Resultado da pesquisa (309)
Termo utilizado na pesquisa Souza
#31 - Indirect ELISA as a complementary diagnostic method of bovine tuberculosis
Abstract in English:
Bovine tuberculosis is an economic and health problem, requiring precise diagnostic methods for its control and eradication. The aim of this study was to evaluate the performance of a commercial enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) test for the diagnosis of bovine tuberculosis. A total of 1,644 cattle from eight dairy herds were evaluated using the comparative cervical tuberculin test (CCTT). Three of the herds had no recent tuberculosis infection, and the other five had shown positive results in a previous tuberculin test. For the serological diagnosis of tuberculosis, a commercial ELISA antibody test kit for Mycobacterium bovis was used. Serum samples from 846 cattle from the eight herds were evaluated using ELISA for M. bovis. Animals that were positive based on either CCTT or ELISA for M. bovis or both were sent to slaughter. Samples of their lungs, livers, and lymph nodes were collected and stored under refrigeration for microbiological culture and subsequent confirmation by polymerase chain reaction. Samples from the same tissues were also fixed with 10% formaldehyde in bottles for histopathological examination and stained with hematoxylin and eosin (HE). Of the 1,644 cattle, 61 were considered positive and 65 inconclusive based on CCTT. Retesting of the inconclusive samples identified an additional 19 positive cases, totaling 80 (4.8%) CCTT-positive animals from five herds. ELISA for M. bovis identified 4.2% (36/846) positive cattle, of which 35 were considered negative and one inconclusive based on CCTT. Of the 36 positive cases identified by ELISA for M. bovis, 27 were euthanized, 11% (3/27) showed suggestive lesions of tuberculosis on macroscopic examination, and two were confirmed by histological, microbiological, and PCR methods. The weak association of ELISA for M. bovis with the results obtained by macroscopic, histological, and microbiological isolation indicates the fragility of ELISA performance in field conditions. Therefore, it is suggested that its use as a complementary method for herd sanitation be based on the local epidemiological situation.
Abstract in Portuguese:
A tuberculose bovina é um problema econômico mundial e de saúde, que requer métodos de diagnóstico precisos para controle e erradicação. Objetivou-se com este estudo avaliar o desempenho de um teste comercial de ELISA no diagnóstico da tuberculose bovina. Foram avaliados pelo teste cervical comparativo (TCC) 1644 bovinos, provenientes de oito rebanhos de exploração leiteira, sendo três deles sem histórico recente da doença, e outros cinco com resultados positivos no último exame de tuberculinização. Para o diagnóstico sorológico da tuberculose utilizou-se um kit comercial de ELISA Mycobacterium bovis antibody test (ELISA M. bovis). Amostras de soro sanguíneo de 846 bovinos provenientes dos mesmos rebanhos foram também avaliadas no ELISA M. bovis. Os bovinos positivos no TCC e/ou ELISA M. bovis foram encaminhados para o abate sanitário. Dos positivos no ELISA para M. bovis foi realizado o exame macroscópico das carcaças e classificação das mesmas em: com presença ou ausência de lesões. Amostras de pulmão, fígado, e linfonodos, foram colhidas em duplicata para realização dos exames de cultivo microbiológico com posterior confirmação por PCR, e exame histopatológico com coloração de hematoxilina e eosina (HE). Dos 1,644 bovinos, 61 foram considerados positivos e 65 inconclusivos no TCC. O reteste dos inconclusivos identificou mais 19 positivos. No total, 80 (4,8%) bovinos positivos no TCC, provenientes de 5 rebanhos foram encaminhados para abate. O ELISA para M. bovis identificou 4,2% (36/846) de bovinos positivos, sendo 36 considerados negativos e um inconclusivo no exame de tuberculinização. Dos positivos no ELISA para M. bovis, 27 foram eutanasiados, e no exame macroscópico das carcaças 11% (3/27) dos animais apresentaram lesões sugestivas de tuberculose, e em apenas dois houve confirmação da doença pelos métodos histológico, microbiológico e PCR. A baixa associação dos resultados obtidos no ELISA para M. bovis com os exames macroscópico, histológico e isolamento microbiológico apontam para a fragilidade do desempenho do ELISA para o diagnóstico de tuberculose. Sugere-se assim que seu uso como método complementar para saneamento de rebanhos, seja adotado com cautela e considere a situação epidemiológica local.
