Abstract in English:
The purpose of this study was to evaluate the competitive enzyme immunoassay used for the serological diagnosis of bovine brucellosis, comparing the results obtained using a conjugate prepared with monoclonal antibody and a conjugate prepared with policlonal sera. The results were also compareci with those obtained by a microtechnique of complement fixation. Two hundred and seventy-three sera from herds with a history of brucellosis, 205 sera from herds free of brucellosis and without vaccination with Brucella abortus strain 19 and 122 sera from herds without history of infection or vaccination were tested. Among sera from infected herds, the complement fixation test revealed antibody titres in 28.51%, the enzyme immunoassay using monoclonal conjugate in 39.19% and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate revealed antibody titres in 37.0% of the sera. The agreement between complement fixation and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 94.38% and the agreement between both of the enzyme immunoassays was 97.89%. Among the sera from vaccinated herds, the agreement between the complement fixation test and the enzyme immunoassay using policlonal conjugate was 69.39%, and the agreement between the enzyme immunoassays was 90.73%. The complement fixation test did not reveal any antibody titre in 67.86% of the sera from vaccinated herds, the enzyme immunoassay using policlonal conjugate did not reveal titres in 51.22% and the enzyme immunoassay with monoclonal conjugate did not reveal antibody titres in 41.95% of the sera from vaccinated herds. All the 122 sera from herds without infection or vaccination were negative to the three serological tests.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do trabalho foi avaliar o comportamento do teste imunoenzimático competitivo quando aplicado ao diagnóstico sorológico da brucelose bovina, comparando-se o desempenho do teste ao usar um conjugado preparado com anticorpos monoclonais e um conjugado preparado com soro policlonal. Os resultados foram também comparados com aqueles obtidos através de uma microtécnica de fixação de complemento. Foram examinados 273 soros provenientes de rebanhos com histórico de brucelose, 205 soros provenientes de rebanhos sem problemas de infecção e que adotam a vacinação das bezerras com Brucella abortus amostra B 19 e 122 soros de bovinos procedentes de rebanhos sem histórico de brucelose e que não adotam a vacinação. Nos soros de rebanhos com histórico de infecção, a reação de fixação de complemento revelou títulos de anticorpos em 28, 51%, o teste imunoenzimático com o conjugado monoclonal revelou títulos em 39,19% e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal revelou títulos em 37,0% dos soros examinados, observando-se uma concordância de 94,38% entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático usando o conjugado policlonal e de 97,89% entre os dois testes imunoenzimáticos. Nos soros de rebanhos vacinados, a concordância entre a fixação de complemento e o teste imunoenzimático com o conjugado policlonal foi de 69,39%, enquanto que a concordância entre os testes imunoenzimáticos foi de 90,73%. Neste caso, a reação de fixação de complemento não revelou qualquer título em 67,86% dos soros examinados, o teste com o conjugado policlonal não revelou títulos em 51,22% dos soros, ao passo que o teste com o conjugado monoclonal não revelou título em 41,95% dos soros. Os 122 soros de rebanhos sem histórico de infecção e vacinação apresentaram resultados negativos nos três testes realizados.
Abstract in English:
One hundred ninety-five milk samples from 65 healthy quarters of 21 cows were submitted to somatic cell counts during the initial, middle and final phase of milking. The results showed that 65 (100%) milk samples obtained at the beginning of milking exhibited counts lower than 500,000 cel/mi, different from the harvested in the middle and final phase when counts higher to the mentioned values were found in 8 (12.31%) and 19 (29.23%) samples respectively. The differences revealed to be statistically significant showing the influence of the milking phases on the somatic cell counts. This fact is important for the diagnosis of subclinical bovine mastitis, as there exists a possibility of the occurrence of false-positive results in case milk samples are harvested in the middle or final phase of the milking process.
