intermediária. A CIM das estirpes variou de ≤0,5mg/µL a ≥128mg/µL. Todas as estirpes resistentes tinham a mutação A2075G e uma cepa com resistência intermediária também apresentou a mutação A2075G. Não foi detectada a mutação A2074C ou a presença do gene erm(B) em nenhuma das estirpes obtidas. Os resultados revelam um alto nível de resistência em estirpes de C. coli isoladas de suínos frente a eritromicina. A técnica MAMA PCR utilizada se constitui em uma ferramenta prática para detecção da resistência à eritromicina em estirpes de C. jejuni e C. coli.
Abstract in English:
We analyzed 77 Salmonella spp. strains, from which 20 were isolated from broilers (cloacal swabs) and 57 from chickens from slaughterhouses under federal inspection. The following serotypes were identified: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), Salmonella Cerro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) and Salmonella enterica (O: 9.12) (1). Fifteen strains (19.5%) were resistant to enrofloxacin, six (7.8%) to ciprofloxacin, and 26 (33.8%) to nalidixic acid in the Disk Diffusion Test. The fifteen enrofloxacin resistant strains were selected for the PCR to detect the genes gyrA, gyrB, parC, and parE, and genetic sequencing to identify mutations in these genes. Five strains (33.3%) had point mutations in the gyrA gene, and one (6.7%) presented a point mutation in the parC gene. None of the 15 strains had mutations in the gyrB and parE genes, and none had more than one mutation in the gyrA gene or the other genes. The presence of point mutations in the strains studied corroborates with the phenotypic resistance observed to nalidixic acid. However, it did not explain the resistance to fluoroquinolones found in the 15 strains. Other mechanisms may be related to the fluoroquinolones resistance, highlighting the need for additional mutation screening.
Abstract in Portuguese:
Foram analisadas neste estudo 77 estirpes de Salmonella spp., 20 isoladas de frangos vivos (suabes de cloaca) e 57 isoladas de carcaças, provenientes de abatedouros frigoríficos sob Inspeção Federal. Foram identificados os seguintes sorotipos: Salmonella Saint Paul (29), Salmonella Heidelberg (27), Salmonella Anatum (9), SalmonellaC erro (5), Salmonella Senftenberg (5), Salmonella enterica (O: 4,5) (1) e Salmonella enterica (O: 9,12) (1). Do total de estirpes estudadas, 15 (19,5%) se mostraram resistentes à enrofloxacina, seis (7,8%) à ciprofloxacina e 26 (33,8%) ao ácido nalidíxico no Teste de Difusão em Disco. Foram selecionadas as 15 estirpes resistentes à enrofloxacina para a realização da PCR para detecção dos genes gyrA, gyrB, parC e parEe para sequenciamento genético do produto da PCR para identificação de mutações nesses genes. Cinco estirpes (33,3%) apresentaram mutações pontuais no gene gyrA e uma (6,7%) apresentou mutação pontual no gene parC. Nenhuma das 15 estirpes apresentou mutações nos genes gyrB e parE e nenhuma apresentou mais de uma mutação no gene gyrA ou nos outros genes. A existência apenas de mutações pontuais em alguns genes das estirpes analisadas está de acordo com a resistência fenotípica observada ao ácido nalidíxico, mas não explica a resistência às fluoroquinolonas encontrada nas 15 estirpes. Outros mecanismos de resistência podem estar relacionados à resistência encontrada às fluoroquinolonas e estudos adicionais são necessários para investigar sua presença.