#32 - Tracheal post-vaccinal reaction to different strains of Newcastle disease virus
Abstract in English:
The aim of the present study was to evaluate the post-vaccinal reaction to two lentogenic vaccine strains of Newcatle disease virus (NDV) and a recombinant turkey herpesvirus (rHVT) vaccine expressing the fusion glycoprotein of NDV in broiler chickens through histomorphometric and histopathologic analyses of the trachea. The experiment involved 245 chicks housed in randomized blocks with three different enclosures under controlled conditions of temperature, light and ventilation. Each enclosure represented a vaccine strain and was divided into groups according to the administration route. Each block also had its own control group composed of unvaccinated birds. The vaccine strains PHY.LMV.42 (PL42) and La Sota (LS) were selected according to the Intracerebral Pathogenicity Index (ICPI) and the rHVT-NDV Serotype 3 strain (ST3) was selected for representing non-NDV infection. At two, four, seven, 14 and 21 days post vaccination, fragments from the middle third of the trachea were collected and submitted to routine histological processing. For the histomorphometric analysis, the slides were photographed, and the thickness of the tracheal mucosa was measured. Statistical analysis involved two-way ANOVA and Tukey’s post-hoc test with a 5% significance level. For the histopathological evaluation, lesions were described as to the degree of intensity and distribution. At four and 14 days post vaccination with the LS strain administered by the ocular route, the means of thickening of the tracheal mucosa (20.85±7.31µm and 26.97±5.50µm, respectively) were significantly higher (p<0.05) than for all other strains, which was related to the severe histopathological lesions found in this group, characterized by hyperemia, hyperplasia of the mucous glands, moderate deciliation and multifocal lymphohistiocytic inflammatory infiltrate. At 21 days, broiler chickens vaccinated with the ST3 strain showed more discrete lesions and less thickening of the tracheal mucosa (23.23±7.62µm; p<0.05) in comparison with other studied strains. The lesions found in this group were only hemorrhage, deciliation and mild focal lymphocytic inflammatory infiltrate. The results of the histomorphometry and histopathology of the trachea indicated that vaccination with rHVT-NDV Serotype 3 strain induced lower degree post-vaccine tracheal lesions compared to other vaccine strains analyzed in this study.
Abstract in Portuguese:
Objetivou-se avaliar a reação pós-vacinal de duas estirpes lentogênicas do vírus da doença de Newcastle (VDN) e uma vacina recombinante de herpesvirus de perus (rHVT) que expressa a glicoproteína de fusão de VDN em frangos de corte por meio da histomorfometria e histopatologia da traqueia. Foram utilizados 245 pintos alojados em blocos ao acaso, sendo três galpões distintos em condições controladas de temperatura, luz e ventilação. Cada galpão representou uma cepa vacinal, onde foram divididos por grupos de acordo com a via de administração. Todos os blocos possuíam um grupo controle composto por aves não vacinadas. As cepas vacinais PHY.LMV.42 (PL42) e La Sota (LS) utilizadas foram selecionadas de acordo com o Índice de Patogenicidade Intracerebral (IPIC) e a cepa Sorotipo 3 (ST3), da vacina rHVT-VDN foi selecionada por não representar infecção do VDN. Aos dois, quarto, sete, 14 e 21 dias pós-vacinação, fragmentos do terço médio da traqueia foram coletados e posteriormente processados conforme rotina histológica. Para análise histomorfométrica da mucosa traqueal, as lâminas foram fotografadas e realizadas as mensurações da espessura da mucosa traqueal sendo aplicado teste de análise de variância a dois critérios (ANOVA) e utilizando o post-hoc de Tukey com nível de significância de 5%. Para a avaliação histopatológica foram observadas a presença de lesões microscópicas e estas foram descritas quanto ao grau de intensidade e distribuição. Aos quatro e quatorze dias pós-vacinação com a cepa LS administrada por via ocular, as médias do espessamento da mucosa traqueal (20,85±7,31µm e 26,97±5,50µm, respectivamente) foram significativamente maiores (p<0,05) quando comparada a todas as demais cepas utilizadas, isto se deve às severas lesões histopatológicas encontrados neste grupo, caracterizadas por hiperemia, hiperplasia das glândulas mucosas, deciliação moderada e infiltrado inflamatório linfohistiocitário multifocal moderado. Já aos 21 dias as aves vacinadas com a cepa ST3 apresentaram lesões mais discretas e menor espessamento da mucosa da traqueia (23,23±7,62µm; p<0,05) em comparação às demais cepas estudadas. As lesões encontradas neste grupo foram apenas hemorragia, deciliação e infiltrado inflamatório linfocitário focal discreto. Os resultados da histomorfometria e da histopatologia da traqueia indicou que a vacinação com a rHVT-NDV, cepa Sorotipo 3 induziu menor grau de lesões pós-vacinais na traqueia comparada a outras cepas vacinais analisadas nesse estudo.