Abstract in Portuguese:
Foram realizadas contagens de células somáticas em 195 amostras de leite colhidas de 65 quartos sadios de 21 vacas lactantes, durante o início, meio e final da ordenha. Os resultados obtidos evidenciaram que as 65 (100%) amostras de leite obtidas no início da ordenha, apresentaram contagens inferiores a 500.000 cels/ml, diferentemente das colhidas no meio e final da ordenha, e cujas contagens foram superiores ao referido valor em 8 (12,31%) e 19 (29,23%) amostras, respectivamente. Tais diferenças mostraram-se estaticamente significativas, evidenciando, portanto, a influência das fases da ordenha sobre o número de células somáticas do leite. Este fato parece assumir destacado valor no estabelecimento do diagnóstico das formas subclínicas da mastite bovina, uma vez que existe a possibilidade da ocorrência de resultados falso-positivos, caso as amostras de leite a serem analisadas não sejam colhidas no início da ordenha.
Abstract in English:
The presence of elements with vitamin D-like activity in the calcinogenic plants Solanum malacoxylon (Solanaceae), Cestrum diurnum (Solanaceae), Trisetum flavescens (Gramineae) and Nierembergia veitchii (Solanaceae) were evaluated by testing different extracts of these plants by oral administration to rachitic chicks fed with a diet free of vitamin D. After administration of the extracts the blood serum was analysed to determine the levels of calcium, phosphorus and alkaline phosphatase. The experimental results clearly demonstrated the presence of substances with vitamin D-like activity in the four plants. S. malacoxylon and C. diurnum contained hyelrosoluble substances with high vitamin D-like activity indicated by significant high levels of calcium and phosphorus combined with reduced activity of the alkaline phosphatase. The experiments also showed that there might be a further substance with liposoluble characteristics in both plants. N. veitchii and T. flavescens contained only minor concentrations of lipo and hydrosoluble substances with vitamin D-like activity.
Abstract in Portuguese:
Este trabalho avalia a presença de substâncias com atividade similar à vitamina D nas plantas calcinogênicas Solanum malacoxylon, Cestrum diurnum, Trisetum flavescens e Nierembergia veitchii. Diferentes extratos das plantas foram administrados por via oral a pintos raquíticos alimentados com ração livre de vitamina D. Após a administração oral dos extratos, o soro sanguíneo foi analisado para determinar os níveis de cálcio, fósforo e de fosfatase alcalina. Foram constatadas substâncias com atividade vitamina D nas quatro plantas. Pela administração de S. malacoxylon e C. diurnum mostraram-se a presença de substância hidrossolúvel, com potente atividade, indicada pelos aumentos significativos de cálcio e fósforo, e pela redução da atividade da fosfatase alcalina. Os experimentos indicaram também que substâncias lipossolúveis estão presentes em ambas as plantas. Pequenas concentrações de substâncias com atividade semelhante à vitamina D com características lipo e hidrossolúveis foram constatadas em N. veitchii e T. flavescens.
Abstract in English:
One hundred samples of the water used for milk production on 10 dairy farms were submitted to counts of total and fecal coliforms, mesophilic microorganisms, Staphylococcus aureus, coagulase negative Staphylococcus and Escherichia colí. The numbers of the indicator microorganisms showed the deficient hygienic and sanitaty conditions on the farms. The results showed also the presence of S. aureus, coagulase negative Staphylococcus and E. coli in 4 (4.0%), 52 (52.0%) and 26 (26.0%) samples respectively. The counts indicate that the water examined is a potential hazard for the sanitaty conditions of the mammary gland and the microbiological quality of the milk.
Abstract in Portuguese:
Foram realizados contagens de coliformes totais, coliformes fecais, microrganismos mesófilos, Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa e de Escherichia coli em 100 amostras de água utilizada na higienização de animais, equipamentos e utensílios de ordenha, oriundo de 10 propriedades leiteiras. Além da precária qualidade higiênico-sanitária verificada através das pesquisas dos. microrganismos indicadores, os resultados obtidos evidenciaram, também, a presença de Staphylococcus aureus, Staphylococcus coagulase negativa e de Escherichía colí em 4 (4,0%), 52 (52,0%) e 26 (26,0%) amostras, respectivamente. Tais achados sugerem que as águas analisadas podem representar importante risco potencial tanto para o estado sanitário da glândula mamária como para a qualidade microbiológica do leite.
