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Ano 2019 - Volume 39, Número 4
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Diagnóstico de leptospirose canina: avaliação de dois ensaios de PCR em comparação com o teste de microaglutinação, 39(4):255-262
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RESUMO.- Martin P.L., Stanchi N.O., Brihuega B.F., Bonzo E., Galli L. & Arauz M.S. 2019. Diagnosis of canine leptospirosis: evaluation of two PCR assays in comparison with the microagglutination test. Pesquisa Veterinária Brasileira 39(4):255-262. [Diagnóstico de leptospirose canina: avaliação de dois ensaios de PCR em comparação com o teste de microaglutinação.] Servicio Central de Laboratorio, Hospital Escuela, Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional de La Plata, Av. 60 y 118, CC 296, La Plata, CP 1900, Buenos Aires, Argentina. E-mail: plmartin@fcv.unl.edu.ar
O diagnóstico definitivo da leptospirose canina é geralmente realizado demonstrando a seroconversão em amostras do paciente no período agudo e de convalescença por serologia. No entanto, a aplicação de técnicas de PCR pode contribuir para a confirmação de casos suspeitos num período de tempo mais curto. O objetivo deste estudo foi avaliar dois ensaios de PCR publicados em humanos (PCR lipL32 em tempo real e PCR-rrs convencional) em culturas puras e em amostras de sangue com anticoagulante, soro e urina experimentalmente contaminados. Posteriormente, investigamos a utilidade de ambos os ensaios de PCR em amostras clínicas de cães com suspeita de leptospirose tomando a técnica de microaglutinação (MAT) como referência. A sensibilidade analítica foi de 1 e 10 genoma equivalente por reação para PCR-lipL32 em tempo real e para PCR-rrs convencional, respectivamente. Ambos os ensaios amplificaram corretamente as 14 estirpes patogênicas, mas foram negativos para avaliar o ADN de outros microrganismos que poderiam estar presentes em amostras clinicas. Em nas amostras experimentalmente contaminadas PCR-LipL32 em tempo real detectou 100 bactérias/mL em sangue total, 1000 bactérias/mL em soro e 10 bactérias/mL em urina. Enquanto o PCR-rrs convencional detectou 1000 bactérias/mL em sangue total e soro e 100 bactérias/mL na urina. Dos 51 cães suspeitos, sete foram considerados casos confirmados pela MAT. O PCR-lipL 32 em tempo real detectou seis dos sete casos confirmados, enquanto o PCR-rrs convencional foi positivo em quatro deles. As técnicas de PCR avaliadas provaram ser uma ferramenta de diagnóstico útil na confirmação de casos clínicos caninos quando utilizados em conjunto com a técnica MAT. |
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