#33 - Periodontitis in sheep in Pernambuco, Northeastern Brazil
Abstract in English:
Cases of periodontitis in sheep from the Agreste and Zona da Mata regions of Pernambuco, Northeastern Brazil, are described. Information on breed, age and sex of affected animals as well as clinical and pathological aspects of the disease were obtained during farm visits. Fifteen animals from a total of 450 Santa Inês sheep, aged between three and twelve years, showed low body condition score, dull coat, and difficulty in feeding followed by pain on palpation of the mandibular region. Physical examination of the oral cavity of affected animals and post mortem findings of slaughtered individuals revealed varying degrees of periodontitis, wear, fracture, mobility, and loss of teeth associated with gingival retraction, presence of biofilm and food packing between incisors, premolars and molars teeth. Increased mandibular volume was observed in eight animals and, in two of them, an abscess fistula, exclusively in mandibular teeth. The occurrence of periodontitis in sheep had not been recorded until now in Northeastern Brazil and, thus, this is the first description of cases in the region.
Abstract in Portuguese:
Descrevem-se casos de periodontite em ovinos provenientes das regiões do Agreste e Zona da Mata de Pernambuco, Nordeste do Brasil. Informações sobre raça, idade e sexo dos animais afetados bem como os aspectos clínicos e patológicos dos surtos foram obtidos a partir de visitas às propriedades e são reportados. 15 animais de um total de 450 ovinos da raça Santa Inês, com idade entre três a doze anos de idade manifestaram baixa condição corporal, pelagem sem brilho e dificuldade de alimentar-se, acompanhado de dor à palpação na região mandibular. O exame físico da cavidade oral dos animais afetados e os achados post mortem de indivíduos abatidos revelaram graus variados de periodontite, desgaste, fratura, mobilidade e perda dentária, associados a retração gengival, presença de biofilme e compactação de resíduos alimentares entre os dentes incisivos, pré-molares e molares. Em oito animais havia aumento de volume mandibular e em dois deles observaram-se abscessos fistulados que ocorreram exclusivamente nos dentes mandibulares. A ocorrência de periodontite em ovinos não têm sido registrada no Nordeste do Brasil, sendo estes os primeiros casos descritos na região.
#34 - Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii complex in animals: identification and antimicrobial resistance profile
Abstract in English:
Acinetobacter spp. is emerging as an important human and veterinary pathogen, mostly due to intrinsic and acquired resistance to antimicrobials. Despite its public health relevance, little is known about the prevalence, role of different Acinetobacter species and antimicrobial resistance profile of animal-origin isolates. Traditional phenotypic tests may fail to discriminate Acinetobacter species, therefore molecular analyses are often required as a complementary approach. The objectives of this study were to evaluate the occurrence of strains of the Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (Acb) complex isolated from animal infections including urinary tract infections, otitis, piodermitis and pododermatitis, and its resistance profile against different antimicrobial classes, including carbapenems. All Gram-negative coccobacilli isolates were characterized by MALDI-TOF and multiplex PCR, and the disk diffusion test was used to investigate multi-drug resistance (MDR) and carbapenem resistance genes by PCR as preconized by the standard guidelines. MALDI-TOF technique identified 21 strains belonging to the Acb complex (10 A. pittii, 8 A. baumannii, 3 A. nosocomialis, 1 A. ursingii, and 1 A. venetianus). Multiplex PCR confirmed the results of MALDI-TOF for 20 strains. Eight strains (34.78%) were classified as MDR, being 50% (4/8) A. baumannii, 37.5% (3/8) A. pittii, and 12.5% (1/8) A. nosocomialis. None of the isolates presented phenotypic carbapenemase production. Considering the carbapenem resistance genes, 26.09% (6/23) of the isolates presented one or more carbapenemase genes. From these, 50% (3/6) presented only blaVIM, 33.33% (2/6) presented only blaIMP, and 16.67% (1/6) presented blaIMP e blaVIM, simultaneously. These genes were detected among A. pittii isolates mostly (66.67%, 4/6). This study provides further insights into the occurrence and resistance profile of Acinetobacter of animal origin.