Abstract in English:
Virulence factors were determined in 43 cultures of Yersinia enterocolitica serotype 0:3, biotype 4, phagetype VIII, isolated from apparently healthy pigs. Twenty one isolates were from tonsils, twelve from feces, six from colon contents and four from tongues. The in vitro tests consisted of examining autoagglutination at 36ºC, and absorption of Congo Red. The virulence assays of Y. enterocolitica were conducted by in vivo tests, testing the invasiveness into guinea-pig eyes and detection of heat stable enterotoxin in suckling mice. The results revealed a higher positivity percentage of the autoagglutination test (76.7%), followed by absorption of Congo Red (53.5%), invasiveness into guinea-pig eyes (20.9%) and detection of heat-stable enterotoxin (7.0%). A higher correlation was found in vitro test as compareci to in vivo tests, which characterized 53.5% Y. enterocolitica isolates tested as virulent and which allowed the conclusion that the simultaneous utilization of autoagglutination and absorption of Congo Red tests may be relevant for the identification of pathogenic strains.
Abstract in Portuguese:
Foram pesquisados os fatores de virulência em 43 estirpes de Yersinia enterocolitica sorotipo 0:3, biotipo 4, lisotipo VIII isoladas de suínos sadios, sendo 21 amostras provenientes de amigdala, 12 de fezes, seis de conteúdo de cólon e quatro de língua. A avaliação da virulência foi verificada pela invasibilidade em olho de cobaia, detecção de enterotoxina termoestável em camundongo lactente, auto aglutinação a 36 ºC e absorção do vermelho Congo. Os resultados revelaram um maior percentual de positividade no teste de auto-aglutinação (76.7%), seguido da absorção do vermelho Congo (53,9%), invasibilidade em olho de cobaia (20,9%) e detecção de enterotoxina termoestável (7,0%). Evidenciou-se maior correlação entre os testes realizados "in vitro" quando comparados às provas "in vivo", caracterizando 53,5% das amostra testadas, como virulentas. A utilização simultânea dos testes de auto-aglutinação a 36°C e absorção do vermelho Congo na identificação de cepas patogênicas parecem ser importantes.
Abstract in English:
The comparison of the comparative tuberculin test and the Stormont method, performed at the sarne groups of animals, gave highly convergent results in bovines free from tuberculosis and also in infected groups with strong reactors. In weak reactors the results were highly discordant. A group of 21 bovines with negative results at the comparative tuberculin test, but reacting to avian tuberculin, was negative with the Stormont test. Twenty six bovines which reacted strongly positive (4.0mm or more) at the comparative test, with or without non-specific reactions, showed also positive reactions in 88.4%, suspicious reactions in 7.7% and negative reactions in 3.9% at the Stormont test. A group of 19 bovines, initially tested by the Stormont method and considered as infected, when retested by the comparative test after 90 days, showed 84.2% positive reactors and 15.7% negative ones. Groups of bovines with suspicious (2.0 to 2.9mm) or weakly positive reactions (3.0 to 3.9 mm) at the comparative test, showed 20.0% positive, 20.0% suspicious and 60.0% negative reactors in the suspicious group and 53.3% positive, 13.3% suspicious and 33.3% negative reactions in the weakly positive reactors by the Stormont test. Another group of bovines gave suspicious reactions when initially tested by the Stormont method, but showed 50.0% positive, 9.3% suspicious and 40.6 negative reactions when retested by the comparative test. The discordant results of the present and other investigations do not allow to recommend the Stormont test for use in routine procedures for the diagnosis of bovine tuberculosis before a critical evaluation has been made, with slaughter and bacteriological exarnination of reacting animals.