Abstract in Portuguese:
Acinetobacter spp. está emergindo como um importante patógeno humano e veterinário, principalmente devido à resistência intrínseca e adquirida aos antimicrobianos. Apesar de sua relevância para a saúde pública, pouco se sabe sobre a prevalência, o papel das diferentes espécies de Acinetobacter e o perfil de resistência antimicrobiana de isolados de origem animal. Testes fenotípicos tradicionais podem falhar em discriminar espécies de Acinetobacter, portanto, análises moleculares são frequentemente necessárias como uma abordagem complementar. Os objetivos deste estudo foram avaliar a ocorrência de cepas do complexo Acinetobacter calcoaceticus-Acinetobacter baumannii (Acb) isolados de infecções de animais, incluindo infecções do trato urinário, otite, piodermite e pododermatite, e seu perfil de resistência a diferentes classes de antimicrobianos, incluindo os carbapenêmicos. Todas as cepas cocobacilos Gram-negativas foram caracterizados por MALDI-TOF e PCR multiplex, e o teste de difusão em disco foi usado para investigar genes de resistência a múltiplas drogas (MDR) e resistência a carbapenêmicos por PCR conforme preconizado pelas diretrizes padrão. A técnica MALDI-TOF identificou 21 cepas pertencentes ao complexo Acb (10 A. pittii, 8 A. baumannii, 3 A. nosocomialis, 1 A. ursingii e 1 A. venetianus). Multiplex PCR confirmou os resultados de MALDI-TOF para 20 cepas. Oito cepas (34.78%) foram classificadas como MDR, sendo 50% (4/8) A. baumannii, 37.5% (3/8) A. pittii e 12.5% (1/8) A. nosocomialis. Nenhum dos isolados apresentou produção fenotípica de carbapenemases. Considerando os genes de resistência a carbapenemas, 26.09% (6/23) dos isolados apresentaram um ou mais genes de carbapenemases. Destes, 50% (3/6) apresentaram apenas blaVIM, 33.33% (2/6) apresentaram apenas blaIMP e 16.67% (1/6) apresentaram blaIMP e blaVIM, simultaneamente. Esses genes foram detectados principalmente entre os isolados de A. pittii (66.67%, 4/6). Este estudo fornece mais informações sobre a ocorrência e perfil de resistência de Acinetobacter de origem animal.
#35 - Immunohistochemical analysis of ORF2 protein and ORF3 protein of hepatitis E virus in livers of swine in Mato Grosso state, Brazil
Abstract in English:
Hepatitis E is an emerging zoonotic disease caused by hepatitis E virus (HEV). Immunohistochemistry (IHC) can be used to verify viral presence in human and swine livers. The aim of this study was to comparatively analyze the immunolabeling of the ORF2 protein (pORF2) versus the ORF3 protein (pORF3) of HEV in swine livers from subsistence farms in the state of Mato Grosso, Brazil. This study included 25 liver samples formalin fixed paraffin embedded tissue block from a published molecular detection and immunohistochemistry (IHC) study, which used the HEV pORF3 protein, demonstrating 4% (1/25) of positive immunolabeling and 96% (24/25) negative, in contrast to the molecular exam that showed 24% (6/25) of liver samples positive and 76% (19/25) negative. In order to increase the sensitivity of the IHC technique, these samples were analyzed using the antibody for the detection of HEV pORF2, showing 24% (6/25) immunolabeling positive and 76% (19/25) negative, equivalent to the result of molecular analysis on corresponding samples. Thus, the use of antibody to pORF2 increased the number of HEV cases detectable in the IHC by 600%. The IHC added to molecular techniques can be used as a tool for monitoring viral presence in swine livers, constituting a sensitive diagnostic methodology when liver samples fixed in formalin and embedded in paraffin are available.