Abstract in Portuguese:
A comparação entre a tuberculinização intradérmica comparada (tuberculina bovina e aviária) e a tuberculinização dupla (com 7 dias de intervalo) conhecida por teste de Stormont, revelou resultados altamente concordantes em grupos de bovinos sem tuberculose e em grupos de animais infectados com fortes reações alérgicas, no entanto, apresentou resultados bem discordantes nos reagentes suspeitos e fracamente positivos em ambos os testes cujas causas não puderam ser esclarecidas por exames necroscópicos e bacteriológicos por razões econômicas. Em um grupo de 21 bovinos com resultados negativos na tuberculização comparada, mas portadores de reações à tuberculina aviária, o teste de Storment revelou também resultados negativos. Em 26 bovinos reagentes positivos no teste comparativo com aumento de espessura da dobra da pele (AEDP) acima de 4,0 mm, com ou sem reações inespecíficas, o teste de Stormont acusou também 88,4% de reações positivas, 7,7% reações suspeitas e 3,9% reações negativas. Em outro experimento, um grupo de 19 bovinos reagentes positivos no teste de Stormont, quando retestado, 90 dias depois pelo teste comparativo, este revelou 84,2% de reagentes positivos e 15,7% de reações negativas. Em grupos de bovinos com reações suspeitas (AEDPs entre 2,0 e 2,9 mm) ou fracamente positivos (AEDPs entre 3,0 e 3,9mm) no teste comparativo, o teste de Stormont revelou 20,0% de reações positivas, 20,0% de reações suspeitas e 60,0% negativas, e 53,3% positivas, 13,3% suspeitas e 33,3% negativas respectivamente. Num grupo de bovinos que no teste de Stormont acusou reações suspeitas e que, 90 dias após foi retestado pela tuberculização comparativa, esta acusou 50,0% de reagentes positivos, 9,3% suspeitos e 40,6% negativos. Os resultados discordantes da presente pesquisa e da de outras não recomendam o uso rotineiro do teste de Stormont no diagnóstico da tuberculose bovina antes de uma avaliação científica criteriosa, com abate e exames bacteriológicos de animais reagentes.
Abstract in English:
A competitive enzyme immunoassay was evaluated using as conjugate monoclonal antibodies B M-38 and B M-40, prepared from mice immunized with Brucellea melitensis 16 M. The competitive enzyme immunoassay was compared with the complement fixation test and an indirect enzyme immunoassay, regarding their efficiency and differential capacity to diagnose brucellosis in cattle vaccinated with B. abortus strain 19. Four hundred and twenty-one sera of vaccinated female calves, obtained between 15 days and 6 months after vaccination, were examined. The competitive enzyme immunoassay using conjugate BM-38 revealed a greater number of positive results (44,18%) than the complement fixation test (35,98%) and the competitive enzyme immunoassay using conjugate BM-40 (29,69%). This last test allowed a higher degree of differentiation than the others, since it revealed a lower number of reactors.
Abstract in Portuguese:
Foi avaliado o teste imunoenzimático competitivo, usando como conjugado os anticorpos monoclonais BM-38 e BM-40, preparados a partir da imunização de camundongos com Brucella melitensis 16 M, em comparação com a reação de fixação de complemento e com o teste imunoenzimático indireto, para diferenciar anticorpos da infecção natural dos induzidos pela vacina B19. Foram testados 421 soros de bezerras vacinadas com B. abortus amostra B 19 e colhidos em intervalos de 15 dias a 6 meses após a vacinação. O teste competitivo usando o conjugado BM-38 apresentou menor capacidade de discriminação que o teste com o conjugado BM-40 (44,18% contra 29,69% de soros com títulos de anticorpos) e que a reação de fixação de complemento (44,18% contra 35,98%) e resultados próximos aos do teste imunoenzimático indireto (54,89% contra 56, 17%), enquanto que o teste competitivo usando o conjugado BM-40 apresentou maior capacidade de discriminação do que os outros testes estudados, uma vez que acusou um menor número de reagentes: 28,9% contra 37, 6% revelados pela reação de fixação de complemento, 29,69% contra 44,18% revelados pelo teste com o conjugado BM-38 e 43,15% contra 56,85% revelados pelo teste imunoenzimático indireto.
Abstract in English:
Two trials were performed to recognize copper deficiency in cattle in the coastal region of Rio Grande do Sul. Heifers and steers were injected, at 3 months intervals, with a preparation containing 100mg of copper. In one farm, 6 months after the start of the trial, the weight gains (85.1 kg) of 67 heifers supplemented were significantly higher (p < 0.05) than the weight gains (80.28 kg) of 68 non supplemented heifers. In another farm in a trial with 2 groups of 57 steers cach, there were no significant weight gain differences between the supplemented and the control group 18 months after the start of the trial. These results suggest a marginal copper deficiency in cattle in the area. In the sarne region, 5 outbreaks of sudden deaths were studied. The mean copper concentration in the livers in 11 cattle that died suddenly was 4.2 ppm - dry basis (d.b.), varying from 1.3 to 8.4 ppm - d.b. These low concentrations indicate that the disease may be associated with a copper deficiency. A disease of calves characterized by flacid paralysis or progressive ataxia at birth was also studied. A myelin deficiency in the spinal cord white matter was observed histologically. Affected calves had low copper concentrations in the liver (7.6 ppm - d.b.) and spinal cord (6.9 and 7.4 ppm - d.b.). The similarity of this congenital hypomielinogenesis with other diseases of the nervous system caused by copper deficiency in cattle and sheep and the low copper concentrations in tissues, suggest that the disease is caused by a copper deficiency.
Abstract in Portuguese:
Dois experimentos foram realizados para estabelecer a ocorrência da deficiência de cobre cm bovinos no Litoral do Rio Grande do Sul. Novilhos e novilhas foram suplementados por via parenteral, a cada 3 meses, com uma emulsão contendo 100 mg de cobre. Em um estabelecimento, 6 meses após o início do experimento, o ganho de peso (85,1 kg) de 67 novilhas suplementadas foi significativamente superior (P < 0,05) ao ganho de peso (80,28 kg) de 68 novilhas que permaneceram como controle. Em outro estabelecimento, em um experimento com 2 grupos de 57 novilhos, não houve diferenças significativas entre o grupo suplementado e o grupo controle, após 18 meses de iniciada a suplementação Esses resultados permitem concluir que ocorre carência de cobre cm algumas áreas do Estado, e que a resposta à suplementação é variável. Foram estudados 5 surtos de mortes súbitas em bovinos, ocorridos em estabelecimentos localizados às margens da Lagoa dos Patos ou da Lagoa Mirim. Os níveis de cobre hepáticos em 11 animais mortos subitamente variaram de 1,3 a 8,4 ppm - base seca (b.s.), com uma média de 4,2 ppm - b.s. Esses resultados indicam a possibilidade de que a deficiência de cobre esteja envolvida na etiologia da enfermidade. Também foi estudada, na mesma região, uma doença dos bovinos caracterizada pelo nascimento de bezerros com paralisia flácida ou ataxia progressiva. Histologicamente foi observada deficiência de mielina na substância branca da medula espinhal. Níveis baixos de cobre foram encontrados no fígado (7,6 ppm- b.s.) e medula (6,9 e 7,4 ppm - b.s.) de 2 bovinos afetados. A semelhança desta hipomielinogênese congênita com outras enfermidades do sistema nervoso causadas por deficiência de cobre em ovinos e bovinos e os baixos níveis de cobre encontrados nos tecidos sugerem que a doença é causada por uma deficiência desse microelemento.
Abstract in English:
Anaerobic, non-sporulating, Gram negative bacteria were isolated from periodontal "cara inchada" - lesions and characterized. The capacity of fermentation and hydrolysis of different substrates by 52 isolates was studied by means of the API 20 A - System. Fifteen isolates which formed black pigmented or brown non-fermenting colonies, were classified as Bacteroides asaccharolyticus according to their growth pattem in CDC culture medium and their morphologic staining properties, as well as to their biochemical and physiologic profile. Twenty-three isolates which showed the sarne colonial characteristics, but were non-fermentative, were c1assified as Bacteroides spp. Based on these results, 8 other cultores were indentified as non-pigmented Bacteroides spp. and 6 isolates as Fusobacterium nucleatum. In addition, 68 strains of the 4 groups of bacteria isolated were studied regarding their growth in BGA (Bacteroides gingivalis agar) and the formation of a fluorescent pigment. No correlation between the growth on BGA and the fluorescence of the brown or black-pigmented cultores was found. Furthermore, although the API 20 A - System allowed an extensive characterization of the isolates, it could not be sufficient for definite taxonomic purposes.