Abstract in Portuguese:
A hepatite E é uma enfermidade emergente de caráter zoonótico causada pelo Vírus da Hepatite E (HEV). A imuno-histoquímica (IHQ) pode ser utilizada para verificar a presença viral em fígados de humanos e suínos. O objetivo deste estudo foi analisar comparativamente a imunomarcação da proteína ORF2 (pORF2) versus proteína ORF3 (pORF3) de HEV em fígados de suínos de criatórios de subsistência no estado de Mato Grosso, Brasil. Este trabalho incluiu 25 amostras de fígados de suínos fixados em formol e embebidos em parafina provenientes de um estudo publicado de detecção molecular e imuno-histoquímica (IHQ), que utilizou pORF3 de HEV, demonstrando 4% (1/25) de imunomarcação positiva e 96% (24/25) negativa, em contraste com o exame molecular que apresentou 24% (6/25) das amostras de fígado positivas e 76% (19/25) negativas. Com o objetivo de aumentar a sensibilidade da técnica de IHQ, essas amostras foram analisadas utilizando o anticorpo para detecção da pORF2 de HEV, apresentando 24% (6/25) de imunomarcação positiva e 76% (19/25) negativa, equivalente ao resultado da análise molecular em amostras correspondentes. Desta forma, o uso do anticorpo para pORF2 ampliou o número de casos de HEV detectáveis na IHQ em 600%. A IHQ somada a técnica molecular pode ser utilizada como ferramenta de monitoramento da presença viral em fígados de suínos, constituindo uma metodologia diagnóstica sensível quando há disponibilidade de amostras de fígado fixadas em formol e embebidas em parafina.
#36 - Electrocardiographic, echocardiographic and heart biomarker parameters in sheep experimentally poisoned by Palicourea marcgravii (Rubiaceae)
Abstract in English:
The present study aimed to identify and describe cardiac alterations in sheep experimentally poisoned with Palicourea marcgravii through analysis of serum cardiac biomarkers (serum troponin I and creatine kinase - CK-MB) and electro and echocardiographic assessments to contribute to a better understanding of the poisoning pathophysiology. P. marcgravii is the main plant within a group of 22 species that cause sudden death in Brazil; its toxic principle is sodium monofluoroacetate. Eight healthy crossbreed male sheep, aged between five and twelve months, weighing 14 to 27kg, were evaluated. The animals received 1g kg-1 of P. marcgravii plants orally. The sheep were evaluated before administering the plant (T0) through electro and echocardiography and blood collection to assess cardiac biomarkers (CK-MB and cTnI). Collections and analyses were repeated every four hours until the animal’s death. During the study, there was the presence of extravasation of serum troponin I carried out in a qualitative test, with positive values at time T4, and the serum CK-MB biomarker had a peak at T4 and slightly decreased at T8. The electro and echocardiographic examinations showed that the cause of death in these animals was due to acute heart failure characterized by arrhythmias, tachycardia/ventricular fibrillation, drop in cardiac output, left ventricular (LV) systolic dysfunction by the progressive decrease in the LV ejection fraction (EF), decrease in LV fractional shortening (FS), and decrease in aortic flow velocity and aortic flow gradient. This study seems to be the first to evaluate cardiac alterations in sheep poisoned by P. marcgravii through cardiac biomarkers and electro and echocardiographic exams.
Abstract in Portuguese:
O presente estudo objetivou identificar e descrever as alterações cardíacas de ovinos intoxicados experimentalmente por Palicourea marcgravii através das análises de biomarcadores cardíacos séricos (troponina I sérica e a creatinoquinase - MB) e das avaliações eletro e ecocardiográficas contribuindo para o melhor entendimento da fisiopatologia da intoxicação. Palicourea marcgravii é a principal planta dentro de um grupo de 22 espécies que causam “morte súbita” no Brasil e seu princípio tóxico é o monofluoracetato de sódio. Foram utilizados oito ovinos saudáveis machos, sem raça definida, com idades entre cinco e doze meses e peso de 14 a 27kg. Os animais receberam 1g/kg de Palicourea marcgravii por via oral. Os ovinos foram avaliados momentos antes da administração da planta (T0) através de eletro e ecocardiograma e coleta de sangue para avaliação dos biomarcadores cardíacos (CK-MB e cTnI). As análises e coletas foram repetidas a cada quatro horas até o óbito do animal. Durante o estudo observou-se extravasamento de troponina I sérica realizada em teste qualitativo, com valores positivos já em T4, assim como o biomarcador CK-MB sérico teve seu pico de aumento em T4 e em T8 houve uma leve redução. Aos exames eletro e ecocardiográfico foi possível determinar que a causa do óbito nestes animais ocorreu devido à insuficiência cardíaca aguda caracterizada por arritmias, taquicardia/fibrilação ventricular, queda no débito cardíaco, disfunção sistólica do ventrículo esquerdo (VE) pela diminuição progressiva da fração de ejeção (EF) do VE, diminuição na fração de encurtamento (FS) do VE, diminuição da velocidade do fluxo aórtico e do gradiente do fluxo aórtico. Este é o primeiro estudo que avalia as alterações cardiológicas de ovinos intoxicados por P. marcgravii através de biomarcadores cardíacos e exames eletro e ecocardiográficos.
#37 - Copper deficiency in dairy goats and kids
Abstract in English:
The clinical, pathological and reproductive aspects of an outbreak of copper deficiency in dairy goats and kids from the semiarid region of Pernambuco, Brazil are described. Ten adult dairy goats with clinical signs of deficiency and four kids presenting enzootic ataxia born from copper deficient does were separated from the herd, and examined. In the dairy goats, the average serum concentration of copper was 6.1±2.8mmol/L and iron was 39.5±8.2mmol/L. In kids, the average serum concentration of copper was 3.8±0.9mmol/L and iron was 38.5±4.1mmol/L. Clinical signs in dairy goats consisted of pale mucous membranes, anemia, emaciation, diarrhea, achromotrichia, brittle hair and alopecia. The main reproductive alterations consisted of prolonged anestrus, embryonic resorption and high indices of retained placenta. The kids born from copper deficient dairy goats were weak, and presented neonatal or late ataxia until 70 days of life. Six dairy goats and four kids were necropsied. Most ovaries examined were small, firm and did not present viable follicles on their surface. Microscopically, there was reduction of viable follicles in addition to disorganization of follicular and stromal structures, with marked follicular atresia. Microscopically, changes in kids with enzootic ataxia consisted of neuronal chromatolysis and axonal degeneration, mainly in neurons of the spinal cord. In this study, the source of high iron was not identified, but it is known that outbreaks of copper deficiency can occur due to excess iron intake, mainly when adequate mineral supplementation is not provided for the goat herds.
Abstract in Portuguese:
Descrevem-se os aspectos clínicos, patológicos e reprodutivos de um surto de deficiência de cobre em cabras leiteiras e em cabritos da região semiárida de Pernambuco, Brasil. Dez cabras leiteiras adultas com sinais clínicos de deficiência de cobre e quatro cabritos com ataxia enzoótica nascidos dessas cabras foram separados do rebanho e examinados. Nas cabras leiteiras, a concentração média de cobre sérico foi de 6,1±2,8mmol/L e a concentração média de ferro sérico foi de 39,5±8,2mmol/L. Nos cabritos, a concentração média de cobre sérico foi de 3,8±0,9mmol/L e a concentração média de ferro sérico foi de 38,5±4,1mmol/L. Os sinais clínicos nas cabras consistiram em mucosas pálidas, anemia, diarreia, acromotriquia, pelos opacos e quebradiços e alopecia. As principais alterações reprodutivas consistiram em anestro prolongado, reabsorção embrionária e aumento da taxa de retenção de placenta. Os cabritos nascidos vivos dessas cabras nasceram fracos, com ataxia neonatal ou desenvolveram ataxia tardia em até 70 dias de vida. Seis cabras leiteiras e quatro cabritos foram necropsiados. Nas cabras, a maioria dos ovários examinados macroscopicamente eram pequenos, firmes e não apresentavam folículos viáveis em sua superfície. Microscopicamente, houve redução de folículos viáveis, além de desorganização das estruturas foliculares, com marcada atresia folicular. Macroscopicamente não foram observadas alterações nos cabritos com ataxia enzoótica. As lesões histológicas observadas nesses cabritos consistiram em cromatólise neuronal e degeneração axonal, principalmente em neurônios da medula espinhal. Neste estudo a fonte dos altos teores de ferro no soro não foi identificada, mas sabe-se que surtos de deficiência de cobre podem ocorrer devido ao excesso de ingestão de ferro, principalmente quando não é fornecida suplementação mineral adequada para os rebanhos caprinos.