Abstract in Portuguese:
Foram caracterizadas amostras de bactérias anaeróbias não esporuladas Gram negativas isoladas de quatro bezerros com peridontite ("cara inchada"). A capacidade de fermentação ou hidrólise de diferentes substatos de 52 amostras foi verificada pelo Sistema API 20 A. De acordo com o crescimento em meio de cultivo CDC, das características morfotintoriais e do perfil bioqufmico e fisiológico, 15 amostras formadoras de colônias pigmentadas de negro ou marrom não fermentativas foram classificadas como Bacteroides asaccharolyticus e 23, com as mesmas características das colônias, no entanto fermentativas, como Bacteroides spp. Com base nos resultados, foram ainda caracterizadas 8 amostras como Bacteroides spp, não pigmentados e 6 como Fusobacterium nucleatum. Adicionalmente, outras . 68 amostras de bactérias pertencentes aos 4 grupos isolados, foram estudadas quanto à capacidade de crescimento em meio de cultura seletivo BGA (Bacteroides gingivalis agar) e de formação de pigmento fluorescente, perfazendo-se assim 120 amostras. Não foram observadas correlações entre o crescimento em BGA e a fluorescência das amostras pigmentadas de marrom ou negro. Além disso, ainda que o Sistema API 20 A tenha permitido uma caracterização extensa das amostras isoladas, este não podia ser eficaz para fins taxonômicos.
Abstract in English:
The present paper describes the subcutaneous inoculation of goats with botulinum toxin type C to determine the doses required to cause various clinical signs, and to evaluate the bioassay as a means of laboratory confirmation of the diagnosis of botulism. Serial double dilutions in doses ranging from 15.6 to 500 DL50/kg were administered to 6 goats. The animals were checked daily to observe development of characteristic signs. Blood and liver samples were collected to detect the toxin by bioassay in mice. Doses of 500 and 250 DL50/kg induced acute botulism, death occurring between 42 and 46 hours post-inoculation, but the toxin was only detected in serum samples taken from the goat which received the larger dose. Animals inoculated with doses of 125, 62.5 and 31.3 DL50/kg developed the sub-acute forro, but the toxin could not be detected in their blood serum. The chronic forro of botulism was observed in those which received 15.6 DL50/kg doses and the toxin could not be demonstrated either in their serum samples. The results confinn that goats are highly susceptible to botulinum type C toxin and that these animals develop the sarne clinical signs as seen in bovines.
Abstract in Portuguese:
O objetivo do presente trabalho foi reproduzir o botulismo em caprinos, induzido pela toxina tipo C e determinar as doses para desenvolver as diferentes formas clínicas, bem como para avaliar a eficácia do bioensaio em camundongos. Foram utilizados 6 caprinos, inoculados por via subcutânea com a toxina tipo C, em doses de 500 a 15,6 DL50/kg de peso vivo, em diluições duplas seriadas. Os animais foram observados quanto ao desenvolvimento de sintomatologia característica de botulismo e amostras de soro sanguíneo e fígado foram coletadas para pesquisa da toxina pelo bioensaio em camundongos. As doses de 500 e 250 DL50/kg induziram quadro agudo de botulismo evoluindo para a morte entre 42 e 46 horas pós-inoculação. A toxina foi detectada somente no soro do animal que recebeu a dose de 500 DL50/kg. Os animais que receberam as doses de 125, 62,5 e 31,3 DL50/kg desenvolveram quadro subagudo da doença, não sendo detectado a toxina nas amostras analisadas. Observou-se quadro crônico de botulismo no animal inoculado com a dose de 15,6 DL50/kg, não se constatando a presença da toxina no soro. Os resultados confirmaram a alta susceptibilidade dos caprinos à toxina botulínica tipo C, que apresentaram quadros clínicos semelhantes aos observados em bovinos.