#38 - Proteomics characterization of Staphylococcus spp. from goat mastitis and phenogeno-typical assessment of resistance to beta-lactamics
Abstract in English:
Mastitis occupies a prominent place among the diseases that affect dairy herds due to economic problems and public health. Staphylococcus spp. are infectious agents more involved in the etiology of caprine mastites, especially coagulase-negative Staphylococcus. Nineteen isolates of Staphylococcus spp. were obtained from subclinical caprine mastitis. All isolates were characterized by MALDI-TOF MS, being 47.36% (9/19) identified for S. epidermidis, 15.78% (3/19) for S. warneri, 10.52% (2/19) for S. aureus and S. caprae and 5.26% (1/19) for S. lugdunensis, S. simulans, and S. cohnii. All isolates characterized by MALDI-TOF were subjected a to polymerase chain reaction (PCR) for the 16S rRNA gene of Staphylococcus spp. to confirm the gender. After determining the species, tests for phenotypic detection of resistance to beta-lactams were carried out simple disk diffusion oxacillin, cefoxitin, penicillin G and amoxicillin + clavulanic acid, agar “screen” oxacillin and microdilution (MIC) cefoxitin. The disk diffusion test showed a strength of 58% (11/19) for penicillin G, 26.31% (5/19) for cefoxitin and 26.31% (5/19) for oxacillin. All strains were susceptible to amoxicillin + clavulanic acid and agar “screen” oxacillin. In the MIC, 63.15% (12/19) of the samples were cefoxitin resistant (MIC >4.0µg/ml). Then isolates were subjected to detection of the mecA resistance genes and regulators (mecl and mecRI), mecC and blaZ. Two samples of Staphylococcus epidermidis had the mecA gene. All isolates were negative for the mecA gene variant, mecl, mecRI, mecC and blaZ. These findings reinforce the importance of this group of microorganisms in the etiology of subclinical mastitis in goats and open perspectives for future research to investigate the epidemiology of the disease.
Abstract in Portuguese:
A mastite ocupa lugar de destaque entre as doenças que acometem o rebanho leiteiro, em virtude de problemas econômicos e de saúde pública. Staphylococcus spp. são os agentes infecciosos mais envolvidos na etiologia das mastites caprinas, principalmente Staphylococcus coagulase negativo. Dezenove isolados de Staphylococcus spp. foram obtidos a partir de mastite caprina subclínica. Todos os isolados foram caracterizados por MALDI-TOF MS, sendo 47,36% (9/19) identificadas como S. epidermidis, 15,78%(3/19) como S. warneri, 10,52% (2/19) como S. caprae e S. aureus e 5,26% (1/19) tanto para S. lugdunensis, como para S. simulans e S. cohnii. Todos os isolados caracterizados pelo MALDI-TOF foram submetidos a reação em cadeia da polimerase (PCR) para o gene 16rRNA de Staphylococcus spp. para a confirmação do gênero. Após a determinação da espécie, foram realizadas as provas para a detecção fenotípica de resistência aos beta-lactâmicos: difusão em disco simples de oxacilina, cefoxitina, penicilina G e amoxacilina +ácido clavulânico, ágar “screen” de oxacilina e microdiluição em caldo (MIC) de cefoxitina. O teste de difusão em disco demonstrou resistência de 58% (11/19) para penicilina G, 26,31% (5/19) para cefoxitina e 26,31% (5/19) para oxacilina. Todas as amostras foram sensíveis a amoxicilina + ácido clavulânico e ao ágar “screen” de oxacilina. Pelo MIC, 63,15% (12/19) das amostras foram resistentes a cefoxitina (MIC >4,0µg/ml). Em seguida os isolados foram submetidos a detecção dos genes de resistência mecA e seus reguladores (mecl e mecRI), mecC e blaZ. Duas amostras de S. epidermidis apresentaram o gene mecA. Todos os isolados foram negativos para a variante do gene mecA, mecl, mecRI, mecC e blaZ. Tais achados reforçam a importância deste grupo de microrganismos na etiologia da mastite subclínica em caprinos e abre perspectivas para futuras pesquisas para a investigação da epidemiologia da doença.
#39 - Expression of icaA and icaD genes in biofilm formation in Staphylococcus aureus isolates from bovine subclinical mastitis
Abstract in English:
Staphylococcus spp. plays a significant role in the etiology of bovine mastitis. Staphylococcus aureus is considered the most important species due to the high prevalence and the difficulty of in vivo treatment that is related to the expression of virulence factors and biofilm formation. This study aimed to detect the phenotypic expression of the biofilm formation in 20 S. aureus isolated from bovine mastitis and to evaluate the expression and regulation of genes involved in its production. MALDI-TOF and phenogenotypic identification assays were performed to characterize the isolates. The phenotypic biofilm production and the presence of icaA and icaD and bap genes were evaluated. The Agr system was typified (agr I, agr II, agr III and agr IV) and its regulator (agr RNAIII) was detected. Furtherly, Real-time PCR (qPCR) was performed at chosen times to quantify the expression of icaA, icaD and hld genes in three selected isolates. All 20 strains were biofilm producers and most presented icaA and icaD genes. Only one isolate presented the bap gene. The agr gene type II showed a prevalence of 70%. Transcriptional analysis revealed increased expression of ica genes at eight hours of growth. These results confirm that polysaccharides production mediated by the icaADBC operon genes is an essential mechanism to the biofilm formation and contributes to the early stages of bacterial growth.
Abstract in Portuguese:
Staphylococcus spp. desempenham um papel significativo na etiologia da mastite bovina. Staphylococcus aureus é considerada a espécie mais importante devido a alta prevalência e a dificuldade de tratamento in vivo que está relacionado à expressão dos fatores de virulência e formação de biofilme. Este estudo teve como objetivo detectar a expressão fenotípica da formação de biofilme em 20 cepas de S. aureus isoladas de mastite bovina e avaliar a expressão e regulação de genes envolvidos em sua produção. MALDI-TOF e ensaios de identificação fenogenotípica foram realizados para caracterizar os isolados. A produção fenotípica de biofilme e a presença dos genes icaA, icaD e bap foram avaliadas. O sistema Agr foi tipificado (agr I, agr II, agr III e agr IV) e seu regulador (agr RNAIII) foi detectado. Além disso, a PCR em tempo real (qPCR) foi realizada nos tempos determinados para quantificar a expressão dos genes icaA, icaD e hld em três isolados selecionados. Todas as 20 linhagens foram produtoras de biofilme e a maioria apresentava os genes icaA e icaD. Apenas um isolado apresentou o gene bap. O gene agr do tipo II mostrou uma prevalência de 70%. A análise transcricional revelou aumento da expressão de genes ica às oito horas de crescimento. Estes resultados confirmam que a produção de polissacarídeos mediada pelos genes do operon icaADBC é um mecanismo essencial para a formação do biofilme e contribui para os estágios iniciais do crescimento bacteriano.
#40 - Effects of lumbar myelography on subarachnoid pressure and cardiorespiratory parameters in healthy sheep
Abstract in English:
The purpose of this study was to evaluate the effects of lumbar myelography on subarachnoid pressure, cardiorespiratory parameters and pressure-volume index in sheep. Eight sheep were evaluated. The animals were submitted to puncture of the cisterna magna for monitoring of subarachnoid pressure (SaP). Lumbar myelography was performed through applying Iohexol (0.4mL/kg). ToC, PAS, PAD, MAP, InspISO, FeISO, SaP and CPP were recorded immediately after anesthetic stabilization (M0), during lumbar puncture (M1), and two, four and six minutes after contrast application (M2, M3 and M4, respectively). Blood pressure initially increased, then decreased, returning to basal level, similarly observed for InspISo and FeISo. The SaP rose initially thereafter remaining stable. Despite of the effect on subarachnoid pressure, lumbar myelography can be considered safe in sheep.
Abstract in Portuguese:
O objetivo foi avaliar os efeitos da mielografia lombar na pressão subaracnóidea, parâmetros cardiorrespiratórios e índice pressão-volume em ovinos. Oito ovelhas foram avaliadas. Os animais foram submetidos à punção da cisterna magna para monitoramento da pressão subaracnoidea (SaP). A mielografia lombar foi realizada com a aplicação de Iohexol (0,4mL/kg). Os momentos estudados foram: imediatamente após a estabilização anestésica (M0), durante a punção lombar (M1), dois, quatro e seis minutos após a aplicação do contraste (M2, M3 e M4, respectivamente), para avaliar as seguintes variáveis: ToC, PAS, PAD, MAP, InspISO, FeISO, Sap e CPP. A pressão arterial aumentou inicialmente, depois diminuiu, retornando aos valores iniciais, padrão também observado para o InspISo e o FeISo. O SaP subiu inicialmente, posteriormente, permanecendo estável. A mielografia lombar, apesar de influenciar a pressão subaracnoidea, pode ser considerada segura em ovinos.
